- 2025-01-10 10:50:07流式細(xì)胞分選系統(tǒng)
- 流式細(xì)胞分選系統(tǒng)是一種集光學(xué)、流體力學(xué)、電子學(xué)及計(jì)算機(jī)技術(shù)于一體的高科技細(xì)胞分析分選設(shè)備。它通過特定標(biāo)記的抗體與細(xì)胞表面抗原結(jié)合，利用激光散射和熒光檢測技術(shù)對細(xì)胞進(jìn)行多參數(shù)定量分析，同時(shí)根據(jù)預(yù)設(shè)的門控條件將細(xì)胞分為不同亞群。該系統(tǒng)能以高速度、高精度對細(xì)胞進(jìn)行分選，廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等領(lǐng)域，是研究細(xì)胞功能、分離特定細(xì)胞群體的重要工具。
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流式細(xì)胞分選系統(tǒng)資訊
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- 預(yù)算260萬 山東大學(xué)采購流式細(xì)胞分選系統(tǒng)
- 近日，山東大學(xué)流式細(xì)胞分選系統(tǒng)采購進(jìn)行公開招標(biāo)，并于2024年11月06日 14點(diǎn)30分開標(biāo)。
流式細(xì)胞分選系統(tǒng)產(chǎn)品
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流式細(xì)胞分選系統(tǒng)問答
- 2023-06-09 11:41:52人人都是流式高手：Tumor-infiltrating lymphocytes(TILs) 分選秘籍
- Tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) 是指浸潤腫瘤組織的淋巴細(xì)胞。淋巴細(xì)胞是免疫系統(tǒng)中的重要組成部分，負(fù)責(zé)識別和攻擊異常細(xì)胞，包括癌細(xì)胞。流式細(xì)胞術(shù)對TILs的分選提供了一個(gè)重要的工具，用于表征、純化和研究浸潤腫瘤的免疫細(xì)胞群。它有助于研究人員了解TILs的組成、功能和潛在的治 療相關(guān)性，推動我們對腫瘤與免疫相互作用的理解。我們使用流式細(xì)胞術(shù)來分選TILs主要應(yīng)用場景如下：01、鑒定和表征：流式細(xì)胞術(shù)允許我們根據(jù)TILs表面標(biāo)記物的特征來鑒定和表征不同的亞群。通過使用針對CD3、CD4、CD8和其他免疫細(xì)胞標(biāo)記物的特異性抗體來標(biāo)記細(xì)胞，我們可以區(qū)分和定量TILs中的各種T細(xì)胞亞群。這有助于我們了解腫瘤微環(huán)境中TILs的組成和多樣性。02、特定TIL亞群的純化：流式細(xì)胞術(shù)分選使我們能夠分離和純化感興趣的特定TIL亞群。通過基于表面標(biāo)記物的表達(dá)，對細(xì)胞進(jìn)行分選和篩選，我們可以收集純凈的TIL亞群用于進(jìn)一步的下游應(yīng)用。這使研究人員能夠研究特定的TIL亞群，并研究其功能特性或基因表達(dá)譜。03、功能分析：分選后的TILs可用于功能性分析，以評估其免疫活性和功能。例如，可以測試分選后的TILs的增殖能力、細(xì)胞因子產(chǎn)生、對腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性或其他功能性實(shí)驗(yàn)。這些分析提供了有關(guān)TIL亞群功能能力和潛在抗腫瘤免疫反應(yīng)的見解。04、基因組學(xué)或蛋白質(zhì)組學(xué)分析：流式細(xì)胞術(shù)分選可以獲得純凈的TIL細(xì)胞群，進(jìn)而進(jìn)行基因組學(xué)或蛋白質(zhì)組學(xué)分析。