瓊脂糖凝膠電泳的電壓設(shè)置成多少好？高了有什么壞處嗎？
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說明書上4-10V/cm，但是跑的太慢，1個多小時都不如我原來設(shè)置成100V時跑36min時的效果，一個師姐說電泳不能時間太長，那么電壓高了有沒有不好呢？請各位高手指教?。?！
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- zzxxcc36 2012-03-28 00:00:00
- 請教一下電泳槽是不是跟電源直接連接？
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- 夕顏_49 2012-02-24 00:00:00
- 120V跑半小時就行。電壓太高會造成溫度過高，但120V沒問題。
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- 伯爵456 2012-02-24 00:00:00
- 在低電壓時，線狀DNA片段的遷移速率與所加電壓成正比。但是隨著電場強度的增加，不同分子量的DNA片段的遷移率將以不同的幅度增長，片段越大，因場強升高引起的遷移率升高幅度也越大，因此電壓增加，瓊脂糖凝膠的有效分離范圍將縮小。要使大于2kb 的DNA 片段的分辨率達到Z大，所加電壓不得超過5v/cm。
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- iplxwqdo7841 2017-10-07 19:54:48
- 首先要知道電壓高低對跑膠的影響，才能決定快慢嘛 電壓高低是相對的，膠才是本質(zhì)，電壓過高會因為發(fā)熱導(dǎo)致膠融化，跑太長時間marker會跑出去，甚至污染電解液 如果電壓相同，你配0.8%的膠肯定比配1.2%要跑的快嘛 還有就是用途了，是分離樣品還是就觀察條帶，后者就可以跑快點嘛，有沒有東西一看就知道了 （快速跑膠秘籍：Quick and dirty method） 把裝膠的溶液槽置于冰盒內(nèi)跑，使冰塊包圍著裝置?？礂l帶的話140V，15min搞定，注意裝置一定要保持水平！ PS：師姐一般都比較保守，有問題當然要問師兄的哇，然后才好教師妹，是吧
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瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作為介質(zhì)的一種電泳方法，其兼具“分子篩”和“電泳的雙重作用。
瓊脂糖(Agarose)是一種線性多糖聚合物，是從紅色海藻產(chǎn)物瓊脂中提取而來的，當瓊脂糖溶液加熱到沸點后冷卻凝固便會形成良好的電泳介質(zhì)，其密度是由瓊脂糖的濃度決定的。
經(jīng)過化學(xué)修飾的低熔點的瓊脂糖，在結(jié)構(gòu)上比較脆弱，因此在較低的溫度下便會熔化，可用于核酸片段的電泳檢測。
瓊脂糖凝膠電泳檢測的主要是核酸的完整性和大小，只要核酸不是太小或者太大(超出電泳分離范圍)，該方法的可信度非常高。
核酸會根據(jù)pH不同帶有不同電荷，在電場中受力大小不同，因此跑的速度不同，瓊脂糖凝膠電泳即根據(jù)這個原理對核酸進行區(qū)分。
核酸分子在pH高于其等電點的溶液中帶負電荷，在電場中向正極移動。由于核酸的戊糖-磷酸骨架在結(jié)構(gòu)上具有重復(fù)性，長度相同的核酸鏈幾乎具有等量的凈電荷，因此它們能以同樣的速率向正極方向移動。
此外，含有瓊脂糖的凝膠具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，物質(zhì)分子通過時會受到阻力，大分子物質(zhì)在涌動時受到的阻力大，因此在瓊脂糖凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質(zhì)和數(shù)量，而且還取決于分子大小，這就大大提高了分辨能力。
在同樣電場的強度下，核酸分子的遷移速度取決于核酸分子本身的大小和構(gòu)型以及瓊脂糖凝膠的濃度，簡而言之，分子量較大的核酸遷移速度較慢，分子量較小的核酸遷移速度較快，這就是應(yīng)用凝膠電泳技術(shù)分離核酸片段的基本原理。
德晟公司產(chǎn)品特點及優(yōu)勢：
您不用再四處采購瓊脂糖、核酸染料、電泳液和loading buffer等試劑，一個試劑盒全部解決。
本試劑盒可以給您節(jié)省一個小時左右的實驗時間。
a. 省去了您制膠的繁瑣，并且預(yù)制膠是核酸染料預(yù)染的，無需電泳液染色或后染色。簡捷方便，即開即用。
b. 本試劑盒專門配備了高壓快速電泳液，如果您的核酸樣品片段在2000bp以下，電泳的快慢您可以隨時掌控，調(diào)整電壓即可，一般的mini膠最快可以5-10分鐘完成；如果您在實驗中使用的Marker或者核酸樣品條帶多、片段長（核酸樣品片段大于2000bp），您就需要根據(jù)實際情況，調(diào)節(jié)到合適的低壓，或仍使用您原來的低壓電泳條件。
3. 用本產(chǎn)品電泳得到的DNA片段進行膠回收，不影響后續(xù)的DNA連接等反應(yīng)。
運輸及保存：4°C保存和運輸，有效期3個月，切勿放置于0°C以下或者常溫以上，這樣試劑盒內(nèi)的預(yù)制膠就會凍裂或變形，影響您的使用。
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