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2025-05-22 10:33:22外泌體表征
外泌體表征是對外泌體物理、化學(xué)和生物特性的分析描述。外泌體是細胞釋放的微小膜囊泡，參與細胞間通信。表征方法包括分析大小、形狀、表面標(biāo)志物、內(nèi)含物等，以揭示其功能。外泌體表征在生物醫(yī)學(xué)研究、疾病診斷和治療等領(lǐng)域有重要應(yīng)用，有助于理解細胞間通信機制，開發(fā)新型診斷方法和治療策略。

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2023-05-11 11:20:33直播 | 深入外泌體: 冷凍電鏡下的新一代藥物遞送載體
細胞排出廢物的“垃圾桶”，到如今科研界熱度居高不下的寵兒，外泌體在某種意義上完成了質(zhì)的飛躍。外泌體是細胞分泌到胞外的一種囊泡（Extracellular Vesicles，EVs），其大小為30-150nm，具有雙層磷脂膜結(jié)構(gòu)，含有豐富的內(nèi)含物（包含蛋白質(zhì)、核酸等多種活性生物分子）。外泌體應(yīng)用于疾病診斷、藥物裝載等方面，它穿透性極強、吸收更佳、低免疫原性，使得它成為了非常優(yōu)質(zhì)的“活性物質(zhì)遞送系統(tǒng)”。外泌體由蛋白質(zhì)、核酸、脂質(zhì)組成，含有較高水平的膽固醇、鞘磷脂及飽和脂肪酸。相比其他載體，外泌體在遞送藥物方面有著顯而易見的優(yōu)勢：①外泌體的安全性非常高；②外泌體有非常好的靶向性潛力；③外泌體具備工程改造潛力；④外泌體有優(yōu)秀的多分子裝載能力。藥物遞送系統(tǒng)（DDS）的表征是新藥研發(fā)致關(guān)重要的一個環(huán)節(jié)，反應(yīng)DDS 的特性。冷凍電鏡是外泌體直觀表征的不二利器，通過將外泌體樣本快速冷凍，可以獲得外泌體近生理狀態(tài)下形貌信息細節(jié)，直接表征多項指標(biāo)；還可以通過冷凍電子斷層掃描技術(shù)獲得外泌體近生理狀態(tài)下的3D結(jié)構(gòu)，為新藥開發(fā)打開納米世界的大門。隨著冷凍電鏡技術(shù)的不斷發(fā)展，已經(jīng)突破分辨率極限，達到原子級別。冷凍電鏡技術(shù)對外泌體的探究越來越細致，為了更深入的走進外泌體，了解冷凍電鏡下的新一代藥物遞送載體，藥融圈聯(lián)合賽默飛共同邀請到蘇州唯思爾康科技有限公司SVP何新軍以及賽默飛世爾科技材料與結(jié)構(gòu)分析業(yè)務(wù)拓展經(jīng)理劉靖怡2位行業(yè)專家，于2023年5月18日做客線上直播間，揭開外泌體的神秘面紗。
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2025-05-19 11:15:18透射電子顯微鏡怎么表征
透射電子顯微鏡（Transmission Electron Microscope，簡稱TEM）作為一種強有力的科學(xué)研究工具，廣泛應(yīng)用于材料科學(xué)、生命科學(xué)等領(lǐng)域，用于研究樣品的微觀結(jié)構(gòu)、組成和形態(tài)。透射電子顯微鏡通過利用電子束穿透樣品并形成高分辨率的圖像，從而揭示出樣品的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，具有比光學(xué)顯微鏡更為的分辨率。