近幾年外泌體研究火熱,文章數(shù)量一直居高不下,國(guó)內(nèi)的外泌體研究起步較晚,但從趨勢(shì)來(lái)看,國(guó)內(nèi)的外泌體研究正在逐漸加速發(fā)展。

越來(lái)越多的研究者將外泌體與轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)聯(lián)系起來(lái),特別是液體活檢方向,相信假以時(shí)日,外泌體必然為疾病的診斷與ZL帶來(lái)重大改革。
廣州云星科學(xué)儀器有限公司順應(yīng)科研需求,代理了IZON公司針對(duì)外泌體研究而開(kāi)發(fā)的利器 — 外泌體分離鑒定系統(tǒng),這將為外泌體的研究帶來(lái)全新的視角。

TRPS—可控電阻式脈沖傳感技術(shù)
Tunable Resistive Pulse Sensing(TRPS )是目前可用于納米粒子表征的功能Z強(qiáng)大的技術(shù),也是納米粒子研究、發(fā)展和質(zhì)控中重要的工具,該技術(shù)的應(yīng)用在納米醫(yī)學(xué)和細(xì)胞外囊泡研究的領(lǐng)域中尤為突出。IZON公司所開(kāi)發(fā)的外泌體分離鑒定系統(tǒng)正是基于該原理。

TRPS技術(shù)基于阻抗原理,與激光無(wú)關(guān)。當(dāng)充滿電解液的納米孔上下兩邊施加一定的電壓時(shí),納米孔內(nèi)會(huì)產(chǎn)生離子電流。當(dāng)顆粒通過(guò)納米孔會(huì)取代一定的電解液增加電阻,繼而產(chǎn)生電阻脈沖信號(hào),該脈沖信號(hào)大小與顆粒的體積成正比。
TRPS 技術(shù)應(yīng)用
鑒于分子尺寸已能得到測(cè)定且亞微尺寸受到人們較高的關(guān)注度,TRPS目前主要關(guān)注范圍是亞微米的樣品,檢測(cè)對(duì)象是尺寸范圍為40 nm -10 μm的顆粒。顆粒大小和濃度的檢測(cè)通過(guò)使用已知尺寸和濃度的校正顆粒來(lái)實(shí)現(xiàn)。當(dāng)顆粒流經(jīng)納米孔,會(huì)產(chǎn)生一個(gè)電阻脈沖信號(hào),通過(guò)該信號(hào)和校正顆粒的對(duì)比,來(lái)實(shí)現(xiàn)顆粒特征的逐個(gè)測(cè)定。
1. 顆粒大小和濃度的檢測(cè)通過(guò)使用已知尺寸和濃度的校正顆粒來(lái)實(shí)現(xiàn)。當(dāng)顆粒流經(jīng)納米孔,會(huì)產(chǎn)生一個(gè)電阻脈沖信號(hào),通過(guò)該信號(hào)和校正顆粒的對(duì)比,來(lái)實(shí)現(xiàn)顆粒特征的逐個(gè)測(cè)定。
2. 顆粒流速與顆粒濃度成正比,所以可以準(zhǔn)確測(cè)定不同尺寸的顆粒濃度。于此同時(shí),可以逐個(gè)測(cè)得每個(gè)顆粒的尺寸。TRPS的核心理念在于可以同時(shí)提供準(zhǔn)確的顆粒濃度和顆粒尺寸分布。

1 尺寸測(cè)定
TRPS中的離子電流電阻式脈沖單顆粒通過(guò)納米孔時(shí)的,可視離子電流“脈沖”單電流脈沖特寫(xiě)展示特征脈沖形狀TRPS現(xiàn)可用于測(cè)定納米顆粒和不同來(lái)源的EVs的真實(shí)尺寸分布。請(qǐng)注意下圖中的縱軸代表不同尺寸范圍內(nèi)顆粒的個(gè)數(shù)濃度,而不是比率。TRPS技術(shù)是目前**可以實(shí)現(xiàn)可靠顆粒測(cè)定的方法 。任何高可信度的顆粒研究項(xiàng)目或者跟顆粒相關(guān)的規(guī)定都需要數(shù)據(jù)具有高可靠性和易得性。TRPS能夠提供高質(zhì)量的測(cè)量數(shù)據(jù)(如尺寸分布及顆粒濃度)并有望推動(dòng)納米顆粒研究的快速發(fā)展。