通過分析分選TILs的基因表達(dá)或蛋白質(zhì)譜，研究人員可以更深入地了解與TILs在腫瘤免疫中相關(guān)的分子機(jī)制和信號通路。然而不同于外周血、脾 臟中的淋巴細(xì)胞，TILs的流式檢測存在更多的不確定性，需要有效優(yōu)化包括樣本處理、配色方案、上樣條件以及分析方法等實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的各個(gè)方面，才能實(shí)現(xiàn)更為準(zhǔn)確、真實(shí)的多色復(fù)雜樣本流式檢測。圖1為外周血來源樣本淋巴細(xì)胞分型的流式檢測數(shù)據(jù)，由圖可見，淋巴細(xì)胞群體T、B細(xì)胞分群明顯，T細(xì)胞亞群也可清晰區(qū)分。另外，我們也可以看到，該數(shù)據(jù)以FSC通道設(shè)定閾值，其閾值設(shè)定值較低，導(dǎo)致碎片及噪音信號干擾明顯，不過由于血液樣本碎片較少，與細(xì)胞分群明顯，故而對最 終結(jié)果的影響并不大。圖1 血液樣本淋巴細(xì)胞免疫分型流式數(shù)據(jù)然而，當(dāng)我們使用同樣的模板檢測腫瘤組織樣本時(shí)，數(shù)據(jù)就出現(xiàn)了明顯問題。實(shí)體瘤組織細(xì)胞構(gòu)成復(fù)雜，并且在將組織樣本制備成單細(xì)胞樣本的過程中會產(chǎn)生大量的細(xì)胞碎片，這些雜質(zhì)細(xì)胞及碎片會對流式檢測造成顯著的干擾。如圖2所示，T細(xì)胞中出現(xiàn)了大量CD19和CD3雙陽性細(xì)胞，不符合已有文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)果。這些雙陽性細(xì)胞主要是由于雜質(zhì)細(xì)胞及碎片的非特異干擾導(dǎo)致的。這些干擾對于流式檢測及流式分選的準(zhǔn)確性有很大影響，甚至?xí)?dǎo)致得出錯(cuò)誤的結(jié)論。圖2 浸潤腫瘤組織的淋巴細(xì)胞免疫分型流式數(shù)據(jù)那么，基于以上數(shù)據(jù)，我們應(yīng)該如何優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)以提高浸潤腫瘤組織的淋巴細(xì)胞分選的準(zhǔn)確性呢？這里給大家以下幾點(diǎn)建議：01、增加Pan-Marker檢測：這里的Pan-Marker是指目標(biāo)細(xì)胞群均表達(dá)，但其他細(xì)胞群體及碎片不表達(dá)的表面標(biāo)記。CD45廣泛表達(dá)于免疫系統(tǒng)的各個(gè)細(xì)胞亞群上，但在非免疫細(xì)胞上沒有表達(dá)或表達(dá)很低。因此，在檢測淋巴細(xì)胞等免疫細(xì)胞時(shí)，可通過檢測CD45是否表達(dá)來區(qū)分免疫細(xì)胞及非免疫細(xì)胞，以達(dá)到排除雜質(zhì)細(xì)胞干擾的目的。02、優(yōu)化樣本制備方案：對復(fù)雜樣本來講，樣本制備方案是否合適決定了流式實(shí)驗(yàn)的成功率。可根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道并通過預(yù)實(shí)驗(yàn)來選擇最 佳的消化酶配方和消化時(shí)間，在確保細(xì)胞得率的同時(shí)盡量減少雜質(zhì)干擾并最 大限度的保存細(xì)胞活性及功能。此外，選擇合適的細(xì)胞分離手段進(jìn)行目的細(xì)胞的富集。例如，若針對淋巴細(xì)胞檢測，利用Ficoll或Percoll密度梯度離心法富集單個(gè)核細(xì)胞，可有效去除脂肪、碎片及雜質(zhì)細(xì)胞的干擾。03、進(jìn)行Fc封閉：組織浸潤的多種細(xì)胞，特別是單核/巨噬細(xì)胞以及DC細(xì)胞高表達(dá)抗體Fc端的受體。