請(qǐng)問(wèn)怎樣快速提取細(xì)菌的DNA??？
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也不用提的太純，提取的DNA是用來(lái)做PCR的···一定要快速簡(jiǎn)便?。《乙怯性敿?xì)步驟的，不要試劑盒提取??！·····謝謝了······... 也不用提的太純，提取的DNA是用來(lái)做PCR的···一定要快速簡(jiǎn)便??！而且要是有詳細(xì)步驟的，不要試劑盒提取??！·····謝謝了······ 展開(kāi)
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- shoppingoh 2010-08-01 00:00:00
- 直接用菌落pcr 不需提取DNA，直接用牙簽挑點(diǎn)菌落，或取3到5微升菌液， 在pcr反應(yīng)體系中先不加dna聚合酶，用沸水煮5到10分鐘，加PCR聚合酶，進(jìn)行反應(yīng)即可。 也可以將上述所有東西加入PCR反應(yīng)體系后，在設(shè)置pcr反應(yīng)步驟時(shí)，在Z前面加一步，10min 95攝氏度。進(jìn)行PCR反應(yīng)即可。
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- 淚伊冰 2010-08-01 00:00:00
- 可以用超聲波細(xì)胞破碎儀，具體的數(shù)據(jù)，還要你自己摸索，我只是提供這個(gè)方法。
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- iypoctnm 2012-06-06 00:00:00
- 1. 樣品收集：從培養(yǎng)好的LB培養(yǎng)基中吸取1.5ml 細(xì)菌培養(yǎng)液，并放到離心機(jī)中5000rpm 離心10min，棄上清； 2. 于沉淀物中加入200ul的無(wú)菌去離子水，混勻，懸浮沉淀； 3. 懸浮液在100℃沸水浴中加熱10min，然后在4℃放置5min，再在離心機(jī)上12000rpm離心20min； 4. 取上清作PCR的模板備用。
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- 辰琉偲 2016-12-02 00:00:00
- 跟樓上那種類似 菌落或者離心下來(lái)的菌體，加點(diǎn)無(wú)菌水，開(kāi)水煮十分鐘就可以拿來(lái)當(dāng)模板了。 樓上和我說(shuō)的這種開(kāi)水煮的方法不是每次都奏效，特別是一些革蘭氏陽(yáng)性菌，細(xì)胞壁太厚，高溫?zé)o法破胞，或者菌體碎片對(duì)pcr影響太大，經(jīng)常會(huì)有p不出來(lái)的情況。而且這種dna只能現(xiàn)用，不能長(zhǎng)時(shí)間保持，-20℃條件下大概一周失效。 個(gè)人感覺(jué)成功概率不高大概10次中能p出7次吧。適合大批量pcr的時(shí)候用。 如果直接煮不行，可以先用溶菌酶處理，再開(kāi)水煮。 如果還不行，那只能抽取了，我有個(gè)方法1h可以提取完，dna可以保存幾年，你要是不行了，再問(wèn)我。
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- 也不用提的太純，提取的DNA是用來(lái)做PCR的···一定要快速簡(jiǎn)便?。《乙怯性敿?xì)步驟的，不要試劑盒提取??！·····謝謝了······... 也不用提的太純，提取的DNA是用來(lái)做PCR的···一定要快速簡(jiǎn)便??！而且要是有詳細(xì)步驟的，不要試劑盒提取啊！·····謝謝了······ 展開(kāi)
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