在這篇文章中，我們將詳細探討透射電子顯微鏡的表征原理，分析其在材料分析和生物樣品觀察中的實際應(yīng)用，并介紹其如何幫助研究人員更地解析樣品的微觀特征。 透射電子顯微鏡的工作原理 透射電子顯微鏡的基本工作原理是利用電子束的短波長，突破光學(xué)顯微鏡的分辨率極限。電子束被加速到高能狀態(tài)，通過電磁透鏡聚焦，經(jīng)過樣品后，穿透的電子會與樣品中的原子相互作用，產(chǎn)生不同的信號，如衍射圖樣、透射電子圖像等。通過探測這些信號，科學(xué)家可以從不同角度觀察樣品的微觀結(jié)構(gòu)。 在TEM的工作過程中，樣品必須薄至幾個納米級別，這樣電子束才能有效穿透。這一特性使得TEM特別適合用于觀察薄膜、納米材料及生物組織切片等結(jié)構(gòu)。 透射電子顯微鏡在材料科學(xué)中的應(yīng)用 透射電子顯微鏡在材料科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用尤為廣泛。它能夠幫助研究人員了解金屬、陶瓷、半導(dǎo)體等材料的晶體結(jié)構(gòu)、缺陷及表面形態(tài)。通過TEM，研究人員可以直接觀察到材料中的晶粒、位錯、析出相等微觀結(jié)構(gòu)特征。這些信息對于提升材料的性能，尤其是在微電子學(xué)和納米技術(shù)中的應(yīng)用，具有極大的指導(dǎo)意義。 例如，在研究金屬材料的力學(xué)性能時，TEM可以用來揭示材料內(nèi)部的晶體缺陷和裂紋傳播路徑，這為材料的改性和應(yīng)用提供了重要依據(jù)。 透射電子顯微鏡在生物科學(xué)中的應(yīng)用 除了材料科學(xué)，透射電子顯微鏡在生物科學(xué)中的應(yīng)用也極其重要。通過TEM，生物學(xué)家可以觀察到細胞內(nèi)部的結(jié)構(gòu)，如細胞膜、核膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體等，甚至可以識別細胞中的細胞器和病毒顆粒。TEM在病毒學(xué)研究中發(fā)揮著不可替代的作用，科學(xué)家可以通過透射電子顯微鏡分析病毒的形態(tài)、尺寸和結(jié)構(gòu)，為病毒的診斷與提供理論基礎(chǔ)。 透射電子顯微鏡還廣泛用于分子生物學(xué)研究，幫助解析蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子的結(jié)構(gòu)，為基因工程和藥物研發(fā)提供了有力的技術(shù)支持。 透射電子顯微鏡表征的優(yōu)勢與挑戰(zhàn) 透射電子顯微鏡具備高分辨率和深度分析能力，使其在表征微觀結(jié)構(gòu)時具有無可比擬的優(yōu)勢。TEM也面臨一些挑戰(zhàn)。例如，樣品的制備要求極高，需要將樣品切割至納米級厚度，且在電子束照射下，樣品可能會受到損傷。TEM設(shè)備通常體積龐大，操作和維護要求較高，這也限制了其在一些低成本研究中的應(yīng)用。 結(jié)語 透射電子顯微鏡作為一種高端科學(xué)研究工具，在微觀結(jié)構(gòu)表征中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。無論是材料科學(xué)的創(chuàng)新研究，還是生命科學(xué)的深入探索，TEM都為科學(xué)家提供了的觀測手段。隨著技術(shù)的不斷進步，透射電子顯微鏡的應(yīng)用前景將更加廣闊，推動著各學(xué)科領(lǐng)域的不斷發(fā)展和創(chuàng)新。