這些細(xì)胞在進(jìn)行流式抗體標(biāo)記時(shí)，即使不表達(dá)相關(guān)抗原，也可通過Fc受體非特異性的結(jié)合流式抗體的Fc端，從而導(dǎo)致非特異信號。要解決這一問題，可購買商業(yè)化Fc封閉試劑，在標(biāo)記流式抗體前進(jìn)行Fc封閉即可。04、合理設(shè)定閾值：閾值的設(shè)定與實(shí)驗(yàn)?zāi)康南⑾⑾嚓P(guān)。在流式分析實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)當(dāng)設(shè)定閾值去除絕大部分噪音及碎片信號，僅保留少量碎片信號即可。在流式分選實(shí)驗(yàn)中，若分選所得細(xì)胞用于培養(yǎng)，同樣應(yīng)當(dāng)設(shè)定閾值去除絕大部分噪音及碎片信號，僅保留少量碎片信號，這樣做可以有效提高分選效率及回收率；但若分選所得細(xì)胞用于qPCR、測序，特別是單細(xì)胞測序等基因組學(xué)應(yīng)用，由于碎片中含有一定量的核酸片段乃至細(xì)胞核碎片，在分選過程中就需要將盡可能多的碎片與目的細(xì)胞區(qū)分，因此應(yīng)當(dāng)設(shè)定較低的閾值以暴露足量的碎片信號讓分選儀器檢測到，進(jìn)而有效確保分選所得目的細(xì)胞不摻雜核酸碎片，以免影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性。05、利用空白熒光通道排除非特異：什么是空白熒光通道呢?舉一個(gè)例子，我們設(shè)計(jì)一個(gè)3色實(shí)驗(yàn)標(biāo)記FITC、PE、PE-Cy7三種染料，沒有標(biāo)記APC，在檢測時(shí)APC通道就是空白通道，是不應(yīng)該有陽性信號的。復(fù)雜樣本中的部分雜質(zhì)細(xì)胞有較強(qiáng)的非特異熒光信號，通常這些非特異的熒光信號在所有的流式熒光通道中均可檢測到?；谶@一原理，我們可在上樣時(shí)預(yù)留一到兩個(gè)空白熒光通道，樣本中的目的細(xì)胞沒有標(biāo)記這些空通道的熒光素，在這些通道里面是陰性的，而雜質(zhì)細(xì)胞的非特異信號在空白通道中通常也是陽性的，我們就可以通過設(shè)門選擇空白通道中的陰性細(xì)胞來達(dá)到去除非特異信號的目的。需要注意的是，利用這一方法時(shí)要充分考慮補(bǔ)償?shù)挠绊?，?好選擇與已用通道補(bǔ)償小或無補(bǔ)償?shù)耐ǖ雷鳛榭瞻淄ǖ馈?6、增加細(xì)胞死活染料：死細(xì)胞的非特異性地結(jié)合會增加假陽性。死細(xì)胞會產(chǎn)生自發(fā)熒光干擾特定信號的檢測。在TILs分選中去除死細(xì)胞。可以增加數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性：死亡的細(xì)胞可能會釋放細(xì)胞碎片和細(xì)胞內(nèi)成分，這可能會干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果，引入假陽性或假陰性結(jié)果。通過去除死細(xì)胞，可以提高分選結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。并且為分選后TILs細(xì)胞活力提供保證：分選到活細(xì)胞可以保證后續(xù)實(shí)驗(yàn)的有效性和可靠性。死亡細(xì)胞不具備正常的生物活性和功能，因此分選到活細(xì)胞可以確保后續(xù)實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蚍从痴鎸?shí)的細(xì)胞生物學(xué)狀態(tài)。圖3 無死細(xì)胞排除處理的樣本分析比較圖4 有死細(xì)胞排除處理的樣本分析比較復(fù)蘇后的PBMC在免疫染色之前不添加（圖 3）或者添加ViaKrome 405可固定活性染料（55℃，10分鐘）（圖 4）。