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- nttaoliang 2015-07-26 00:00:00
- 有好幾年沒做實(shí)驗(yàn)了，不過我對1樓的回答有些疑問，現(xiàn)在有能做23000bp這么長的PCR？似乎我印象中PCR要這么長的長度本身就很難能全長擴(kuò)增吧。 那么如果我的理解沒錯的話，樓主是不是直接從土壤的細(xì)菌里頭直接提取DNA。（呵呵，我也忘了細(xì)菌DNA大概多長），跑了一次電泳，然后把目的片斷割下來，再純化，再跑電泳，發(fā)現(xiàn)純化之后的片斷比目的片斷小了。 檢測回收率，你可以在DNA溶解液過柱之后，柱子洗脫之前在柱子上加試劑盒溶解液，吹打幾次吸取一些溶液A，同時吸取一些離心下來的溶液B，再將過柱后的洗脫液C，以及未過柱前的溶液D（如果濃度太低，可相應(yīng)濃縮）肆個溶液再上一次凝膠電泳，一切都將看得明明白白，究竟你在過柱的這個過程中，DNA到底留在了什么地方。 我相信有這個電泳圖的話，應(yīng)該可以很容易理解問題所在了。當(dāng)然問題有可能象1樓所說的那樣，天根的產(chǎn)品不過關(guān)（或者是你自己沒有選對），那就換柱子！
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