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2025-02-01 09:10:16金相顯微鏡能不能測粉體
金相顯微鏡能不能測粉體？ 金相顯微鏡作為一種用于觀察金屬樣品的顯微分析工具，廣泛應(yīng)用于材料科學(xué)和金屬研究中。它能夠通過對金屬表面的觀察，幫助研究人員了解金屬的組織結(jié)構(gòu)、相組成及晶粒大小等重要信息。當(dāng)我們將其應(yīng)用到粉體測量上時，是否能獲得理想的效果？本文將深入探討金相顯微鏡能否有效測量粉體，并分析其中的技術(shù)挑戰(zhàn)與局限性。 金相顯微鏡的基本原理與應(yīng)用 金相顯微鏡通過將樣品制備成適合觀察的薄片，借助不同的顯微鏡鏡頭和光源進行觀察，從而獲取材料的微觀結(jié)構(gòu)信息。通常，這類顯微鏡配備了高分辨率的光學(xué)系統(tǒng)，能夠清晰呈現(xiàn)金屬材料表面不同相區(qū)的結(jié)構(gòu)特征，廣泛應(yīng)用于金屬鑄造、焊接、熱處理等領(lǐng)域，幫助研究者了解材料的性能變化。 粉體的特殊性與金相顯微鏡的適應(yīng)性 粉體由于其顆粒形態(tài)的特殊性，相較于常規(guī)的金屬樣品，更難通過傳統(tǒng)金相顯微鏡進行觀察。粉體材料的顆粒大小、形狀、分布等特征對于顯微鏡的觀察提出了更高的要求。金相顯微鏡主要適用于平整、穩(wěn)定的固體表面觀察，而粉體由于其顆粒形態(tài)和尺寸的不規(guī)則性，難以獲得清晰的觀察結(jié)果。粉體樣品的制備過程通常需要將其制成薄片或者通過特殊處理固定，才能進行顯微鏡分析。 金相顯微鏡在粉體分析中的局限性 粉體的顆粒尺寸通常較小，且形狀不規(guī)則，傳統(tǒng)金相顯微鏡的分辨率和觀察角度可能無法完全呈現(xiàn)顆粒的全貌。金相顯微鏡在觀察粉體時需要樣品表面平整，如果沒有經(jīng)過特殊的樣品制備，觀察效果可能會受到影響。再者，由于金相顯微鏡主要側(cè)重于觀察金屬的微觀結(jié)構(gòu)，而粉體的形態(tài)和表面特性常常需要借助其他顯微技術(shù)（如掃描電子顯微鏡 SEM）來獲得更為的分析結(jié)果。 結(jié)論 金相顯微鏡雖然可以對粉體進行一定程度的觀察，但由于粉體的顆粒特性、樣品制備難度及金相顯微鏡的局限性，它并非粉體分析的佳選擇。若要獲得更高精度的粉體表征，推薦使用掃描電子顯微鏡（SEM）等其他更為適合粉體分析的儀器。
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2024-01-15 17:30:19包涵體蛋白復(fù)體常見十大問題解析
在生命科學(xué)領(lǐng)域中，包涵體復(fù)體的研究占據(jù)了重要的地位。但隨著研究的深入，一些問題逐漸浮現(xiàn)。本文將對包涵體復(fù)體研究中常見的挑戰(zhàn)進行解析，以及為研究者提供一些解決思路。  ①包涵體復(fù)性原則：低濃度，平緩梯度，低溫。 ②怎樣洗滌包涵體？通常的洗滌方法一般是洗不干凈的，可以先把包涵體用6M鹽酸胍溶解充分，過濾除去未溶解的物質(zhì)，注意留樣跑電泳，然后用水稀釋到4M,離心把沉淀和上清分別跑電泳，如此類推可以一直稀釋到合適的濃度，可以找到一個合適去除雜質(zhì)的辦法，其實這就是梯度沉淀的方法，比通常的直接洗脫效果好。 ③對于尿素和鹽酸胍該怎么選擇尿素和鹽酸胍屬中強度變性劑，易經(jīng)透析和超濾除去。