黃曲霉毒素(aflatoxins)是一種由黃曲霉和寄生曲霉等真菌經(jīng)過聚酮途徑產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物，其結(jié)構(gòu)通常包含一個(gè)雙呋喃環(huán)和一個(gè)氧雜萘鄰?fù)?，天然產(chǎn)生的黃曲霉毒素根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)不同分為B?、B?、G? 、G?四種。

食品遭受產(chǎn)毒真菌以及霉菌毒素污染的問題在世界范圍內(nèi)反復(fù)發(fā)生，被污染的農(nóng)作物作為飼料資源被畜禽食用后， 攜帶的霉菌毒素又可在肉、蛋、奶等食品中蓄積，通過食物鏈傳遞， 危害人類健康。

逗點(diǎn)生物采用最新自主研發(fā)的Copure?228多功能凈化柱，建立玉米粉中黃曲霉毒素B?、B?、G?、G?檢測(cè)的LC-MS/MS檢測(cè)方法。該方法低、中、高三個(gè)水平的加標(biāo)回收率均在90-100 %之間，RSD小于5 %，操作簡(jiǎn)便快捷，與國內(nèi)外的競(jìng)品相比，具有回收率高和脫色凈化效果好的優(yōu)勢(shì)，能夠作為玉米粉中黃曲霉毒素檢測(cè)的參考方法。

本方法適用于谷物及其制品、豆類及其制品、堅(jiān)果及籽類、油脂及其制品、調(diào)味品、嬰幼兒配方食品和嬰幼兒輔助食品中黃曲霉毒素B?、B?、G?、G?的測(cè)定。

參照 《GB 5009.22-2016  食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中黃曲霉毒素B族和G族的測(cè)定》。

一、樣品前處理

1.1  樣品提取

（1）稱取 5 g試樣于50 mL離心管中，加入一定量同位素內(nèi)標(biāo)工作液振蕩混合后靜置30 min。

（2）加入20 mL乙腈-水溶液（84+16），渦旋混勻，置于超聲波/渦旋振蕩器或搖床中振蕩20 min，在6000 r/min下離心10 min，取上清液備用。

1.2  樣品凈化

（1）向玻璃試管中加入10 mL樣品提取液。

（2）將Copure? 228多功能凈化柱（貨號(hào)：COAF228）橡膠頭從試管頂端插入試管中，并向下壓凈化柱至試管底端。

（3）將凈化柱上部?jī)艋蟮臉悠诽崛∫喝〕鲋翗悠菲炕駿P管中。

（4）取5 mL凈化提取液，氮?dú)獯蹈?，? mL初始流動(dòng)相復(fù)溶，渦旋 30s 溶解殘?jiān)?，過微孔濾膜，上機(jī)分析。

二、儀器條件

儀器設(shè)備：液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀 SCIEX Triple Quad? 4500 

色譜柱：Waters C18   2.1x100mm 1.7um

流動(dòng)相：A：0.1%甲酸水    B：乙腈

流動(dòng)相梯度：初始80%A，20%A（0 min~2 min），20%A（2 min~3 min），

80%A（3 min~3.1min），80%A（3.1min~5min）

流速：0.3 mL/min

柱溫：室溫

進(jìn)樣體積：10.0 μL

質(zhì)譜條件：

檢測(cè)方式：多離子反應(yīng)檢測(cè)（MRM）；

表1 離子源控制條件

表2 離子選擇參數(shù)

（注：*為定量離子）

三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表3  玉米粉中黃曲霉毒素加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果

圖1 不同品牌多功能凈化柱處理加標(biāo)樣品后的脫色效果圖（①玉米粉加標(biāo)樣品-未凈化處理    ②Copure?228-凈化處理    ③ 國外A品牌-凈化處理     ④ 國內(nèi)B品牌-凈化處理）

Copure?228脫色效果明顯，其脫色能力與國外A品牌相當(dāng)，并顯著優(yōu)于國內(nèi)B品牌。

圖2 使用Copure?228凈化后的加標(biāo)樣品的EIC色譜圖

四、訂購信息

2020版藥典中新增多種中藥材的黃曲霉毒素檢測(cè)，并給出限量要求。

快檢技術(shù)的應(yīng)用滿足了中藥材快速高效檢測(cè)的要求，并且極大降低了檢測(cè)成本，在毒素檢測(cè)領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。

一、膠體金檢測(cè)試紙條法

膠體金檢測(cè)試紙條法分為兩種：定性試紙條和快速定量試紙條，適用于中藥材快速初篩及原料驗(yàn)收等階段的真菌毒素檢測(cè)。

1.Pribolab定量檢測(cè)試紙條

（1）適用項(xiàng)目：黃曲霉毒素B1

（2）產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：

15分鐘獲得檢測(cè)報(bào)告

每一味藥材經(jīng)過獨(dú)立驗(yàn)證，適用性強(qiáng)

