生物實(shí)驗(yàn)，小麥種子做DNA提取，是否一定要用PCR擴(kuò)增？
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如題，實(shí)驗(yàn)室要做小麥DNA分析，但是我們沒(méi)有PCR的儀器，種子大概有好幾十克那么多，是不是就不用買(mǎi)PCR了？急需解答，謝謝生物專(zhuān)業(yè)相關(guān)人士幫幫忙！謝謝了！
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- zpzp78 2009-02-25 00:00:00
- 樓主有概念性錯(cuò)誤吧。。。。 提取DNA本來(lái)就不需要PCR，你想想，你要的是小麥的全部基因組，而不是某個(gè)特殊的區(qū)域，你的需求能靠?jī)蓚€(gè)PRIMER就解決嗎？當(dāng)然，你有幾十克的種子，應(yīng)該夠提取出來(lái)個(gè)100-200微克的DNA了。 如果你想單獨(dú)分析某些DNA片段，那PCR儀肯定是需要的。不過(guò)在這個(gè)情況下，你仍然需要提取出DNA，然后再單獨(dú)設(shè)計(jì)PRIMER。 你的課題沒(méi)有寫(xiě)清楚，不過(guò)我相信你是要調(diào)查某些基因的變異吧？
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- lindalyz66 2009-02-25 00:00:00
- PCR儀對(duì)于基因分析是必不可少的，哪怕你們實(shí)驗(yàn)室不購(gòu)買(mǎi)也要借用別處的。 用于分析輻射育種后的變異，幾十克種子中提取的DNA足夠了。
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- 孚*の眼 2009-02-25 00:00:00
- 要做基因分析，Z好是要有PCR儀器的。 DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，加入設(shè)計(jì)引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。 標(biāo)準(zhǔn)的PCR過(guò)程分為三步： 1.DNA變性（90℃-96℃）：雙鏈DNA模板在熱作用下， 氫鍵斷裂，形成單鏈DNA 2.退火（25℃-65℃）：系統(tǒng)溫度降低，引物與DNA模板結(jié)合，形成局部雙鏈。 3.延伸（70℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右Z佳的活性）的作用下，以dNTP為原料，從引物的5′端→3′端延伸，合成與模板互補(bǔ)的DNA鏈。 每一循環(huán)經(jīng)過(guò)變性、退火和延伸，DNA含量既增加一倍。
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- ﹏晴天娃娃 2009-02-25 00:00:00
- 如果分析某個(gè)基因，就需要作PCR；如果全基因組分析，就沒(méi)法PCR了。 如果只做幾次PCR，可以去找公司或某個(gè)實(shí)驗(yàn)室。
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- 善緣小杰我愛(ài)你 2009-02-25 00:00:00
- 應(yīng)該要 幾十克提取的DNA并不是很多
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- 真真切切ii 2009-02-25 00:00:00
- 如果你不需要經(jīng)常擴(kuò)增DNA片段，你可以不去買(mǎi)PCR儀。但在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中，是需要進(jìn)行PCR操作的。因?yàn)槟悴豢赡茏鋈蚪M序列的變化研究，而是研究某些片段。你需要將這些片段通過(guò)PCR擴(kuò)增出來(lái)，然后交給測(cè)序公司測(cè)序。 還有一種方法，你可以將提出的總基因組DNA交給測(cè)序公司，并告知你要考察的片段，測(cè)序公司會(huì)幫你進(jìn)行擴(kuò)增。 要提基因組DNA，幾十克種子足夠了。一般一克左右的組織樣品提出的DNA就足夠操作了。
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