在用?KTA進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)前，我們可以使用Pump wash命令進(jìn)行泵沖洗及手動泵頭排氣對設(shè)備進(jìn)行排氣操作。
使用Pump wash命令進(jìn)行泵沖洗
將本次實(shí)驗(yàn)所需要用到的所有的緩沖液管道(如A1、B1、S1等)全部插入到去離子水中：
在 System Control 窗口點(diǎn)擊 Manual >Execute Manual Instructions，在彈出的Manual instruction窗口中選擇Pumps and pressures> Pump wash，分別選擇需要泵洗Inlet，點(diǎn)擊Insert，將所有需要泵洗的入口的命令均Insert之后，點(diǎn)擊 Execute，系統(tǒng)泵即按照Inlet插入的順序自動開始沖洗。
沖洗流速分別為20 mL/min（25系統(tǒng)）、75 mL/min（150系統(tǒng)），沖洗1 min自動停止，入口維持所選沖洗的入口（如選擇A2入口進(jìn)行pump wash，命令結(jié)束后，Inlet A維持A2入口）。
圖1：UNICORN中Pump wash界面
泵頭手動排氣
在系統(tǒng)進(jìn)行Pump wash命令時需觀察入口管道中是否有氣泡、如有氣泡是否在向前移動，或觀察W1出口是否有液體流出。如發(fā)現(xiàn)管道中有較長段氣泡無法排除或W1出口無液體流出，需要在Pump wash結(jié)束后對相應(yīng)的Inlet進(jìn)行泵頭手動排氣。具體操作方法為：
將注射器連接到需排氣泵頭的蝴蝶閥上（下圖圈出）， 確保注射器與蝴蝶閥連接緊密。
逆時針旋轉(zhuǎn)四分之三圈打開清洗閥，將液體緩慢吸入注射器，直到液體到達(dá)泵頭。
圖2：?KTA系統(tǒng)手動排氣示意圖
注意：
1、如果對A泵進(jìn)行手動排氣，A泵的兩個泵頭需要依次進(jìn)行手動排氣過程，B泵及S泵同理。
2、A泵進(jìn)行手動排氣時，系統(tǒng)默認(rèn)走Inlet A1,如需對A2進(jìn)行手動排氣，需要點(diǎn)擊 Manual > Execute Manual Instructions > Flow Path > Inlet A將入口改為A2。B泵及S泵同理。
Pump wash和System wash的區(qū)別
細(xì)心的你可能會發(fā)現(xiàn)，在手動命令中，除了Pump wash，還有一個跟它很相似的命令System wash。同樣都是wash，它們有什么區(qū)別呢？我們要如何選擇呢？
執(zhí)行Pump wash命令時系統(tǒng)流路示意圖如下圖。此時廢液從進(jìn)樣閥的W1出口排出。且在執(zhí)行該命令時需手動選擇某個緩沖液入口管進(jìn)行A或B泵的Pump wash操作，A、B泵不能同時開啟。
圖3：系統(tǒng)流路示意圖（Pump wash-A1）
執(zhí)行System wash命令時有兩個選項(xiàng)（如下圖）。如果此時系統(tǒng)正在運(yùn)行中，執(zhí)行該命令后會繼續(xù)使用當(dāng)前緩沖液比例進(jìn)行系統(tǒng)清洗（即A、B泵可以同時開啟）；如果系統(tǒng)沒有運(yùn)行，默認(rèn)使用A1入口進(jìn)行系統(tǒng)清洗。
圖4：手動命令設(shè)置（System wash）
選擇Injection valve選項(xiàng)時與Pump wash命令相同，選擇Oulet valve選項(xiàng)則如下圖所示。此時廢液會從出口閥的廢液出口排出。（?KTA pure系統(tǒng)需要配置柱位閥才可以選擇從出口閥排出廢液）。沖洗流速分別為20 mL/min（25系統(tǒng)）、75 mL/min（150系統(tǒng)），默認(rèn)分別沖洗15 mL（25系統(tǒng)）、50 mL（150系統(tǒng)）自動停止，恢復(fù)之前設(shè)備運(yùn)行狀態(tài)。
圖5：系統(tǒng)流路示意圖（System wash-A1-Out）
Pump wash：清洗時，只能單獨(dú)一個泵工作，需要手動選擇清洗管路，廢液出口只能是進(jìn)樣閥的W1，清洗完畢后保持入口選項(xiàng)，例如A1運(yùn)行，插入入口A2的Pump wash命令，A2入口清洗后，將保留A2入口選擇，繼續(xù)運(yùn)行。
System wash： 清洗時，可以雙泵齊開，以當(dāng)前的AB比例進(jìn)行系統(tǒng)沖洗，廢液口可以選擇進(jìn)樣閥的W1或者出口閥的廢液口（?KTA pure系統(tǒng)需要配置柱位閥），清洗完成后，不改變AB入口及比例。
泵后腔中氣泡的處理
泵后腔中充滿20%的乙醇，一方面起到潤滑柱塞桿的作用，另一方面可以抑制泵后腔長菌。
泵后的橡膠軟管中有氣泡對實(shí)驗(yàn)沒有影響，但需要確保系統(tǒng)泵運(yùn)行起來之后，泵后潤洗系統(tǒng)能夠正常運(yùn)轉(zhuǎn)，若泵后潤洗系統(tǒng)無法正常運(yùn)轉(zhuǎn)，可用注射器對泵后潤洗系統(tǒng)進(jìn)行抽氣（如圖6）（注意此時請保證儲液管中有足夠的20%乙醇，抽氣時放在儲液管中的兩端只有一端可以抽的動）。
圖6：泵后腔軟管排氣
鑒定系統(tǒng)泵運(yùn)行方法：
系統(tǒng)泵運(yùn)行起來之后，?KTA pure上距離50 mL管最近的泵頭頂端回到50 mL管的軟管，?KTA avant中50 mL離心管中較短的軟管，可以滴液體。若相應(yīng)的軟管沒有在滴液體，說明泵后潤洗系統(tǒng)沒有正常運(yùn)轉(zhuǎn)。
關(guān)于?KTA 操作之設(shè)備排氣的相關(guān)內(nèi)容就是這些。如需查看更加詳細(xì)的排氣相關(guān)操作，可掃碼查看Cytiva中文官網(wǎng)常見問題版塊。
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