在PCR擴(kuò)增基因時(shí)為什么要用限制性內(nèi)切酶
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我和一同學(xué)都在做基因多態(tài)性的實(shí)驗(yàn)，我倆選的基因不同，查閱了文獻(xiàn)，我做PCR擴(kuò)增時(shí)，不需要限制性內(nèi)切酶，并且我已做出和文獻(xiàn)上一樣的基因條帶；而他的實(shí)驗(yàn)文獻(xiàn)上報(bào)道需要限制性內(nèi)切酶，我不知為什么？
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- jinjijinn 2010-07-10 00:00:00
- 只有識(shí)別了才可以擴(kuò)增撒
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- 穩(wěn)穩(wěn)雯雯98 2010-07-11 00:00:00
- 應(yīng)該是酶切PCR產(chǎn)物吧，因?yàn)樽龌蚨鄳B(tài)性，可能你的基因在不同生態(tài)型里面序列是有變化，那么這些變化怎么檢測(cè)出來(lái)，Z的方法就是測(cè)序，能準(zhǔn)確的知道那些位置上的堿基序列不一樣，第二個(gè)就是先把這一段基因序列PCR擴(kuò)增放大量，然后用個(gè)酶進(jìn)行酶切PCR產(chǎn)物，看看不同模板的酶切帶型是不是一樣的，有的類似于限制酶切片段多態(tài)性（RFLP）
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- af05522 2010-07-11 00:00:00
- pcr擴(kuò)增本身不需要使用限制性內(nèi)切酶。只是擴(kuò)增完了之后，需要把基因連接到質(zhì)粒載體時(shí)才需要限制性內(nèi)切酶，制造粘性末端或者平末端。在通常的基因克隆實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中，限制性內(nèi)切酶只是切除兩端少量的幾個(gè)堿基，所以你pcr擴(kuò)增后的條帶不使用限制性內(nèi)切酶與使用的區(qū)別是看不出來(lái)的。
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- 敏姐是個(gè)好人0 2010-07-10 00:00:00
- 真核生物基因外顯子中有不能表達(dá)為蛋白質(zhì)的片段.故用限制性內(nèi)切酶去掉多余部分.
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