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- 花朵朵的哆哆 2017-09-16 00:00:00
- DNA電泳一般使用的都是瓊脂糖凝膠電泳，電泳的驅動力靠DNA骨架本身的負電荷。 蛋白質電泳（一般指SDS-PAGE）一般使用的都是聚丙烯酰胺凝膠電泳，電泳的驅動力靠與蛋白質結合的SDS上所攜帶的負電荷。 所以相同點就是樣品都是帶負電荷的，從負極向正極移動，移動的距離都和樣品的分子量有關。而且這兩個電泳體系可以互相交換使用。進行大分子蛋白質電泳時，可以考慮換用瓊脂糖凝膠，因為該體系孔徑大。相反，如果需要精確到各位數(shù)堿基的DNA電泳也可以使用聚丙烯酰胺凝膠系統(tǒng)，因為使用該系統(tǒng)可以將相差一個堿基的兩條DNA鏈分開。 不同點首先是樣品不同。這個就不用多說了。其次是結果的觀察方法不同。DNA電泳普遍使用EB做染料，在紫外燈下觀察；而蛋白電泳使用的考馬斯亮藍染色，還需要經(jīng)過脫色步驟，不過觀察起來比較簡單。還有就是膠體系的差別，DNA電泳通常是一膠跑到底，而蛋白質電泳則會有分離膠和濃縮膠之區(qū)別。 電泳中樣品移動的本質確實是樣品所攜帶的電荷。但是，區(qū)分這些條帶直接可以用分子量而無需使用電荷數(shù)，是因為這些樣品的電荷/分子量比都是恒定的了。以DNA分子為例，它在電泳中的移動是靠其骨架中磷酸所攜帶的負電荷來實現(xiàn)的，而這個磷酸分子又是每一個核苷酸中都有的，所以DNA分子所攜帶的負電荷數(shù)是由其核苷酸總數(shù)決定的。而且，DNA分子中核苷酸的組成動輒成百上千，在如此大的分子量面前，討論單個核苷酸之間分子量的差別就顯得毫無意義。這樣，DNA分子中負電荷的量就可以用DNA的分子量來代替，反過來，DNA的分子量也就可以用DNA分子所攜帶的電荷來代替（一句話，DNA分子的電荷/分子量比是恒定的）。 這在蛋白電泳中（特別是SDS-PAGE中）是一樣的。在SDS-PAGE中，SDS將蛋白質變性成直線分子并緊密包裹于其上，使得其所攜帶的電荷與蛋白分子量成了一定的比例，剩下的就和核酸電泳一樣了。
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