2分鐘教你做實(shí)驗(yàn)—納氏試劑分光光度法測(cè)氨氮空白值偏高的原因探討

壇墨質(zhì)檢科技股份有限公司 2021-08-11 11:43:14 1241  瀏覽

• 納氏試劑分光光度法測(cè)氨氮空白值偏高的原因探討

  
  

  一、檢測(cè)原理

  以游離態(tài)的氨或銨根離子等形式存在的氨氮與納氏試劑反應(yīng)生成淡紅棕色絡(luò)合物，該絡(luò)合物的吸光度與氨氮含量成正比，于420nm波長處測(cè)量。

  二、實(shí)驗(yàn)步驟

  1	移取標(biāo)準(zhǔn)溶液、待測(cè)溶液定容至50毫升
  2	分別加入1.0mL酒石酸鉀鈉或礦物質(zhì)穩(wěn)定劑2滴
  3	加入以二LV化汞為原料的納氏試劑1.5mL或以DIAN化汞為原料的納氏試劑1.0mL
  4	混勻后靜置10min
  5	10mm比色皿，在420nm波長下，以水作參比測(cè)試吸光度

  三、線性空白值偏高的常見問題原因分析及解決方案

  1、用1cm比色皿時(shí)的空白吸光度空白值偏高，大于0.030，導(dǎo)致線性不好或截距偏大。

  原因分析：

  (1)試劑純度（所用試劑含銨鹽，如酒石酸鉀鈉）；

  (2)試驗(yàn)用水被污染，引入氨或者銨鹽。

  解決方案：

  (1)用礦物質(zhì)穩(wěn)定劑代替酒石酸鉀鈉；

  (2)在無氨條件下制水并密封儲(chǔ)存，或者使用高質(zhì)量新鮮的蒸餾水代替無氨水，并且在實(shí)驗(yàn)前測(cè)試空白吸光度低于0.030方可使用。

  2.顯色溫度的控制

  冬季室溫往往較低，如室溫介于5-10℃時(shí)顯色會(huì)不完全；而溫度在20-25℃時(shí)顯色最完全且較穩(wěn)定；溫度超過30℃，顯色不穩(wěn)定且極易褪色，導(dǎo)致吸光度偏低。所以顯色溫度應(yīng)控制在20-25℃之間。

  3.顯色時(shí)間的控制

  3.1  納氏反應(yīng)時(shí)間小于10min，反應(yīng)不充分；10-30min反應(yīng)相對(duì)穩(wěn)定；30-45min顯色會(huì)相應(yīng)加深；大于45min，顯色會(huì)處于減退狀態(tài)。因此應(yīng)控制反應(yīng)時(shí)間在10-30min。

  3.2  顯色完全后應(yīng)盡快測(cè)定，防止顏色加深或褪色影響吸光度。 

  4.比色皿的尺寸選擇和吸附

  4.1  根據(jù)樣品的濃度可以選擇10mm或者20mm的比色皿，選擇10mm比色皿時(shí)，空白吸光度應(yīng)該小于0.03，相應(yīng)地，選擇20mm比色皿時(shí)，空白吸光度應(yīng)該小于0.06。

  4.2  高濃度在比色皿中的吸附尤其明顯，可能導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果偏高。盡量按濃度從低到高的順序測(cè)定，尤其是測(cè)標(biāo)曲時(shí)；

  4.3  為了準(zhǔn)確測(cè)定，測(cè)樣前用蒸餾水沖洗比色皿3遍以上再測(cè)定，以減少吸附產(chǎn)生的誤差；

  4.4  測(cè)定完成后，比色皿上壁上如仍有吸附物，應(yīng)將比色皿放在鉻酸洗液或稀硝酸中浸泡片刻，再進(jìn)行沖洗后備用。

  5.顯色劑用量對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響

  
  

  表1  納氏試劑加入量(LV化汞)對(duì)空白值和2mg/L標(biāo)液吸光度的影響

  從表1可知，隨著納氏試劑加入量增大，空白值會(huì)變高。應(yīng)按照國標(biāo)方法要求加入合適體積的納氏試劑。

  6.納氏試劑的使用與儲(chǔ)存

  6.1納氏試劑使用前需恒溫至室溫，且使用前不可搖勻，應(yīng)吸取上清液使用。納氏試劑在生產(chǎn)配制后也需靜置進(jìn)行沉淀。

  6.2納氏試劑的使用選擇，根據(jù)HJ 535-2009，市面上LV化汞和DIAN化汞兩種原料的納氏試劑均可使用，如圖1所示。

  圖1  HJ 535-2009方法中對(duì)納氏試劑選擇的規(guī)定

  6.3納氏試劑應(yīng)冷藏避光保存。

  文章來源：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)ZX（https://www.gbw-china.com/)