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近日,日本關(guān)西學(xué)院大學(xué)(Kwansei Gakuin University)生物與環(huán)境科學(xué)學(xué)院生物科學(xué)系Yusuke Matsuda課題組聯(lián)合瑞士巴塞爾大學(xué)生物中心(The University of Basel’s Biozentrum)Benjamin D. Engel等多家研究機構(gòu),在Cell上發(fā)表了題為“Diatom pyrenoids are encased in a protein shell that enables efficient CO2 fixation”的研究性論文,該研究首次發(fā)現(xiàn)了第3種藻類蛋白核類型——具鞘蛋白核(PyShell),并分析了硅藻蛋白核PyShell的結(jié)構(gòu)和功能,闡述了它在Rubisco有效催化CO?固定中的貢獻(xiàn),為研究海洋生態(tài)系統(tǒng)中CO?的同化途徑提供了重要參考。
研究團隊進行了硅藻PyShell蛋白的鑒定及定位,并解析了硅藻細(xì)胞中PyShell蛋白的分子結(jié)構(gòu)。此外,研究人員還利用冷凍電子斷層掃描技術(shù)詳細(xì)觀察了硅藻內(nèi)部的微細(xì)結(jié)構(gòu)。
通過基因組編輯技術(shù)破壞硅藻的PyShell基因后,這些基因被破壞的硅藻在空氣環(huán)境的生長速度顯著變慢,光合作用效率顯著降低,僅為野生菌株的1/80(圖5)。在向反應(yīng)體系中逐步加入NaHCO3的過程中,通過液相氧電極(Hansatech,King's Lynn,U.K.)和氣相色譜火焰離子化檢測器同時測量硅藻(WT、m1和m2)樣品混合物中凈O?的釋放速率和DIC的總濃度。根據(jù)O?釋放速率與DIC濃度的關(guān)系曲線計算光合作用參數(shù):Pmax,最大凈O?釋放速率;K0.5,Pmax的一半時DIC濃度;[DIC]comp,無凈O?釋放時DIC濃度;APC,表觀光合傳導(dǎo)率(表1)。
圖5 T. pseudonana PyShell突變體的表型和光合參數(shù)
進一步觀察PyShell基因被破壞的硅藻二級葉綠體,發(fā)現(xiàn)正常的蛋白核結(jié)構(gòu)無法形成,蛋白核周圍的片狀結(jié)構(gòu)消失,蛋白核結(jié)構(gòu)崩解并破碎。這表明由PyShell形成的正常蛋白核結(jié)構(gòu)對Rubisco的CO?供應(yīng)至關(guān)重要(圖6)。
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