獨(dú)特的處理方法，去除多種活性成分及雜質(zhì)干擾

與藥典方法比對(duì)，實(shí)現(xiàn)高度準(zhǔn)確性

無需溫育反應(yīng)，方便快捷

（3）產(chǎn)品使用：

定量檢測(cè)需配備Pribolab專用多功能定量檢測(cè)儀進(jìn)行讀數(shù)。標(biāo)準(zhǔn)曲線IC卡已配置好，無需手動(dòng)輸入標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)，需要注意的是上機(jī)讀值前務(wù)必先使用同批次隨附曲線卡（試紙條包裝盒蓋內(nèi)側(cè)粘貼曲線卡）中標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)值，不同批次不可混用。

Pribolab定性檢測(cè)試紙條

適用項(xiàng)目：黃曲霉毒素B1/總量

（2）產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：

快速篩選，僅需十分鐘；

適合現(xiàn)成檢測(cè)，結(jié)果可肉眼直接判讀；

性價(jià)比高，結(jié)果準(zhǔn)確可靠；

（3）實(shí)驗(yàn)過程：

（4）結(jié)果判定：

（5）中藥試紙條檢測(cè)產(chǎn)品及配套儀器：

二、酶聯(lián)免疫試劑盒

(1) 適用項(xiàng)目：黃曲霉毒素B1

中藥專用試劑盒是根據(jù)《2020版-2351真菌毒素測(cè)定法》獨(dú)立開發(fā)的產(chǎn)品，它適用于藥典中黃曲霉毒素ELISA檢測(cè)方法。

(2)產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：

1小時(shí)內(nèi)獲得檢測(cè)報(bào)告

實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)，對(duì)比限量要求

獨(dú)特的處理方法，去除多種活性成分及雜質(zhì)干擾

與藥典方法比對(duì)，范圍廣，更便捷

檢測(cè)效率提升2倍

（3）酶聯(lián)免疫試劑盒產(chǎn)品及配套儀器：

現(xiàn)行使用的2020年版藥典中，對(duì)于黃曲霉毒素的檢測(cè)有明確要求，現(xiàn)檢測(cè)品種由2015年藥典要求的19種中藥材增加到25種中藥材原料，及用這些原料制成的飲片、丸劑等成品藥，現(xiàn)有2020年版藥典中對(duì)于黃曲霉的檢測(cè)方法有三種，第一種是高效液相色譜法+光化學(xué)衍生法；第二種是高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法；第三種是酶聯(lián)免疫法?，F(xiàn)在大部分藥檢所機(jī)構(gòu)及中藥企業(yè)實(shí)驗(yàn)室基本采用第一種方法居多，不管是從檢測(cè)復(fù)雜程度、設(shè)備成本、耗材成本多方面考慮，第一法都有一定的優(yōu)勢(shì)。我們公司可以提供第一法的解決方案，并給國內(nèi)100+中藥企業(yè)提供過解決方案，如需要解決方案的可與我們溝通聯(lián)系。

現(xiàn)行藥典方法都是化驗(yàn)室用來定量檢測(cè)的，從樣品前處理到得到結(jié)果，最快也需要3小時(shí)以上，而這是樣品已經(jīng)入庫，對(duì)于黃曲霉風(fēng)險(xiǎn)比較高的樣品，例如酸棗仁、柏子仁、遠(yuǎn)志等中藥材，如果已經(jīng)入庫后，且黃曲霉超標(biāo)，該樣品將無法進(jìn)入到生產(chǎn)環(huán)節(jié)，這樣對(duì)于企業(yè)的經(jīng)濟(jì)損失將是非常大的，那就急需要一種能現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)黃曲霉的設(shè)備，并且結(jié)果有保證的檢測(cè)方法。

中檢維康生物公司提供一套現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)中藥材黃曲霉的方案，基于膠體金免疫層析快速檢測(cè)技術(shù)（GICA）通過圖像分析技術(shù)定量快速檢測(cè)中藥材中黃曲霉毒素B1、黃曲霉毒素總量、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮，以及赭曲霉毒素A等真菌毒素的含量。

微囊藻毒素LR試劑盒(MC-LR)ELISA檢測(cè)試劑盒本生生物公司供應(yīng)：ELISA試劑盒,分光光度計(jì)，血清，熒光定量PCR耗材，移液器吸嘴，微量離心管，進(jìn)口凍存管，細(xì)胞培養(yǎng)皿，培養(yǎng)板，培養(yǎng)瓶，吸頭，儀器及手套，色譜耗材，針頭過濾器。
貨號(hào)：BS-4964
中文名稱：微囊藻毒素LR(MC-LR)ELISA試劑盒
規(guī)格：96T/48T
保存條件及有效期：
1、試劑盒保存：2-8℃。
2、有效期：6個(gè)月.
檢測(cè)種屬：人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨、猴ELISA試劑盒等種屬。
微囊藻毒素LR試劑盒(MC-LR)ELISA檢測(cè)試劑盒試劑盒組成：
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 ; 2 酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶
3 酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條 ; 4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 ; 6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶
7 終止液 6ml×1 瓶; 8 標(biāo)準(zhǔn)品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶
9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶; 10 說明書 1 份
11 封板膜 2 張; 12 密封袋 1 個(gè)
微囊藻毒素LR試劑盒(MC-LR)ELISA檢測(cè)試劑盒