循環(huán)腫瘤細胞（CTCs）精準篩查對癌癥早期診斷、精準治療、預后評估等意義重大，但每10 mL血液里可能只有幾個到幾十個CTCs，傳統(tǒng)分選方法準確率低、成本高、效率慢，操作復雜，讓許多研究者望而卻步。

的EnrichArray細胞富集分選芯片與PRECI SCS-F熒光單細胞分選儀聯(lián)用，可快速富集全血中的CTCs，還能進行富集CTCs的原位抗體標記，將CTCs逐一精準分離。

應用優(yōu)勢：四大創(chuàng)新，重新定義CTCs分選

 全血直接富集：無需預處理，避免細胞丟失，一步到位！

? 原位標記：芯片上原位進行抗體及探針等標記，適用于各類CTCs。

? 非接觸式分選：激光與芯片介質(zhì)相互作用，細胞活性超過80%，數(shù)據(jù)更可靠！

? 精準分離：單細胞得率>95%，提高CTCs及其他稀有細胞的獲取效率。

從富集到單細胞分析的全流程

數(shù)據(jù)展示

1、CTCs的高效富集

在模擬試驗中，CTCs在PBS和全血中的捕獲效率分別能夠達到87.4%和88.3%，處理通量最高可達15.0mL/min。富集的 CTC細胞活性為81.3 ± 6.5%（圖1 b），富集后的CTC可進行原位培養(yǎng)，在PRECI SCS-F熒光單細胞分選儀上觀察CTC熒光如圖1 c 所示。

圖1：EnrichArray細胞富集分選芯片細胞活力檢測

2、CTC的單細胞精準分選

EnrichArray芯片富集后，微孔中包括CTCs及部分白細胞， 在芯片上原位使用特異性抗體對CTC進行多重特異性染色及鑒定分選（圖2 a-c）。采用PRECI SCS-F單細胞分選儀能夠穩(wěn)定實現(xiàn)目標CTCs的逐一精準分離，單細胞得率>95%。

圖2 采用PRECI SCS-F進行CTCs分選的流程及結(jié)果展示

圖a為明場和熒光下微孔中CTC細胞的鑒定和定位；圖b為PRECI SCS-F熒光單細胞分選儀的脈沖激光將細胞推出微孔的過程；圖c為細胞接收器中成功接收單個CTC的示意圖與顯微圖像

3、分選獲取CTCs的下游研究

對分選得到的CTCs分別進行了單細胞培養(yǎng)與基于Smart-seq2的單細胞全程轉(zhuǎn)錄組測序（scRNA-Seq）（圖3a）。結(jié)果表明，回收的CTCs保持了高活性（圖3 b）和轉(zhuǎn)錄組完整性?；厥諉蝹€CTC的cDNA產(chǎn)量超過4.5ng（圖3c），scRNA-Seq的Q30得分均高于95.92%，表明了分選回收細胞的可靠性。

圖3PRECI SCS-F分選后的單細胞可實現(xiàn)培養(yǎng)與單細胞轉(zhuǎn)錄組測序（scRNA-Seq）

圖a為回收單個CTC后進行單細胞培養(yǎng)和scRNA-Seq的總體工作流程；圖b為分離培養(yǎng)第0天、第3天和第5天的腫瘤細胞的培養(yǎng)增殖結(jié)果；圖c為分選單個CTC逆轉(zhuǎn)錄的cDNA含量；圖d為PRECI SCS-F單細胞分選儀LAMFX, X = 1,2,3,4,5和顯微操作系統(tǒng)（MMX, X = 1,2,3,4,5）處理的單個CTC樣品間的scRNA-Seq相關(guān)性熱圖；圖e為圖d得到的差異基因聚類表達熱圖

結(jié)論

該研究中PRECI SCS 熒光單細胞分選儀結(jié)合EnrichArray細胞富集分選芯片，實現(xiàn)了全血樣品中CTCs的快速高效富集與單細胞無損分選，在細胞活性保持、分選通量及下游分析兼容性等方面均顯著優(yōu)于傳統(tǒng)技術(shù)，為CTCs及其他稀有細胞的深入研究提供了新策略，為腫瘤異質(zhì)性研究、藥物篩選及個體化治療提供了可靠平臺。

注：僅供科學研究參考，不可用于醫(yī)學診斷