它們對包涵體氫鍵有較強的可逆性變性作用，所需濃度尿素8-10M，鹽酸胍6-8M。尿素溶解包涵體較鹽酸胍慢而弱，溶解度為70-90%，尿素在作用時間較長或溫度較高時會裂解形成氰酸鹽，對重組蛋白質(zhì)的氨基進行共價修飾，但用尿素溶解具有不電離，呈中性，成本低，蛋白質(zhì)復(fù)性后除去不會造成大量蛋白質(zhì)沉淀以及溶解的包涵體可選用多種色譜法純化等優(yōu)點，故目前已被廣泛采用。 鹽酸胍溶解能力達95%以上，且溶解作用快而不造成重組蛋白質(zhì)的共價修飾。但它也有成本高、在酸性條件下易產(chǎn)生沉淀、復(fù)性后除去可能造成大量蛋白質(zhì)沉淀和對蛋白質(zhì)離子交換色譜有干擾等缺點。 ④8M尿素溶解的包涵體溶液應(yīng)如何保存?在4度放置半個月，都沒什么問題 。在室溫放置超過48小時，可能會對目的蛋白有影響，因為尿素在堿性條件下可使一些氨基酸?；?，所以早些處理BI溶液比較好。 ⑤復(fù)性時的蛋白濃度一般使用濃度為0.1-1.0mg/ml，太高的濃度容易形成聚體沉淀，太低的濃度不經(jīng)濟，而且很多蛋白在低濃度時不穩(wěn)定，很容易變性。 ⑥蛋白復(fù)性后濃度低蛋白可能是在復(fù)性的過程中發(fā)生降解了。 可以將復(fù)性好的蛋白濃縮一下泡膠看看。復(fù)性過程一般都是低濃度蛋白，需要保證分子間有足夠的折疊空間。一些未正確折疊的蛋白就存在于沉淀中，可能沉淀看不出來，復(fù)性后的蛋白高速離心看看。 ⑦復(fù)性中蛋白析出是怎么回事？該怎么處理？出現(xiàn)蛋白析出，肯定是條件變化太劇烈了。 復(fù)性應(yīng)該采取復(fù)性液濃度和PH值逐漸變化的方法，例如根據(jù)包涵體的溶液成分，每隔1個PH或濃度值配置一種溶液，逐步透析到正常。此外透析時必須濃度極低，條件溫和，使蛋白質(zhì)能夠正確折疊。但是復(fù)性的比率應(yīng)該很低。 若加變性劑尿素可加到2M，鹽酸胍可加到1-1.5M； 另外可將甘油濃度增加，范圍可在≤30%，且在復(fù)性樣品中也可加適量甘油。 ⑧復(fù)性效果的檢測根據(jù)具體的蛋白性質(zhì)和需要，可以從生化、免疫、物理性質(zhì)等方面對蛋白質(zhì)的復(fù)性效率進行檢測。 凝膠電泳：一般可以用非變性的聚丙烯酰胺凝膠電泳可以檢測變性和天然狀態(tài)的蛋白質(zhì)，或用非還原的聚丙烯酰胺電泳檢測有二硫鍵的蛋白復(fù)性后二硫鍵的配對情況。光譜學(xué)方法：可以用紫外差光譜、熒光光譜、圓二色性光譜（CD）等，利用兩種狀態(tài)下的光譜學(xué)特征進行復(fù)性情況的檢測，但一般只用于復(fù)性研究中的過程檢測。色譜方法：如IEX、RP-HPLC、CE等，由于兩種狀態(tài)的蛋白色譜行為不同。生物學(xué)活性及比活測定：一般用細胞方法或生化方法進行測定，較好的反映了復(fù)性蛋白的活性，值得注意的是，不同的測活方法測得的結(jié)果不同，而且常常不能完全反映體內(nèi)活性。黏度和濁度測定：復(fù)性后的蛋白溶解度增加，變性狀態(tài)時由于疏水殘基暴露，一般水溶性很差，大多形成可見的沉淀析出。免疫學(xué)方法：如ELISA、WESTERN等，特別是對結(jié)構(gòu)決定簇的抗體檢驗，比較真實的反映了蛋白質(zhì)的折疊狀態(tài)。 ⑨變性的融合蛋白可以制備多抗或者單抗嗎？變性蛋白只是天然蛋白伸直的產(chǎn)物，用來免疫動物具有更強的抗原性。只是天然蛋白中被包在內(nèi)部的抗原決定簇也會暴露出來，如果用該變性抗原制備的抗體來檢測變性抗原是可以的，如果用來檢測天然蛋白，可能會有假陽性。做單抗也可以，同樣道理，篩選出的單抗可能對抗的抗原決定簇處于天然抗原的內(nèi)部，是否能用還要看將來該單抗用來干什么。 ⑩純化后的可溶性融合蛋白可以直接用于制備多抗嗎？免疫動物要求抗原體種盡量小。在這種小體積的情況下，緩沖液里的小分子成分只要沒毒影響就不大，可以不用考慮。 更多蛋白復(fù)體詳情可以上義翹神州網(wǎng)咨詢！
