1.1、草莓果醬
稱取2g(精確至0.001g)試樣于50mL離心管中,加入鹽酸溶液(2.0mol/L)40mL,旋緊蓋子,搖勻,置于沸水浴中加熱30min,取出冷卻至室溫后,振蕩5min,超聲5min,5000r/min離心5min,上清液轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中,用水定容至刻度,從中準(zhǔn)確移取25mL樣液做為待凈化液。
1.2、原味蛋糕
稱取2g(精確至0.001g)試樣于50mL離心管中,加入鹽酸溶液(2.0mol/L)40mL,旋緊蓋子,搖勻,置于沸水浴中加熱30min,取出冷卻至室溫后,振蕩5min,超聲5min,10000r/min離心10min,上清液轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中,殘?jiān)尤臌}酸溶液(2.0mol/L),常溫下,重復(fù)提取1次,合并2次提取液,用水定容至刻度,從中準(zhǔn)確移取25mL樣液做為待凈化液。
活化:使用前依次用6mL甲醇、6mL水進(jìn)行活化,保持柱體濕潤(rùn);
上樣:將待凈化液過柱,棄去上樣液;
淋洗:依次用12mL水和6mL甲醇淋洗,棄去淋洗液,抽干小柱;
洗脫:用6mL磷酸甲醇溶液(2%)進(jìn)行洗脫,收集洗脫液,于40℃水浴下氮吹濃縮至近干,用磷酸水溶液(0.1%)定容至2mL,渦旋混勻1min,10000r/min離心5min,上清液過0.22μm親水PTFE濾膜,上機(jī)。
儀器:液相色譜儀,ThermoFisher U3000;
色譜柱:Commasil C18(4.6 х 150mm,5.0μm);
流動(dòng)相:A:磷酸水溶液(0.1%),B:磷酸乙腈溶液(0.1%),洗脫梯度程序見表1;
柱溫:40℃
流速:1.2mL/min;
檢測(cè)波長(zhǎng):494nm;
進(jìn)樣量:20μL。
表1 梯度洗脫程序
表2 加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果
圖1:添加水平為0.04g/kg的原味蛋糕中胭脂紅酸檢測(cè)液相色譜圖
2.2添加水平為0.02g/kg的草莓果醬中胭脂紅酸檢測(cè)液相色譜圖
5.1、洗脫液建議氮吹至近干,然后用磷酸水溶液(0.1%)定容至2mL。
5.2、尼龍濾膜會(huì)對(duì)胭脂蟲紅有吸附,建議過親水的PTFE濾膜。
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