摘要:本文建立了芪參益氣滴丸指紋圖譜的UPLC 分析方法。參照中國(guó)藥典色譜條件,采用色譜柱 Shim-pack Velox SP-C18,對(duì)參照物溶液、供試品溶液進(jìn)行分析,結(jié)果顯示,丹酚酸T 對(duì)照品的2 個(gè)色譜峰分離度大于 1.5,供試品指紋圖譜中呈現(xiàn)11 個(gè)與藥典對(duì)照指紋圖譜相對(duì)應(yīng)的色譜峰,其中峰1、峰 4~5 應(yīng)分別與相應(yīng)的參照物峰的保留時(shí)間相對(duì)應(yīng),丹酚酸T 的峰面積之和與丹參素的峰面積之比高于0.18,且峰型良好,滿足中國(guó)藥典要求。此方法可為芪參益氣滴丸指紋圖譜的分析提供參考。
PART 01
1.1 實(shí)驗(yàn)儀器及耗材
Shimadzu LC-40 BX3 超高效液相色譜儀;
色譜柱:Shim-pack Velox SP-C18(1.8 μm,2.1×100 mm;P/N:R227-32001-03) ;
純水機(jī):PR-FP-0120α-MT1(+ 60L 水箱 + 取水器)
SHIMSEN Disc HPPTFE 針式過(guò)濾器(P/N:380-00341);
LC-MS 認(rèn)證樣品瓶 LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
1.2 參照物溶液的制備
取丹參素鈉對(duì)照品及丹酚酸 T 對(duì)照品適量,精密稱定,加75%甲醇制成每 1 mL 含丹參素鈉0.16 mg(相當(dāng)于每1 mL 含丹參素 0.144 mg)、丹酚酸T 46 μg 的混合溶液,即得。
1.3 供試品溶液的制備
取裝量差異項(xiàng)下本品內(nèi)容物,混勻,取約0.3g,薄膜衣滴丸取約 0.31g,精密稱定,置 10ml 量瓶中,加水適量,超聲處理(功率 120W,頻率40kHz)使溶解,放冷,用水稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。
1.4 分析條件
色譜柱:Shim-pack Velox SP-C18(1.8 μm,2.1×100 mm;P/N:R227-32001-03)
柱溫:30℃
檢測(cè)波長(zhǎng):280/254 nm
流速:0.2 mL/min
進(jìn)樣量:2 μL
流動(dòng)相:A:0.1%甲酸溶液
B:乙腈
梯度程序如下:
PART 02
按照上述色譜條件(1.4)進(jìn)行采集,參照物溶液和供試品溶液色譜圖如下:
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