▲ 閃光型(flash type)操作流程，較為繁瑣

▲ 輝光型(glow type)操作流程，一步完成檢測

▲ Yeasen檢測系統(tǒng)熒光強(qiáng)度和穩(wěn)定性與P品牌相當(dāng)。
 

▲ Yeasen檢測系統(tǒng)和螢光素酶相互作用，螢光素發(fā)光淬滅效果與P品牌相當(dāng)

▲ Yeasen檢測系統(tǒng)在常用培養(yǎng)基中正常發(fā)光，發(fā)光效果差異小于P品牌

Q1：雙螢光素酶報(bào)告基因最適反應(yīng)溫度？

A：室溫條件下（20-22℃）。反應(yīng)組分如細(xì)胞裂解產(chǎn)物，底物工作液等都需要調(diào)整到室溫，因?yàn)閮煞N螢光素酶的反應(yīng)速率是受溫度影響，為了保證實(shí)驗(yàn)一致性，推薦反應(yīng)室溫調(diào)至室溫。

Q2：雙螢光素酶報(bào)告基因載體該如何選擇？

A：1）螢火蟲螢光素酶建議選取pGL-3或pGL-4或者自己構(gòu)建的載體。。

    2）海腎螢光素酶建議選取pRL-TK或pGL-4載體或者自己構(gòu)建相應(yīng)的載體。建議優(yōu)先選用中等強(qiáng)度的啟動(dòng)子（如TK），而不使用強(qiáng)啟動(dòng)子（如SV40、CMV），以免影響主報(bào)告基因的表達(dá)，或進(jìn)行實(shí)驗(yàn)摸索選擇合適的載體。

Q3：螢火蟲螢光素酶讀值和海腎螢光素酶讀值的比例多少時(shí)比較合適？

A：推薦對(duì)照組螢火蟲和海腎螢光素酶的讀值接近，或者海腎螢光素酶比螢火蟲螢光素酶的讀值略高。實(shí)際實(shí)驗(yàn)過程中，由于螢火蟲螢光素酶質(zhì)粒和海腎螢光素酶的質(zhì)粒抽提的質(zhì)量不一致，待檢測目的調(diào)控元件的調(diào)控能力的不同等原因，我們推薦預(yù)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化螢火蟲螢光素酶質(zhì)粒和海腎螢光素酶質(zhì)粒的共轉(zhuǎn)染量。