然后，使用Perfix-nc細(xì)胞染色試劑盒（型號 B10825）處理細(xì)胞，并用Granzyme B-FITC、CD19-PE、CD14-ECD、CD79a-PC5.5、CD3-PC7 和 CD45- Krome Orange 進(jìn)行染色。 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)信息顯示：兩個(gè)不同條件下，門內(nèi)細(xì)胞在上一門級百分比也不一樣，充分展示了消除死細(xì)胞以后的數(shù)據(jù)效果。
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- 2023-07-03 11:42:58人人都是流式高手：GFP分選，這還有我不會的？
- 很常見的場景如下：細(xì)胞轉(zhuǎn)染后，想用流式檢測表達(dá)GFP細(xì)胞的百分比并且分選，但是不同的設(shè)門方法讓GFP陽性細(xì)胞百分比看起來有差異，究竟下面哪種策略才適合呢？今天我們主要討論一下FSC和SSC上設(shè)門對GFP陽性細(xì)胞百分比的影響。讓我們一個(gè)一個(gè)設(shè)門，把每種情況具體看一下。保持FITC通道上的門不變，我們來看一下在前向和側(cè)向的散點(diǎn)圖上設(shè)門在不同的位置，代表你選擇了什么類型的細(xì)胞。只有P1賦予了藍(lán)色，其他門的顏色去掉，這樣，我們就可以很方便的看出來細(xì)胞群在不同的圖上所處的位置。第 一種設(shè)門，除了左下角靠近0的碎片不圈，其他基本都圈上，從第二張SSC-A和SSC-H排粘連的散點(diǎn)圖可以看出來有單個(gè)細(xì)胞也有粘連細(xì)胞，P2門下 GFP陽性細(xì)胞百分比為61.36%。第二種設(shè)門，只圈最密集的這一群，從第二張SSC-A和SSC-H排粘連的散點(diǎn)圖可以看出來，這部分的細(xì)胞基本都是單個(gè)的，P2門下 GFP陽性細(xì)胞百分比為65.39%，較第 一種高。第三種設(shè)門，密集細(xì)胞群左邊的和左下角靠近0的碎片不圈，只圈右邊的這兩群，從第二張SSC-A和SSC-H排粘連的散點(diǎn)圖可以看出來有單個(gè)細(xì)胞也有粘連細(xì)胞，P2門下 GFP陽性細(xì)胞百分比為65.70%，較第 一種高，和第二種差不多，但是稍微高一點(diǎn)。這樣分析下來，大家最 大的困惑是這三群細(xì)胞要不要圈，怎么圈才是最 好的？讓我們在第 一張F(tuán)SC和SSC的散點(diǎn)圖上根據(jù)細(xì)胞群設(shè)三個(gè)門。三個(gè)門分別為P1、P4和P5，顯示了三種不同的細(xì)胞群。P1顯示為單個(gè)細(xì)胞，F(xiàn)ITC通道上陽性細(xì)胞比例為65.54%。P4顯示大部分為粘連的細(xì)胞，因此在FITC通道上的陽性細(xì)胞比例為71.43%，較P1細(xì)胞群高，如果分析時(shí)加入這群細(xì)胞會增加GFP陽性細(xì)胞百分比。如果在單克隆分選中選擇這群，會導(dǎo)致雖然篩選到陽性細(xì)胞，但是單克隆源性降低。P5顯示為單個(gè)細(xì)胞，但是因?yàn)镕SC較P1小，考慮是細(xì)胞狀態(tài)不好細(xì)胞呈現(xiàn)皺縮導(dǎo)致，所以其在FITC通道上的陽性細(xì)胞比例為20.15%，較P1細(xì)胞群低的多，如果分析時(shí)加入這群細(xì)胞則會降低GFP陽性細(xì)胞百分比。如果加入7AAD染料，這群會呈現(xiàn)出陽性，所以在分選中這群細(xì)胞不該圈選，或者在去除死細(xì)胞的門中去除。由此可見，如果只想要分析狀態(tài)好的單個(gè)細(xì)胞的GFP陽性百分比，那你可以選擇P1門的設(shè)門方式，當(dāng)然也可以把P1和P4都選上，再用SSC-A和SSC-H去掉粘連細(xì)胞對數(shù)據(jù)的干擾。練習(xí)題如果您在細(xì)胞轉(zhuǎn)染后，流式檢測表達(dá)mCherry細(xì)胞的百分比時(shí)發(fā)現(xiàn)，mCherry通道細(xì)胞群并沒有呈現(xiàn)明顯分開的兩群（由于細(xì)胞在mCherry通道有較高的自發(fā)熒光），要怎么確定mCherry細(xì)胞百分比并且分選呢？
