納氏試劑分光光度法測氨氮空白值偏高的原因探討

一、檢測原理

以游離態(tài)的氨或銨根離子等形式存在的氨氮與納氏試劑反應生成淡紅棕色絡合物，該絡合物的吸光度與氨氮含量成正比，于420nm波長處測量。

二、實驗步驟

三、線性空白值偏高的常見問題原因分析及解決方案

1、用1cm比色皿時的空白吸光度空白值偏高，大于0.030，導致線性不好或截距偏大。

原因分析：

(1)試劑純度（所用試劑含銨鹽，如酒石酸鉀鈉）；

(2)試驗用水被污染，引入氨或者銨鹽。

解決方案：

(1)用礦物質(zhì)穩(wěn)定劑代替酒石酸鉀鈉；

(2)在無氨條件下制水并密封儲存，或者使用高質(zhì)量新鮮的蒸餾水代替無氨水，并且在實驗前測試空白吸光度低于0.030方可使用。

2.顯色溫度的控制

冬季室溫往往較低，如室溫介于5-10℃時顯色會不完全；而溫度在20-25℃時顯色最完全且較穩(wěn)定；溫度超過30℃，顯色不穩(wěn)定且極易褪色，導致吸光度偏低。所以顯色溫度應控制在20-25℃之間。

3.顯色時間的控制

3.1  納氏反應時間小于10min，反應不充分；10-30min反應相對穩(wěn)定；30-45min顯色會相應加深；大于45min，顯色會處于減退狀態(tài)。因此應控制反應時間在10-30min。

3.2  顯色完全后應盡快測定，防止顏色加深或褪色影響吸光度。 

4.比色皿的尺寸選擇和吸附

4.1  根據(jù)樣品的濃度可以選擇10mm或者20mm的比色皿，選擇10mm比色皿時，空白吸光度應該小于0.03，相應地，選擇20mm比色皿時，空白吸光度應該小于0.06。

4.2  高濃度在比色皿中的吸附尤其明顯，可能導致測定結(jié)果偏高。盡量按濃度從低到高的順序測定，尤其是測標曲時；

4.3  為了準確測定，測樣前用蒸餾水沖洗比色皿3遍以上再測定，以減少吸附產(chǎn)生的誤差；

4.4  測定完成后，比色皿上壁上如仍有吸附物，應將比色皿放在鉻酸洗液或稀硝酸中浸泡片刻，再進行沖洗后備用。

5.顯色劑用量對測定結(jié)果的影響

表1  納氏試劑加入量(LV化汞)對空白值和2mg/L標液吸光度的影響

從表1可知，隨著納氏試劑加入量增大，空白值會變高。應按照國標方法要求加入合適體積的納氏試劑。

6.納氏試劑的使用與儲存

6.1納氏試劑使用前需恒溫至室溫，且使用前不可搖勻，應吸取上清液使用。納氏試劑在生產(chǎn)配制后也需靜置進行沉淀。

6.2納氏試劑的使用選擇，根據(jù)HJ 535-2009，市面上LV化汞和DIAN化汞兩種原料的納氏試劑均可使用，如圖1所示。

圖1  HJ 535-2009方法中對納氏試劑選擇的規(guī)定

6.3納氏試劑應冷藏避光保存。

文章來源：標準物質(zhì)ZX（https://www.gbw-china.com/)