雞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書
BS-4275雞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
本試劑盒用于體外定量檢測(cè)雞血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)的含量,適用于科研實(shí)驗(yàn)用途。
二、實(shí)驗(yàn)原理
采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。預(yù)先包被雞TGF-β1捕獲抗體的微孔板中,依次加入樣本、標(biāo)準(zhǔn)品及HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。經(jīng)徹底洗滌后,加入TMB顯色底物,在HRP酶催化下顯藍(lán)色,酸性終止后變黃色。顏色深淺與樣本中TGF-β1濃度呈正相關(guān),通過酶標(biāo)儀測(cè)定450nm波長(zhǎng)吸光度(OD值),計(jì)算樣本濃度^^1^^。
三、試劑盒組成
核心組分:預(yù)包被微孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體、顯色底物A/B液、終止液、濃縮洗滌液。
輔助材料:樣本稀釋液、封板膜、說明書。
四、樣本處理
血清/血漿:室溫靜置10-20分鐘,2000-3000轉(zhuǎn)/分離心20分鐘,收集上清。避免反復(fù)凍融,長(zhǎng)期保存需分裝于-20℃或-80℃。
組織勻漿:用PBS勻漿后離心取上清,細(xì)胞培養(yǎng)上清需1000×g離心20分鐘去除雜質(zhì)。
活化處理:生物樣本中TGF-β1常以無活性形式存在,檢測(cè)前需用活化試劑1和2按比例處理室溫孵育。
五、實(shí)驗(yàn)步驟
準(zhǔn)備階段:提前20分鐘將試劑盒平衡至室溫,濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:24)。
加樣:每孔加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,37℃溫育1小時(shí)。
洗滌:用洗滌液洗滌4-5次,拍干殘留液體。
顯色:加入HRP標(biāo)記抗體及TMB底物,37℃避光顯色15-20分鐘。
終止與測(cè)定:加入終止液終止反應(yīng),450nm波長(zhǎng)測(cè)定OD值。
六、注意事項(xiàng)
樣本保存:短期檢測(cè)可4℃保存,長(zhǎng)期需分裝凍存于-20℃或-80℃,避免反復(fù)凍融。
實(shí)驗(yàn)環(huán)境:避免強(qiáng)光或劇烈震動(dòng),防止交叉污染。
安全操作:終止液含酸性物質(zhì),需佩戴防護(hù)裝備。
七、結(jié)果計(jì)算
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度與OD值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,通過樣本OD值計(jì)算TGF-β1濃度。若樣本濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品上限,需稀釋后復(fù)測(cè)。
注:本試劑盒僅供科研使用,不用于臨床診斷。具體操作請(qǐng)以實(shí)際試劑盒說明書為準(zhǔn)。
雞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo),本生,您信任的合作伙伴!本生試劑盒
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