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- 2025-03-19 13:15:14SCADA系統(tǒng)多少錢
- SCADA系統(tǒng)多少錢？ 在現(xiàn)代工業(yè)自動化和智能化管理領(lǐng)域，SCADA系統(tǒng)（Supervisory Control and Data Acquisition，監(jiān)控與數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)）起著至關(guān)重要的作用。它廣泛應(yīng)用于電力、能源、水利、制造、交通等行業(yè)，幫助企業(yè)實(shí)現(xiàn)設(shè)備遠(yuǎn)程監(jiān)控、數(shù)據(jù)采集與分析、實(shí)時(shí)報(bào)警等功能。隨著行業(yè)對自動化程度的不斷提高，SCADA系統(tǒng)的市場需求也在日益增長。許多企業(yè)在考慮引入SCADA系統(tǒng)時(shí)，常常會對其價(jià)格產(chǎn)生疑問。本文將探討影響SCADA系統(tǒng)價(jià)格的因素，并幫助讀者更好地理解其成本構(gòu)成。 SCADA系統(tǒng)價(jià)格的影響因素 SCADA系統(tǒng)的價(jià)格受多種因素影響，其中主要的包括系統(tǒng)規(guī)模、硬件設(shè)備、軟件功能、定制需求以及技術(shù)支持等。 系統(tǒng)規(guī)模與復(fù)雜度 SCADA系統(tǒng)的價(jià)格與其覆蓋的范圍和系統(tǒng)的復(fù)雜度密切相關(guān)。大規(guī)模的工業(yè)設(shè)施需要更多的傳感器、監(jiān)控點(diǎn)和數(shù)據(jù)處理能力，因此價(jià)格自然會較高。相反，對于小型企業(yè)或單一項(xiàng)目，簡單的SCADA系統(tǒng)可能會相對便宜。 硬件配置 SCADA系統(tǒng)不僅僅依賴于軟件平臺，硬件設(shè)備同樣影響系統(tǒng)的整體成本。例如，傳感器、PLC（可編程邏輯控制器）、數(shù)據(jù)采集設(shè)備等硬件設(shè)施的選型、數(shù)量及質(zhì)量，都直接影響系統(tǒng)價(jià)格。如果需要高精度、高可靠性的硬件，費(fèi)用相對較高。 軟件功能與定制化需求 標(biāo)準(zhǔn)版的SCADA系統(tǒng)功能可能比較基礎(chǔ)，但對于需要特定功能或高度定制化的企業(yè)，價(jià)格會更高。定制化開發(fā)、特定行業(yè)應(yīng)用的集成以及與其他企業(yè)系統(tǒng)的兼容性調(diào)整，都會增加開發(fā)成本。 技術(shù)支持與服務(wù) SCADA系統(tǒng)的價(jià)格還會受到技術(shù)支持和維護(hù)服務(wù)的影響。長期的技術(shù)支持和更新服務(wù)通常會在初期費(fèi)用之外額外收費(fèi)。這部分費(fèi)用通常根據(jù)服務(wù)協(xié)議的不同而有所不同，有的廠商提供基礎(chǔ)支持，而有的則提供24/7的高端服務(wù)。 廠商選擇 不同廠商的定價(jià)策略和品牌影響力也會導(dǎo)致價(jià)格差異。知名廠商的系統(tǒng)通常在質(zhì)量、功能、售后服務(wù)等方面表現(xiàn)出色，但價(jià)格也相對較高。