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細(xì)胞和基因治療領(lǐng)域應(yīng)用專欄(四):前沿創(chuàng)新應(yīng)用

來源:美谷分子儀器(上海)有限公司 更新時間:2024-12-19 17:07:49 閱讀量:270
導(dǎo)讀:細(xì)胞和基因治療領(lǐng)域應(yīng)用專欄(四):前沿創(chuàng)新應(yīng)用

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應(yīng)用實例四:前沿創(chuàng)新應(yīng)用

PDAC(胰腺導(dǎo)管腺癌)的腫瘤微環(huán)境具有免疫抑制性,導(dǎo)致目前批準(zhǔn)的免疫治療策略難以奏效,其中胰腺星狀細(xì)胞(PSCs)在分泌免疫活性分子和形成致密腫瘤組織方面發(fā)揮重要作用。體外系統(tǒng)如器官芯片可用于剖析特定細(xì)胞類型的貢獻(xiàn)及其相互作用,有助于研究疾病組織中免疫微環(huán)境的形成。文中使用了微流控平臺 OrganoPlate 作為實驗載體來建立 PDAC 類器官、PSCs、內(nèi)皮細(xì)胞和免疫細(xì)胞的微流控模型,并用于免疫遷移研究。



實驗結(jié)果證明了以下幾點:1.內(nèi)皮炎癥狀態(tài)對 PBMC 遷移的影響:TNFα 處理的 HUVEC 小管顯示出ICAM表達(dá)增加和通透性增強(qiáng),導(dǎo)致 PBMC 更好地附著和遷移,但 HUVEC 小管在 TNFα 存在時形態(tài)和屏障功能較差,因此后續(xù)遷移實驗在無 TNFα 的情況下進(jìn)行。2. PDAC 基質(zhì)屏障對免疫細(xì)胞分布和遷移的影響:PSCs 沿著 HUVEC 小管生長,形成額外的屏障,在 PSCs 和 PDAC 存在時,約 20 - 30% 的 PBMCs 被保留在基質(zhì)隔室中,PBMCs 在不同模型設(shè)置中的遷移情況不同,在包含 PDAC 和 PSCs 的模型中,到達(dá) PDAC 類器官樣細(xì)胞隔室的 PBMCs 數(shù)量最多。3. PBMC 亞型的偏好遷移:T 細(xì)胞向 PDAC 類器官樣細(xì)胞遷移的可能性最小,而單核細(xì)胞和 B 細(xì)胞遷移的可能性最大。結(jié)論是微流控平臺適用于構(gòu)建復(fù)雜模型,重現(xiàn) PDAC 中缺乏有效抗腫瘤免疫反應(yīng)的復(fù)雜細(xì)胞相互作用。


文章使用高內(nèi)涵系統(tǒng)成像和定量了細(xì)胞芯片中屏障完整性,通過熒光定量不同灌流通道間熒光強(qiáng)度來實現(xiàn):


文章還用 ImageXpress 高內(nèi)涵實現(xiàn)了內(nèi)皮層遷移實驗,來研究內(nèi)皮層對免疫細(xì)胞遷移的影響,并發(fā)現(xiàn) PBMC 亞型的遷移有偏好:T 細(xì)胞向 PDAC 類器官樣細(xì)胞遷移的可能性最小,而單核細(xì)胞和 B 細(xì)胞遷移的可能性最大:



個性化醫(yī)療(Personalized Medicine),又稱精準(zhǔn)醫(yī)療(Precision Medicine),可以選擇最適合患者的治療方案,避免不必要的治療和副作用,提高治療效果和患者的生活質(zhì)量,是未來腫瘤治療的有前景的發(fā)展方向。美國 Bin Xue 等人,在 2003 年發(fā)表的文章中介紹了一種基于水凝膠的新型 3D 體外腫瘤模型,該模型包含 30 種不同的患者衍生異種移植(PDX)模型,可用于腫瘤學(xué)和細(xì)胞治療相關(guān)的應(yīng)用,是一種潛在的個性化醫(yī)療和用藥的嘗試。腫瘤微環(huán)境(TME)復(fù)雜且動態(tài),對腫瘤治療響應(yīng)至關(guān)重要,研發(fā)代表 TME 生物學(xué)的 3D 體外模型對藥物研發(fā)至關(guān)重要。實驗設(shè)計如下:


研究者們先在裸鼠上擴(kuò)增病人腫瘤組織,再分離 PDX 腫瘤細(xì)胞進(jìn)行 3D 培養(yǎng)。隨后,對這些 3D 培養(yǎng)的模型實施免疫治療和藥物治療。處理后的模型利用 ImageXpress 高內(nèi)涵系統(tǒng)進(jìn)行成像和數(shù)據(jù)分析,通過評估腫瘤面積與大小的變化,以及使用 DRAQ7 和 Hoechst 染色來分析內(nèi)部細(xì)胞死亡情況,來體現(xiàn)藥物和細(xì)胞治療后的腫瘤狀態(tài):


研究展示了一種通過在平面 3D 水凝膠中共同培養(yǎng) PDX 腫瘤細(xì)胞、基質(zhì)成纖維細(xì)胞和免疫細(xì)胞(PBMCs)來重建腫瘤微環(huán)境的新方法,為藥物發(fā)現(xiàn)提供了有潛力的平臺。


應(yīng)用實例中涉及的系統(tǒng):

ImageXpress Micro Confocal 高內(nèi)涵成像系統(tǒng),可以全自動高分辨的成像,并分析亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的變化,獲得高質(zhì)量圖像的同時獲得科學(xué)準(zhǔn)確的定量數(shù)據(jù)。


結(jié) 語

Molecular Devices 作為一家有 40 年歷史的老牌生命科學(xué)儀器企業(yè),其產(chǎn)品線覆蓋細(xì)胞和基因治療(Cell and Gene Therapy,CGT)領(lǐng)域非常廣泛的應(yīng)用方向。從基因治療到細(xì)胞治療,甚至能覆蓋到相關(guān)的抗體生產(chǎn)和細(xì)胞系建立流程,由于我們的儀器覆蓋酶標(biāo)儀,高內(nèi)涵等科研領(lǐng)域常用儀器,所以以上列舉的應(yīng)用僅能體現(xiàn)我們眾多儀器設(shè)備應(yīng)用中的一小部分??梢酝ㄟ^訪問官方網(wǎng)站:www.moleculardevices.com.cn來獲取更多資源。



關(guān)于

Molecular Devices 始創(chuàng)于上世紀(jì) 80 年代美國硅谷,并在全球設(shè)有多個代表處和子公司。2005 年,Molecular Devices 在上海設(shè)立了中國代表處,2010 年加入全球科學(xué)與技術(shù)的創(chuàng)新者丹納赫集團(tuán),2011 年正式成立商務(wù)公司: (上海) 有限公司。Molecular Devices 以持續(xù)創(chuàng)新、快速高效、高性能的產(chǎn)品及完善的售后服務(wù)著稱業(yè)內(nèi),我們一直致力于為客戶提供在生命科學(xué)研究、制藥及生物治療開發(fā)等領(lǐng)域蛋白和細(xì)胞生物學(xué)的創(chuàng)新性生物分析解決方案。


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