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  超炫丶帥男 2017-07-20 00:00:00

  標(biāo)本　標(biāo)本的選擇根據(jù)感染部位?？扇√?、支氣管灌洗液、尿、糞、腦脊液或胸、腹水。其他肺外感染可取血或相應(yīng)部位分泌液或組織細(xì)胞。 直接涂片鏡檢　標(biāo)本直接涂片或集菌后涂片，用抗酸染色。若找到抗酸陽性菌即可初步診斷?？顾崛旧话阌脄iehl-neelsen法。為加強(qiáng)染色，可用ik(intensified kinyoun)法染色。將石炭酸復(fù)紅染色過夜，用0.5% 鹽酸乙醇脫色30s，則包括大多結(jié)核分枝桿菌l型也可著色。為提高鏡檢敏感性，也可用金胺染色，在熒光顯微鏡下結(jié)核分枝桿菌呈顯金黃色熒光。 濃縮集菌　先集菌后檢查，可提高檢出率。培養(yǎng)與動物試驗也必須經(jīng)集菌過程以除去雜菌。腦脊液和胸、腹水無雜菌，可直接離心沉淀集菌。痰、支氣管灌洗液、尿、糞等污染標(biāo)本需經(jīng)4% naoh（痰和堿的比例為1:4，尿、支氣管灌洗液和堿的比例為1:1）處理15min，時間過長易使結(jié)核分枝桿菌l型與非結(jié)核分枝桿菌死亡。尿標(biāo)本先加5% 鞣酸、5% 乙酸各0.5ml于錐形量筒內(nèi)靜置，取沉淀物處理。處理后的材料再離心沉淀。取沉淀物作涂片染色鏡檢。若需進(jìn)一步作培養(yǎng)或動物接種，應(yīng)先用酸中和后再離心沉淀。 分離培養(yǎng)　將經(jīng)中和集菌材料接種于固體培養(yǎng)基，器皿口加橡皮塞于37℃培養(yǎng)，每周觀察1次。結(jié)核分枝桿菌生長緩慢，一般需2～4周長成肉眼可見的落菌。液體培養(yǎng)可將集菌材料滴加于含血清的培養(yǎng)液，則可于1～2周在管底見有顆粒生長。取沉淀物作涂片，能快速獲得結(jié)果，并可進(jìn)一步作生化、敏等測定和區(qū)分結(jié)核分枝桿菌與非結(jié)核分枝桿菌。國內(nèi)學(xué)者已證明結(jié)核分枝桿菌l型可存在于血細(xì)胞內(nèi)或粘附于細(xì)胞表面。這種患者往往血沉加快，用低滲鹽水溶血后立即接種高滲結(jié)核分枝桿菌l型培養(yǎng)基能提高培養(yǎng)陽性率。 動物試驗　將集菌后的材料于豚鼠腹股溝皮下，3～4周后若局部淋巴結(jié)腫大，結(jié)核菌素試驗陽轉(zhuǎn)，即可進(jìn)行解剖。觀察肺、肝、淋巴結(jié)等器官有無結(jié)核病變，并作形態(tài)、培養(yǎng)等檢查。若6～8周仍不見發(fā)病，也應(yīng)進(jìn)行解剖檢查。 快速診斷　一般涂片檢查菌數(shù)需5x103～4/ml，培養(yǎng)需1x102/ml，標(biāo)本中菌數(shù)少于此數(shù)時不易獲得陽性結(jié)果，且培養(yǎng)需時較長。目前已將多聚酶鏈反應(yīng)（pcr）擴(kuò)增技術(shù)應(yīng)用于結(jié)核分枝桿菌dna鑒定，每ml中只需含幾個細(xì)菌即可獲得陽性，且1?2d得出結(jié)果。操作中需注意實(shí)驗器材的污染問題，以免出現(xiàn)假陽性。又細(xì)菌l型由于缺壁并有代償性細(xì)胞膜增厚，而一般常用的溶菌酶不能使細(xì)胞膜破裂釋出dna，以致造成pcr假陰性。用組織磨碎器充分研磨使細(xì)胞破裂后，則可出現(xiàn)陽性。目前有條件的單位使用bactec法，以含14c棕櫚酸作碳源底物的7h12培養(yǎng)基，測量在細(xì)菌代謝過程中所產(chǎn)生的14c量推算出標(biāo)本中是否有抗酸桿菌，5～7d就可出報告。

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