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SCIEX微流高分辨質(zhì)譜系統(tǒng)助力乳制品蛋白質(zhì)組學研究

來源:SCIEX(愛博才思) 更新時間:2026-01-08 14:30:25 閱讀量:93
導讀:SCIEX微流高分辨質(zhì)譜系統(tǒng)助力乳制品蛋白質(zhì)組學研究

牦牛是高海拔地區(qū)如青藏高原的主要畜牧物種之一,為當?shù)啬撩裉峁┍匦璧纳钯Y源,包括肉類、乳制品和皮革等,在高原畜牧業(yè)中占據(jù)重要地位。牦牛奶作為一種獨特的乳制品資源,其營養(yǎng)價值高于牛奶、山羊奶及其他乳制品。牦牛奶中的主要蛋白質(zhì)成分包括酪蛋白、乳清蛋白(α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、血清白蛋白和免疫球蛋白)以及乳脂球膜(MFGM)蛋白。


研究表明,牦牛奶具有多種功能特性,包括抗炎、抗氧化、抗菌、抗癌、緩解疲勞、耐缺氧、降血壓和降膽固醇等作用。然而由于牦牛的生長環(huán)境、氣候條件和飼養(yǎng)方式的限制,牦牛奶的產(chǎn)量相對較低。犏牛作為黃牛與牦牛的雜交后代,產(chǎn)奶量比牦牛顯著提高,然而目前對于牦牛奶和犏牛奶之間蛋白質(zhì)組成差異,尤其是功能性蛋白質(zhì)的研究仍然有限。


中國農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標準與檢測技術(shù)研究所陳愛亮團隊在《Food Chemistry》上發(fā)表文章,基于SCIEX M5微升液相和TripleTOF? 6600高分辨質(zhì)譜系統(tǒng),利用蛋白質(zhì)組學方法,比較了兩種奶中乳清蛋白和乳脂球膜(MFGM)蛋白的差異。結(jié)果顯示,犏牛奶中大多數(shù)上調(diào)的差異表達蛋白(DEPs)更多地參與促進鈣吸收、免疫調(diào)節(jié)和腸道健康,這些都是嬰兒生長發(fā)育所必需的營養(yǎng)物質(zhì)。值得注意的是,對于重要的功能性蛋白,如乳鐵蛋白和骨橋蛋白,犏牛奶中的含量分別比牦牛奶高8.03倍和3.44倍。該研究為犏牛奶的潛在優(yōu)勢提供了新的見解,并提供了科學依據(jù)。


牦牛奶和犏牛奶蛋白鑒定結(jié)果


經(jīng)過高pH反相分級后,使用DDA采集模式,牦牛奶(yak)和犏牛奶(cattle-yak)一共鑒定到865種蛋白質(zhì)和9011條肽段。使用SWATH采集方法分析了牦牛奶和犏牛奶的蛋白質(zhì)組成,分別在牦牛奶和犏牛奶中鑒定出423種和433種蛋白質(zhì)。進一步分析顯示,牦牛奶和犏牛奶分別鑒定出196種和194種乳清蛋白,以及227種和239種MFGM蛋白。在兩組中,有184種乳清蛋白和200種MFGM蛋白是共有的,表明牦牛奶與犏牛奶在蛋白質(zhì)組成種類上沒有顯著差異。


牦牛奶和犏牛奶蛋白鑒定結(jié)果韋恩圖


盡管兩種奶中蛋白質(zhì)的種類相似,主成分分析(PCA)仍能區(qū)分這兩種奶。兩組蛋白質(zhì)的定量結(jié)果主成分分析如圖所示。同一組內(nèi)的樣品聚集很好,而組間的分離程度更高,這表明兩種奶中共有蛋白質(zhì)的含量存在顯著差異。


牦牛奶和犏牛奶蛋白質(zhì)主成分分析圖


牦牛奶和犏牛奶差異蛋白質(zhì)分析


以犏牛奶和牦牛奶比較進行蛋白質(zhì)相對定量分析,t檢驗后選擇p<0.05且差異倍數(shù)(FC)>1.2或<0.83的蛋白質(zhì)作為顯著差異表達蛋白(DEPs)。在乳清蛋白中,鑒定出34種差異蛋白,其中14種在犏牛奶中顯著上調(diào),20種下調(diào)。在乳脂球膜(MFGM)蛋白中,發(fā)現(xiàn)44種差異蛋白,其中23種在犏牛奶中上調(diào),21種下調(diào),火山圖和熱圖如圖所示。


牦牛奶和犏牛奶差異蛋白分析的火山圖和熱圖


關(guān)鍵蛋白的靶向驗證


乳鐵蛋白和骨橋蛋白是牛奶中研究最廣泛的生物活性蛋白,兩種蛋白質(zhì)都已被開發(fā)為食品添加劑,并廣泛用于嬰兒配方奶粉。因此,本研究特別關(guān)注牦牛奶和犏牛奶中這兩種蛋白質(zhì)的差異,SWATH定量結(jié)果發(fā)現(xiàn)犏牛奶中的乳轉(zhuǎn)鐵蛋白和骨橋蛋白含量分別是牦牛奶的8.03倍和3.44倍。通過MRMHR方法進行靶向驗證,顯示的趨勢與SWATH方法一致,確認了分析數(shù)據(jù)的可靠性和準確性。


SWATH和MRMHR定量結(jié)果比較


總結(jié)


本文介紹了基于SCIEX M5微升液相和TripleTOF? 6600高分辨質(zhì)譜系統(tǒng)進行牦牛奶和犏牛奶蛋白質(zhì)組學的研究,使用SWATH技術(shù)比較了兩種奶的乳清蛋白和乳脂球膜蛋白的差異表達,并用MRMHR技術(shù)對目標蛋白進行了靶向驗證,顯示的趨勢與SWATH技術(shù)一致。該研究結(jié)果為進一步探索犏牛的育種及犏牛奶中的功能性蛋白提供了基礎(chǔ),有助于高原畜牧業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。


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參考文獻:

Chen X, Zhang J, Liu C, Sun X, Pang X, Qu S, Wu K, Lv X, Chen A. Proteomics-based study for evaluation crossbreeding advantages of cattle-yak milk. Food Chem. 2025 Dec 1;494:146188.


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