多肽純化策略的一般流程：

多肽化合物的純化是合成后至關(guān)重要的步驟，尤其對(duì)于藥物研發(fā)、診斷試劑和功能研究等領(lǐng)域。純化策略的選擇取決于多肽的長度、序列、疏水性、電荷、修飾（如磷酸化、糖基化、脂化等）、所需純度、最終用途以及合成規(guī)模。

1. 評(píng)估粗肽性質(zhì)： 長度、序列（預(yù)估疏水性、電荷）、是否有修飾、合成規(guī)模、所需純度。

2. 初步處理： 冷乙醚沉淀洗滌。

3. 脫鹽： SPE C18 或 GFC/SEC 脫鹽。

4. 精純：RP-HPLC 純化/制備

    首選 RP-HPLC： 適用于大多數(shù)情況，特別是存在疏水性相關(guān)雜質(zhì)（缺失序列肽）時(shí)。

    考慮 IEC： 當(dāng)電荷異質(zhì)性是主要問題（如磷酸化肽純度問題），或作為 RP-HPLC 的預(yù)處理/互補(bǔ)。

    考慮 HILIC： 當(dāng)目標(biāo)肽是強(qiáng)親水性且在 RP-HPLC 上無保留或保留很弱時(shí)。

    考慮 SEC： 主要目的是脫鹽、緩沖液置換或去除聚集體。

 5.   餾分分析與合并： 分析 HPLC/MS 確認(rèn)化合物純度以及結(jié)構(gòu)。

6.   最終脫鹽（如必要）與凍干： 得到終產(chǎn)品。

傳統(tǒng)的預(yù)處理色譜方法通常只對(duì)色譜柱進(jìn)行加熱，雖然這種方法可以降低系統(tǒng)背壓，但由于柱壁和冷的流動(dòng)相之間存在溫度差異，會(huì)導(dǎo)致顯著的峰展寬現(xiàn)象。這種溫度不匹配不僅影響了分離效率，還可能導(dǎo)致多肽的損失和純度下降。

圖1.Prodigy 2.0 多肽純化系統(tǒng)

儀器核心優(yōu)勢

1. 綠色環(huán)保：可使用甲醇/乙醇替代乙腈作為方法有機(jī)相，符合綠色化學(xué)理念的同時(shí)節(jié)約溶劑成本。

2. 高效分離：專為疏水性肽的分離而優(yōu)化，能夠提供卓越的分離效果，尤其適用于難以純化的肽段。

3. 高溫色譜技術(shù)：采用專利的集成加熱系統(tǒng)，同時(shí)對(duì)色譜柱和流動(dòng)相進(jìn)行加熱，克服了高溫操作時(shí)因溶劑粘度增加導(dǎo)致背壓問題的同時(shí)提高了儀器對(duì)多肽化合物的分離純化能力。

4. 用戶友好：配備直觀的觸摸屏軟件界面，操作簡便，易于上手。

5. 高通量與高載量：具備 5 位自動(dòng)進(jìn)樣器，單次進(jìn)樣量可達(dá) 500 mg，適合高通量和大規(guī)模純化需求。

圖2.Prodigy2.0高通量收集模塊

案例展示

以 1-42 β-淀粉樣肽（一種疏水性較強(qiáng)的肽）為例，Prodigy在對(duì)色譜柱加熱的同時(shí)，高度集成化加熱系統(tǒng)也對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行了加熱，使儀器對(duì)待測物的分離效果大幅度提升。突出了 Prodigy 2.0 在高溫條件下的優(yōu)越性能。

圖3. 柱溫對(duì)1-42 β-淀粉樣肽的純化效果影響

 Prodigy 2.0 適用于需要高純度肽的科研和工業(yè)生產(chǎn)領(lǐng)域，特別是那些對(duì)環(huán)境友好型工藝有需求的用戶，以及處理疏水性肽等難以純化的目標(biāo)分子的實(shí)驗(yàn)室。Prodigy 2.0 肽純化系統(tǒng)以其綠色環(huán)保、高效分離、高溫色譜技術(shù)和用戶友好性為主要賣點(diǎn)，為多肽的純化提供了一站式更高效、更環(huán)保的解決方案。