相對較小或新興的供應(yīng)商可能提供較為經(jīng)濟(jì)的解決方案，但其技術(shù)水平、售后服務(wù)等可能有所不同。 SCADA系統(tǒng)的價(jià)格區(qū)間 基于以上因素，SCADA系統(tǒng)的價(jià)格差異較大。從幾千美元到幾十萬美元不等。簡單的系統(tǒng)可能價(jià)格在幾千至幾萬之間，而復(fù)雜的大型企業(yè)級SCADA系統(tǒng)則可能達(dá)到幾十萬甚至更高。具體價(jià)格還需根據(jù)企業(yè)的實(shí)際需求、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)以及系統(tǒng)規(guī)模來具體評估。 結(jié)語 選擇合適的SCADA系統(tǒng)不僅僅是考慮成本問題，更是要根據(jù)企業(yè)的需求、系統(tǒng)的穩(wěn)定性與功能來綜合考慮。了解影響價(jià)格的關(guān)鍵因素，并與廠商深入溝通，可以幫助企業(yè)做出更具成本效益的決策，從而在提高生產(chǎn)效率和管理水平的確保系統(tǒng)的長期穩(wěn)定運(yùn)行。
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- 2022-12-01 20:08:12流式高手來PK | 流式分選小技巧投票評選
- 為期10天的流式分選小技巧征集已經(jīng)結(jié)束啦，大家對流式分選都有很多心得哦。經(jīng)過5位貝克曼應(yīng)用和市場專家的評選，有11位小伙伴的作品入圍本輪大眾投票。讓我們先來“康康”其中兩個(gè)吧~小技巧1：對于單克隆的孔板分選，可以適當(dāng)稀釋樣本。放慢進(jìn)樣流速。得到活率更好的單細(xì)胞。對于細(xì)胞團(tuán)塊：在樣本里加入適當(dāng)?shù)腅DTA和DNAase來防止。對于極脆弱的細(xì)胞分選：可以讓儀器運(yùn)行時(shí)的進(jìn)樣壓差控制在0.5以內(nèi)。小技巧2：在細(xì)胞制備、培養(yǎng)階段，如果該培養(yǎng)細(xì)胞是貼壁細(xì)胞，需用先用胰酶消化細(xì)胞，然后收集待測樣品細(xì)胞，離心、洗滌、封閉后標(biāo)記熒光素偶聯(lián)抗體即可。還有很多非常實(shí)用的小技巧如果你也喜歡，就去掃碼為他點(diǎn)個(gè)贊吧！我們將根據(jù)點(diǎn)贊票數(shù)評選：一等獎：Apple AirPods Por降噪耳機(jī)二等獎：西部數(shù)據(jù)移動硬盤三等獎：機(jī)械鍵盤*其他入圍作品也可以獲得入圍獎：超聲波眼鏡清洗機(jī)沒有入圍的小伙伴不要灰心，我們還有早鳥獎放送哦~投票時(shí)間2022年12月1日-12月7日掃描上方二維碼快來你最心怡的3個(gè)小技巧點(diǎn)贊投票吧！*投票結(jié)束10個(gè)工作日會郵寄獎品，請大家關(guān)注哦！
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- 2022-11-22 20:20:26流式高手來PK | 流式分選小技巧有獎?wù)骷?/a>
- 你有沒有被這些問題困惑：什么方法可以提高分選的細(xì)胞得率？分選樣本制備的時(shí)候怎樣避免團(tuán)塊？液流如何才能保持穩(wěn)定？……遇到這些問題你又是怎樣用聰明的小腦袋解決的呢？比如當(dāng)我們發(fā)現(xiàn)分選細(xì)胞死亡率高，可以通過調(diào)整collecting buffer改善。以293T細(xì)胞為例，collecting buffer中添加FBS或BSA可以顯著降低細(xì)胞死亡率至5%以下[1]。你有什么流式分選的小技巧呢？快來參與流式高手PK大賽，把你的分選小技巧分享給大家吧！還有驚喜好禮等著滿滿才氣的你哦~
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