納氏試劑分光光度法測氨氮空白值偏高的原因探討

一、檢測原理

以游離態(tài)的氨或銨根離子等形式存在的氨氮與納氏試劑反應(yīng)生成淡紅棕色絡(luò)合物，該絡(luò)合物的吸光度與氨氮含量成正比，于420nm波長處測量。

二、實(shí)驗(yàn)步驟

三、線性空白值偏高的常見問題原因分析及解決方案

1、用1cm比色皿時的空白吸光度空白值偏高，大于0.030，導(dǎo)致線性不好或截距偏大。

原因分析：

(1)試劑純度（所用試劑含銨鹽，如酒石酸鉀鈉）；

(2)試驗(yàn)用水被污染，引入氨或者銨鹽。

解決方案：

(1)用礦物質(zhì)穩(wěn)定劑代替酒石酸鉀鈉；

(2)在無氨條件下制水并密封儲存，或者使用高質(zhì)量新鮮的蒸餾水代替無氨水，并且在實(shí)驗(yàn)前測試空白吸光度低于0.030方可使用。

2.顯色溫度的控制

冬季室溫往往較低，如室溫介于5-10℃時顯色會不完全；而溫度在20-25℃時顯色最完全且較穩(wěn)定；溫度超過30℃，顯色不穩(wěn)定且極易褪色，導(dǎo)致吸光度偏低。所以顯色溫度應(yīng)控制在20-25℃之間。

3.顯色時間的控制

3.1  納氏反應(yīng)時間小于10min，反應(yīng)不充分；10-30min反應(yīng)相對穩(wěn)定；30-45min顯色會相應(yīng)加深；大于45min，顯色會處于減退狀態(tài)。因此應(yīng)控制反應(yīng)時間在10-30min。

3.2  顯色完全后應(yīng)盡快測定，防止顏色加深或褪色影響吸光度。 

4.比色皿的尺寸選擇和吸附

4.1  根據(jù)樣品的濃度可以選擇10mm或者20mm的比色皿，選擇10mm比色皿時，空白吸光度應(yīng)該小于0.03，相應(yīng)地，選擇20mm比色皿時，空白吸光度應(yīng)該小于0.06。

4.2  高濃度在比色皿中的吸附尤其明顯，可能導(dǎo)致測定結(jié)果偏高。盡量按濃度從低到高的順序測定，尤其是測標(biāo)曲時；

4.3  為了準(zhǔn)確測定，測樣前用蒸餾水沖洗比色皿3遍以上再測定，以減少吸附產(chǎn)生的誤差；

4.4  測定完成后，比色皿上壁上如仍有吸附物，應(yīng)將比色皿放在鉻酸洗液或稀硝酸中浸泡片刻，再進(jìn)行沖洗后備用。

5.顯色劑用量對測定結(jié)果的影響

表1  納氏試劑加入量(LV化汞)對空白值和2mg/L標(biāo)液吸光度的影響

從表1可知，隨著納氏試劑加入量增大，空白值會變高。應(yīng)按照國標(biāo)方法要求加入合適體積的納氏試劑。

6.納氏試劑的使用與儲存

6.1納氏試劑使用前需恒溫至室溫，且使用前不可搖勻，應(yīng)吸取上清液使用。納氏試劑在生產(chǎn)配制后也需靜置進(jìn)行沉淀。

6.2納氏試劑的使用選擇，根據(jù)HJ 535-2009，市面上LV化汞和DIAN化汞兩種原料的納氏試劑均可使用，如圖1所示。

圖1  HJ 535-2009方法中對納氏試劑選擇的規(guī)定

6.3納氏試劑應(yīng)冷藏避光保存。

文章來源：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)ZX（https://www.gbw-china.com/)