2 濃度測(cè)定
TRPS技術(shù)能獲得非常準(zhǔn)確的濃度信息:顆粒速度與濃度成正比關(guān)系,與顆粒組成無(wú)關(guān),因此,一定尺寸范圍內(nèi)的顆粒濃度(Cmin-Cmax)可通過(guò)已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到。對(duì)于一張完整的數(shù)據(jù)圖,需要同時(shí)提供顆粒濃度和尺寸分布,然而許多應(yīng)用中,提供更簡(jiǎn)單的數(shù)據(jù)也同樣合適。TRPS利用簡(jiǎn)單且可驗(yàn)證的方法提供準(zhǔn)確、可靠的濃度。

3 尺寸電荷測(cè)定,包括Zeta電勢(shì)
TRPS技術(shù)通過(guò)分析單個(gè)顆粒在不同驅(qū)動(dòng)力下電阻式脈沖的持續(xù)時(shí)間,跟已知尺寸、表面電荷和個(gè)數(shù)濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品比較,來(lái)逐個(gè)測(cè)定顆粒的表面電荷。每個(gè)脈沖的寬度與顆粒穿過(guò)錐形孔有關(guān),通過(guò)分析脈沖寬度,可以獲得每個(gè)顆粒的速度。通過(guò)測(cè)定顆粒速度,可以獲得每個(gè)顆粒的電泳淌度,意味著可以同時(shí)獲得顆粒的尺寸和電荷信息。跟大多數(shù)電荷測(cè)定技術(shù)一樣,電泳淌度可以簡(jiǎn)單的轉(zhuǎn)換為Zeta電勢(shì)。

上圖展示了不同腦脊液樣品EVs的尺寸和帶電情況,表明TRPS技術(shù)提供的EVs詳細(xì)的電荷分析是一個(gè)十分實(shí)用的研究工具。來(lái)源于健康人樣品(綠點(diǎn))的顆粒平均Zeta電勢(shì)為-17 mV,而來(lái)自于疾病樣品(紫點(diǎn))則為-15 mV(顆粒均溶于PBS溶液)。(校正顆粒以橙色顯示)
外泌體分離鑒定系統(tǒng)
qNano

qNano 利用可控電阻式脈沖感應(yīng)(TRPS)原理進(jìn)行顆粒測(cè)定。功能強(qiáng)大且測(cè)量極ng準(zhǔn),取代了舊式激光測(cè)量方法。單一顆粒測(cè)量具有Z高精度和可重復(fù)性,可用于測(cè)量:
? 尺寸及真實(shí)粒徑分布
? 特定尺寸范圍內(nèi)的顆粒濃度
? 基于逐個(gè)顆粒的顆粒表面電荷測(cè)定

主要應(yīng)用:
細(xì)胞外囊泡:外泌體|微粒|全血細(xì)胞|血小板
納米醫(yī)學(xué):脂質(zhì)體|納米/微泡|高分子藥物輸送|能顆粒|免疫檢測(cè)功能顆粒
病毒和疫苗特性描述:病毒|疫苗|細(xì)菌
qEV 細(xì)胞外囊泡(外泌體)分離柱

多種規(guī)格分離柱可供選擇,實(shí)驗(yàn)體積從0.1ml到100ml,滿足不同實(shí)驗(yàn)需求,Z*程度降低實(shí)驗(yàn)操作成本。

AFC自動(dòng)收集器
取代手工收集濾液,用于自動(dòng)定量收集分離柱中流出的液滴,達(dá)到把不同活性組分裝到不同試管中去的目的。它將進(jìn)一步提高EV隔離的可重復(fù)性,并為您節(jié)省手動(dòng)觀察份數(shù)所需的時(shí)間。

很多研究人員懷疑自己養(yǎng)的細(xì)胞能不能做外泌體研究,其實(shí)不用擔(dān)心,外泌體已知是細(xì)胞之間傳遞信息的信使,細(xì)胞沒(méi)有獨(dú)立存在的,任何表型的改變(腫瘤侵襲,干細(xì)胞修復(fù),組織再生,胚胎發(fā)育等)都是經(jīng)過(guò)細(xì)胞傳遞,外泌體介導(dǎo)的。相信這套外泌體分離鑒定系統(tǒng)能夠給您的研究帶來(lái)意想不到的結(jié)果!

(來(lái)源:廣州云星科學(xué)儀器有限公司)
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qNano外泌體分離鑒定系統(tǒng)
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