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【顆粒攻略】利用Multisizer 4e庫爾特計(jì)數(shù)器檢測藻類培養(yǎng)中的細(xì)菌污染

來源：貝克曼庫爾特商貿(mào)（中國）有限公司 更新時間：2026-03-19 13:30:34 閱讀量：58
導(dǎo)讀：【顆粒攻略】利用Multisizer 4e庫爾特計(jì)數(shù)器檢測藻類培養(yǎng)中的細(xì)菌污染




前言



在金藻綱（Chrysophyceae）中，既有僅需光能作為能量來源、以二氧化碳作為無機(jī)碳源進(jìn)行生長的物種（自養(yǎng)生長），也有依賴有機(jī)碳源生長的物種（異養(yǎng)生長）。此外，已知部分物種能夠同時利用無機(jī)碳源和有機(jī)碳源，這種營養(yǎng)策略被稱為混合營養(yǎng)型。目前，人們對這些混合營養(yǎng)型生物會在何時利用何種代謝途徑知之甚少，而這一選擇可能取決于各自所處的環(huán)境條件。在利于不同營養(yǎng)行為的條件下開展生長實(shí)驗(yàn)，是理解混合營養(yǎng)型生長方式的必要基礎(chǔ)。在此類實(shí)驗(yàn)中，總細(xì)胞計(jì)數(shù)為快速測定生長情況提供了一個可行指標(biāo)。


在液體培養(yǎng)的生長實(shí)驗(yàn)中，盡管采用無菌操作，培養(yǎng)液仍存在較高的細(xì)菌污染風(fēng)險，因?yàn)樗璧呐囵B(yǎng)基中含有有機(jī)碳源。對于藻類而言，無菌培養(yǎng)物指的是無細(xì)菌的培養(yǎng)物；與之相對，含有細(xì)菌的培養(yǎng)物則被稱為帶菌培養(yǎng)物。檢測細(xì)菌污染的常用方法包括固體培養(yǎng)基涂布法、熒光顯微鏡檢測法或光學(xué)顯微鏡檢測法。這些方法不僅在建立過程中需要耗費(fèi)精力，還需在總細(xì)胞計(jì)數(shù)之外額外操作。借助貝克曼庫爾特生命科學(xué)公司生產(chǎn)的Multisizer 4e庫爾特計(jì)數(shù)器不僅能快速且可靠地測定總細(xì)胞數(shù)，還能根據(jù)顆粒的大小分布檢測出藻類培養(yǎng)物中是否存在細(xì)菌污染。


實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)條件


混合營養(yǎng)型金藻奧杜藻（Ochromonas danica）與馬爾漢棕鞭藻（Poterioochromonas malhamensis）于靜置錐形瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為20°C，光照強(qiáng)度為30 μmol光子·m?2·s?1。奧杜藻（O. danica）與馬爾漢棕鞭藻（P. malhamensis）的培養(yǎng)采用含可溶性有機(jī)碳源的培養(yǎng)基（見圖1）。


圖1：含有機(jī)碳源培養(yǎng)基中奧杜藻液體培養(yǎng)物的不同生長階段



總細(xì)胞數(shù)測定



所有待測細(xì)胞懸液均使用Multisizer庫爾特計(jì)數(shù)器測定培養(yǎng)物的總細(xì)胞數(shù)。實(shí)驗(yàn)選用100 μm小孔管，因預(yù)期藻類細(xì)胞大小在3-15 μm之間，對應(yīng)的細(xì)胞體積約為20-1000 μm3（見圖2）。取50-500 μl細(xì)胞懸液，加入12 ml Isoton II電解液中。每個樣品需對細(xì)胞懸液與Isoton II電解液的混合液取500 μl進(jìn)行三次重復(fù)測量，將三次測量的平均值保存為“

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貝克曼庫爾特公司對顆粒特性的研究始于上世紀(jì)的四十年代。從發(fā)明電子感應(yīng)區(qū)技術(shù)（庫爾特原理）用于分析顆粒大小和數(shù)目開始至今半個多世紀(jì)以來，貝克曼庫爾特公司一直專注于顆粒分析的研究開發(fā)與應(yīng)用。其顆粒特性分析儀器已經(jīng)成為當(dāng)今具競爭力和獨(dú)當(dāng)一面的表征顆粒特性的產(chǎn)品！無論是對粒度的分析，還是顆粒的計(jì)數(shù)；無論是在微米-亞微米范圍的測量，還是在納米尺度內(nèi)的測量；既擁有應(yīng)用庫爾特原理的產(chǎn)品，同時也擁有應(yīng)用激光衍射散射原理以及動態(tài)光散射原理的產(chǎn)品，使貝克曼庫爾特公司成為粒度分析同業(yè)的翹楚！貝克曼庫爾特的產(chǎn)品已成為“高準(zhǔn)確性”、“高分辨率”的代名詞，在用戶中享有盛譽(yù)。在粒度分析行業(yè)發(fā)展中一直發(fā)揮著深遠(yuǎn)

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