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細(xì)菌DNA的提取方法有哪些？

山東博科生物產(chǎn)業(yè)有限公司 2019-08-14 16:28:13 999  瀏覽

  • 細(xì)菌DNA的提取方法有哪些？

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  • 上海依肯機(jī)械設(shè)備有限公司 2019-08-14 16:39:51
    <p style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;margin-top: 0px; margin-bottom: 17px; padding: 0px; color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋體, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_38">答：一、水煮模板法——主要用于PCR反應(yīng)</p><p style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;margin-top: 17px; margin-bottom: 17px; padding: 0px; color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋體, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_38">操作Z簡便，對試劑條件要求低。缺點(diǎn)是純度不夠高，可能會(huì)含有RNA、蛋白等雜質(zhì)。但是作為一般檢測目的的PCR反應(yīng)模板已經(jīng)足夠了。</p><p style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;margin-top: 17px; margin-bottom: 17px; padding: 0px; color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋體, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_38">二、CTAB/NaCl 法</p><p style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;margin-top: 17px; margin-bottom: 17px; padding: 0px; color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋體, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_38">CTAB/NaCl法提取的DNA純度較高，蛋白雜質(zhì)較少，保存時(shí)間長，編者更喜歡把終濃度為20μg/ml RnaseA加在第5步溫育的時(shí)候，這樣Z后沒有RnaseA污染。每一步操作細(xì)致一些，得到的DNA可用于Southern blot。</p><p style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;margin-top: 17px; margin-bottom: 17px; padding: 0px; color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋體, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_38">注意：長時(shí)間保存DNA可放于-20℃，但要盡量減少反復(fù)凍融，否則影響DNA質(zhì)量。</p><p style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;margin-top: 17px; margin-bottom: 17px; padding: 0px; color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋體, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_38">三、鹽析法</p><p style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;margin-top: 17px; margin-bottom: 17px; padding: 0px; color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋體, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_38">介于方法一和方法二之間，CTAB雖然取出糖分效果較好，但CTAB本身也是有毒的，所以此方法放棄了CTAB。</p><p style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;margin-top: 17px; margin-bottom: 17px; padding: 0px; color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋體, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_38">實(shí)驗(yàn)注意：提基因組Z好要將槍頭尖剪掉（剪掉以后在酒精燈上迅速過一下，使其斷口圓滑）。以免槍頭損傷基因組，抽干時(shí)Z好是風(fēng)干。</p>

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