在自發(fā)或人工誘導(dǎo)下,兩個細(xì)胞或原生質(zhì)體融合,使得一個雜種細(xì)胞形成,即是細(xì)胞融合(cell fusion)。細(xì)胞融合使得異核體(heterokaryon)形成、通過細(xì)胞有絲分裂異核體進(jìn)行核融合、Z終使得單核的雜種細(xì)胞形成為細(xì)胞融合的基本過程。作為一種實驗方法,在單克隆抗體的制備,膜蛋白的研究方面,細(xì)胞融合應(yīng)用非常廣泛。
融合細(xì)胞的選擇
融合產(chǎn)物不同,其在培養(yǎng)條件下會存在差異。同源融合的原生質(zhì)體以及未融合的原生質(zhì)體對培養(yǎng)條件可以比較快的適應(yīng),而生成發(fā)育。由于異源融合體一般發(fā)育緩慢,優(yōu)勢生長的親本原生質(zhì)體融合細(xì)胞會對其有所YZ,發(fā)育成雜種的概率偏低。所以需要通過培養(yǎng)和篩選,將需要的雜種細(xì)胞分離出來,將不需要的細(xì)胞除去,從而使融合細(xì)胞的選擇問題得以解決。

尚無篩選雜種細(xì)胞的特定規(guī)律可循,具體的篩選方案和選擇體系需要針對不同對象來設(shè)計和制定。只允許雜種細(xì)胞生長或者對于雜種細(xì)胞優(yōu)先選擇,來對親本細(xì)胞進(jìn)行淘汰。
雜種細(xì)胞通過雙親細(xì)胞形態(tài)和色澤上的不同來進(jìn)行識別為Z簡單的選擇方法,然而大多數(shù)的選擇是以細(xì)胞生理遺傳上的特性為依據(jù)。雜種細(xì)胞篩選較為常用的方法如下:
1、生長特性篩選
雜種細(xì)胞通過原生質(zhì)體對培養(yǎng)基成分要求與反應(yīng)的不同來進(jìn)行選擇。
2、物理特性篩選
雜種細(xì)胞通過親本的原生質(zhì)體大小、顏色、漂浮密度及電泳遷移率形成的愈傷組織的不同來選擇。
3、遺傳互補(bǔ)篩選
一親本的缺陷利用另外一親本貢獻(xiàn)一個功能正常等位基因來進(jìn)行糾正,從而通過雜種細(xì)胞有正常功能表現(xiàn)的原理來對雜種細(xì)胞進(jìn)行選擇。
4、抗體互補(bǔ)篩選
雜種細(xì)胞通過親本原生質(zhì)體對抗生素、除草劑及其他毒性物質(zhì)抗性差異來選擇,這種方法也能夠用于抗藥性有差異或抗性突變體。
5、其他方法
單個異核體也可以采用顯微操作技術(shù)分離出來進(jìn)行培養(yǎng)。由于若為融合細(xì)胞,那么與雙親本不同的熒光標(biāo)記就必須具備,因此,采用無毒的熒光素標(biāo)記雙親原生質(zhì)體這一普遍適用的方法被科學(xué)家發(fā)明出來。融合后融合細(xì)胞利用一種電子熒光激活選擇器來自動分類和選擇。
以上方法中利用選擇性培養(yǎng)基是一個很常用的雜種細(xì)胞選擇方法。
全部評論(0條)
①本文由儀器網(wǎng)入駐的作者或注冊的會員撰寫并發(fā)布,觀點僅代表作者本人,不代表儀器網(wǎng)立場。若內(nèi)容侵犯到您的合法權(quán)益,請及時告訴,我們立即通知作者,并馬上刪除。
②凡本網(wǎng)注明"來源:儀器網(wǎng)"的所有作品,版權(quán)均屬于儀器網(wǎng),轉(zhuǎn)載時須經(jīng)本網(wǎng)同意,并請注明儀器網(wǎng)(m.sdczts.cn)。
③本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明來源的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點或證實其內(nèi)容的真實性,不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
④若本站內(nèi)容侵犯到您的合法權(quán)益,請及時告訴,我們馬上修改或刪除。郵箱:hezou_yiqi
等離子切割機(jī)新手入門指南
參與評論
登錄后參與評論