近年來，QuanQiu新發(fā)突發(fā)傳染病疫情不斷發(fā)生，尤其新冠肺炎，其傳播能力強、傳播速度快、感染范圍廣、感染危害度大，成為全Qiu公共衛(wèi)生中的Zhong點領(lǐng)域，在抗擊新冠疫情中大規(guī)模核酸檢測確定感染人群是重中之重，國家針對新冠肺炎在各市縣醫(yī)院和防疫站大力建設(shè)臨床PCR實驗室。接下來就為大家介紹何為臨床PCR實驗室。

       臨床基因擴增檢驗實驗室是指通過擴增檢測特定的DNA或RNA，進行疾病診斷、Zhi療檢測和預(yù)后判定等的實驗室。臨床PCR實驗室需通過衛(wèi)生部臨床檢驗中心或指定機構(gòu)組織的實驗室室間質(zhì)量評測才能運行。臨實驗人員需經(jīng)過省級衛(wèi)生行政部門指定機構(gòu)技術(shù)培訓(xùn)合格后，方可從事臨床基因擴增檢驗工作。

PCR實驗室設(shè)置

       PCR實驗室設(shè)置原則上分為四個區(qū)：試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)。如使用全自動擴增分析儀，后兩區(qū)可合并。如使用核酸提取、擴增和產(chǎn)物分析一體化的全自動分析系統(tǒng)，后三區(qū)可合并。

       隨著實時熒光定量PCR儀的普及現(xiàn)大多數(shù)PCR實驗室分為三個區(qū)：試劑準(zhǔn)備區(qū)（一區(qū)）、標(biāo)本制備區(qū)（二區(qū)）、擴增區(qū)（三區(qū)）。

       臨床PCR實驗室的設(shè)計因地制宜但需要做到各區(qū)有獨立的緩沖區(qū)，各區(qū)都有水池，各區(qū)有獨立的通風(fēng)系統(tǒng)，標(biāo)本制備區(qū)要有沖眼器和生物安全柜，各區(qū)應(yīng)配置固定和移動紫外線燈，人員分配上一區(qū)（1名），二區(qū)（2名），三區(qū)（1名）實驗人員。

圖1 //  圖例

實驗室各區(qū)功能及主要設(shè)備

一區(qū)：試劑準(zhǔn)備區(qū)

       主要進行試劑的制備，分裝和反應(yīng)混合液的制備。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的試劑。該區(qū)主要設(shè)備有超凈工作臺，天平，冰箱，離心機，移液器，震蕩器等。對于氣流壓力的控制，該區(qū)并沒有嚴格的要求，一般為+10Pa。

二區(qū)：樣品制備區(qū)

       主要進行樣品的保存，核酸提取，貯存及其加入至擴增反應(yīng)試劑。本區(qū)主要設(shè)備有核酸提取儀，冰箱，生物安全柜，離心機，移液器，震蕩器等。本區(qū)的壓力相對于三區(qū)為正壓，以避免從三區(qū)氣溶膠進入本區(qū)造成污染，一般為+10Pa。

三區(qū)：擴增區(qū)

       主要進行DNA擴增。本區(qū)主要設(shè)備為電腦和實時熒光定量PCR儀。本區(qū)的壓力相對于臨近區(qū)域為負壓來防止氣溶膠從本區(qū)漏出，一般為-25Pa。

實驗室通風(fēng)系統(tǒng)及壓力控制

       為防止擴增產(chǎn)物（氣溶膠）順空氣氣流從三區(qū)進入擴增前的區(qū)域，由走廊進入各工作區(qū)應(yīng)嚴格按照單一方向進行，不得逆向行進。各區(qū)試劑樣本傳遞也需按照一區(qū)-二區(qū)-三區(qū)方向由傳遞窗傳遞不得逆向流動。

       各區(qū)需設(shè)置緩沖間，通過安裝排風(fēng)扇、負壓排風(fēng)等裝置使緩沖間對走廊和工作區(qū)形成高壓，保證緩沖間空氣流向向外，由緩沖間進入工作區(qū)時，兩個門不能同時打開。

       為避免各個實驗區(qū)域交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式，嚴格控制送風(fēng)和排風(fēng)的比例以保證各個實驗區(qū)的壓力要求。

奧盛PCR實驗室配套儀器

圖2 //一區(qū)：試劑準(zhǔn)備

圖3 //二區(qū)：樣品制備

圖4//其他