以下是天津本生雞白細(xì)胞介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒的說(shuō)明書(shū)核心內(nèi)容整理:
BS-4403 雞白細(xì)胞介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒
檢測(cè)原理?
采用雙抗體夾心法(ELISA):
預(yù)包被IL-1β抗體的微孔板捕獲樣本中的目標(biāo)蛋白。
加入HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體形成復(fù)合物,TMB顯色(藍(lán)色→黃色)。
通過(guò)450nm波長(zhǎng)測(cè)定OD值,計(jì)算濃度。
樣本處理要求?
類(lèi)型?:血清、血漿、細(xì)胞上清液、組織勻漿。
處理方法?:
血清/血漿:3000轉(zhuǎn)離心10-30分鐘分離。
組織勻漿:生理鹽水搗碎后離心取上清。
保存?:分裝后-20℃凍存,避免反復(fù)凍融。
試劑盒組成?
組分 規(guī)格/數(shù)量 備注
預(yù)包被微孔板 12孔×8條 可拆卸
標(biāo)準(zhǔn)品 0.5ml(濃度梯度) 需稀釋
HRP標(biāo)記抗體 6ml 避光保存
TMB顯色液 A液+B液各6ml 現(xiàn)配現(xiàn)用
終止液 6ml 酸性溶液
操作步驟?
平衡試劑?:室溫放置20分鐘。
加樣?:依次加入標(biāo)準(zhǔn)品、樣本(需稀釋5倍)。
孵育?:37℃溫育60分鐘。
洗滌?:手工或自動(dòng)洗板5次。
顯色?:加入TMB避光反應(yīng)15分鐘。
終止?:加入終止液后立即檢測(cè)OD值。
注意事項(xiàng)?
靈敏度?:不同品牌差異較大(3-1000 pg/mL)。
交叉反應(yīng)?:與雞IL-1β類(lèi)似物無(wú)顯著交叉。
保存條件?:未開(kāi)封試劑盒2-8℃保存,開(kāi)封后板條需密封防潮。
注:以上資料僅供參考,如需完整說(shuō)明書(shū),可參考具體試劑盒附帶的文檔。
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