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2025-01-13 18:00:16熔體流動速率儀多少錢
熔體流動速率儀（MFR儀）是一種廣泛應(yīng)用于塑料行業(yè)的測試設(shè)備，主要用于測定塑料在熔融狀態(tài)下的流動性能。熔體流動速率儀的價格受多種因素的影響，包括品牌、性能、精度、功能等。熔體流動速率儀到底多少錢呢？本文將對其價格影響因素進行分析，并為您提供市場上的價格參考，幫助您做出更明智的購買決策。 熔體流動速率儀的價格會受到品牌的影響。市場上有很多不同品牌的熔體流動速率儀，知名品牌如Instron、Zwick和Tinius Olsen等通常會定價較高，主要因為其在產(chǎn)品質(zhì)量、技術(shù)支持和售后服務(wù)方面具備優(yōu)勢。相對而言，國內(nèi)品牌和一些小品牌的設(shè)備價格會更具競爭力。 熔體流動速率儀的價格與其性能和功能直接相關(guān)。普通的基礎(chǔ)型熔體流動速率儀一般價格較低，但它們只能提供較為基本的流動速率測量功能。隨著設(shè)備的技術(shù)更新和功能增強，如自動化程度的提高、更高的精度、更強的數(shù)據(jù)處理能力等，這些高端設(shè)備的價格會顯著上升。例如，某些高精度型號或帶有自動測試程序的設(shè)備，價格可能會達到幾萬元甚至更高。 設(shè)備的測量范圍和應(yīng)用領(lǐng)域也影響其定價。如果是用于高端科研或特殊行業(yè)的設(shè)備，如需要測量更廣泛的溫度和壓力范圍的熔體流動速率儀，其價格自然會更高。設(shè)備的配件和額外功能，如數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)、溫控系統(tǒng)等，也會增加成本。 根據(jù)市場調(diào)研，目前市場上的熔體流動速率儀價格大致在幾千元到幾萬元之間。普通的入門級設(shè)備價格大約在5000元至15000元之間，而一些高端、精密型設(shè)備則可達到30000元以上，甚至接近50000元。價格差異主要取決于設(shè)備的技術(shù)規(guī)格、品牌和功能需求。 選擇合適的熔體流動速率儀時，除了關(guān)注價格，還需要綜合考慮設(shè)備的技術(shù)參數(shù)、應(yīng)用場景、售后服務(wù)等多方面的因素。購買時，建議根據(jù)自身需求選擇性價比高的設(shè)備，避免盲目追求低價或高價。購買前一定要與供應(yīng)商進行充分溝通，確保設(shè)備的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性，保障測試結(jié)果的可靠性。 總而言之，熔體流動速率儀的價格因品牌、功能、精度等多種因素而有所不同，市場上的價格區(qū)間也較為廣泛。在選購時，了解設(shè)備的各項技術(shù)指標(biāo)及自己的實際需求，才能做出理智的購買決策。
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