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注射用水微生物超標(biāo)要做菌種鑒定嗎

Gay力的Bl 2017-05-11 08:44:55 438  瀏覽
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全部評論(1條)

  • sunhong1114 2017-05-12 00:00:00
    注射用水微生物超標(biāo)要做菌種鑒定 傳統(tǒng)方法細(xì)菌做革蘭氏染色 運(yùn)動性試驗 各種代謝 然后查伯杰氏細(xì)菌手冊;用分子做的話提總DNA,pcr擴(kuò)增16srDNA全長片段,上NCBI數(shù)據(jù)庫比對,選擇近緣序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹鑒定。 真菌的話主要根據(jù)形態(tài),特別是有性型生殖形態(tài)鑒定;分子的話一般擴(kuò)增ITS區(qū)域,比對,建樹鑒定。 首先你要確定待鑒定的菌種一定是純種 。如果菌種不純,所觀察到的現(xiàn)象則是混合現(xiàn)象,這樣自然不會得到正確的結(jié)果。因此在鑒定之前,首先要將菌種純化。 純化方法,一般有2種:平板劃線單菌落分離法和單細(xì)胞分離法。前一種操作簡便,效果良好,適用范圍廣。 菌種鑒定的方法一般有常規(guī)鑒定和分子生物學(xué)方法: (1)常規(guī)鑒定:菌落形態(tài)觀察、革蘭氏染色、菌毛染色、糖類分解實(shí)驗、吲哚實(shí)驗、淀粉水解實(shí)驗、V-P實(shí)驗、甲基紅實(shí)驗、檸檬酸鹽利用實(shí)驗、硝酸鹽還原實(shí)驗、接觸酶實(shí)驗等 (2)分子生物學(xué)方法:細(xì)菌16SrDNA菌種鑒定:提取DNA,特定引物PCR擴(kuò)增,PCR產(chǎn)物純化測序,進(jìn)化樹分析;真菌18S rDNA/ITS菌種鑒定流程也是一樣的。

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