有一些蛋白水解酶類的HCP會引起重組蛋白的降解和聚集，從而影響產(chǎn)品質(zhì)量^[1]。

另有一些HCP，如溶酶體磷脂酶A和磷脂酶B，會促進(jìn)聚山梨酯20（PS20）和聚山梨酯80（PS80）的降解^[2]。

此外，在親和層析中，HCP會導(dǎo)致淋洗過程中產(chǎn)生不同程度的渾濁，可能影響層析填料的清洗和壽命^[3]。

纖維素為濾膜提供了良好的多孔和滲水性基架結(jié)構(gòu)；

助濾劑與纖維基架結(jié)合，主要通過吸附特性輔助機(jī)械攔截機(jī)制對污染物起到攔截作用；

合成樹脂可以有效提高深層膜層的濕強(qiáng)度，且常含有季胺伯胺官能團(tuán)，電位表現(xiàn)為正電性，可以通過靜電吸附去除異種電荷的相關(guān)雜質(zhì)。

深層膜較厚，通常為1.3-5 mm，內(nèi)部流道迂回曲折，其截留作用可通過直接攔截和慣性撞擊的機(jī)理高效去除顆粒物，達(dá)到澄清效果。

在HCP去除中，深層過濾也展現(xiàn)出良好的效果。去除原理通常被認(rèn)為是通過靜電吸附（陰陽離子交換）、疏水作用、氫鍵和分子間相互作用力吸附料液中的HCP分子。

深層濾器去除可溶性雜質(zhì)HCP的主要吸附作用機(jī)理，如靜電吸附和疏水作用吸附，都會受到料液中pH、離子類型和濃度的影響。例如，Negin等^[4]研究發(fā)現(xiàn)，在30 mM和150 mM PBS兩種buffer體系中，深層濾器對模型蛋白的吸附在更低的PBS濃度下更高。

此外，不同pH值下，深層濾器、目的蛋白、HCP所帶電荷也會不同，從而影響深層過濾的蛋白回收率和HCP去除效果。

對于不同的料液及HCP去除要求，除了測試不同材質(zhì)的深層濾器，還可以通過調(diào)整待過濾料液的pH和離子強(qiáng)度，以達(dá)到更好的回收率和HCP去除能力。

載量、濾速及連接方式都會對深層工藝中HCP的去除效率產(chǎn)生影響。隨著載量的升高，深層濾器對HCP的吸附會逐漸趨于飽和，因此在工藝開發(fā)過程中，應(yīng)注意不同載量下HCP的去除趨勢，根據(jù)需求選擇合適的載量。

此外，深層濾器串聯(lián)后去除HCP的效果大于并聯(lián)的去除效果，這可能是由于料液在濾器中間和邊緣濾速不同，串聯(lián)使得更多料液有效接觸過濾介質(zhì)，從而產(chǎn)生了1+1>2的去除效果^[3]。

Fig 1：抗體低pH后HCP去除效果

Fig 2：重組疫苗（CHO細(xì)胞表達(dá)）親和層析后HCP去除效果