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  墩烙肇偈鶴壩 2015-10-29 00:00:00

  本來就不一樣啊，為什么要一樣？

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  姐姐是魔鬼 2015-10-31 00:00:00

  內(nèi)參基因和待測基因本來就不一樣。 擴增曲線和溶解曲線不是一個概念。擴增曲線是每擴增一個循環(huán)，測量一次熒光強度。這個由底物的濃度和擴增效率所決定。目的基因和內(nèi)參的濃度肯定不同，而且引物的序列不同，擴增效率也可能不一樣，所以兩者的曲線肯定有可能不一樣。 SyberGreen PCR，溶解曲線是PCR完成以后，對產(chǎn)物逐步加溫，測量熒光強度的變化，而不是熒光強度本身。DNA雙鏈在溫度達到TM附近時，發(fā)生大量的解離，熒光強度的變化Z大，出現(xiàn)峰值。這個峰值的位置是由PCR產(chǎn)物的TM值所決定的，和PCR產(chǎn)物的序列，GC比例有關(guān)。所以內(nèi)參基因和目的基因的峰值肯定是不一樣的。

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  教學的規(guī)劃 2015-10-29 00:00:00

  內(nèi)參基因和待測基因本來就不一樣。 擴增曲線和溶解曲線不是一個概念。擴增曲線是每擴增一個循環(huán)，測量一次熒光強度。這個由底物的濃度和擴增效率所決定。目的基因和內(nèi)參的濃度肯定不同，而且引物的序列不同，擴增效率也可能不一樣，所以兩者的曲線肯定有可能不一樣。 SyberGreen PCR，溶解曲線是PCR完成以后，對產(chǎn)物逐步加溫，測量熒光強度的變化，而不是熒光強度本身。DNA雙鏈在溫度達到TM附近時，發(fā)生大量的解離，熒光強度的變化Z大，出現(xiàn)峰值。這個峰值的位置是由PCR產(chǎn)物的TM值所決定的，和PCR產(chǎn)物的序列，GC比例有關(guān)。所以內(nèi)參基因和目的基因的峰值肯定是不一樣的。

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