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2025-01-10 10:50:40顯微血管止血鑷
顯微血管止血鑷是顯微外科手術(shù)中常用的精細(xì)工具,主要用于夾持、分離、止血微小血管及組織。其特點(diǎn)包括:精細(xì)的鑷尖設(shè)計(jì),便于在狹窄空間內(nèi)操作;良好的彈性與韌性,確保夾持力度適中且不易損傷組織;光滑的表面處理,減少與組織間的摩擦,降低損傷風(fēng)險(xiǎn)。顯微血管止血鑷是顯微外科手術(shù)成功的重要保障。

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2025-04-23 14:15:19電子探針顯微分析方法有哪些?
電子探針顯微分析方法 電子探針顯微分析方法(Electron Probe Microanalysis, EPMA)是一種利用電子束與樣品相互作用原理來進(jìn)行元素分析和成分分析的技術(shù)。該技術(shù)廣泛應(yīng)用于材料科學(xué)、地質(zhì)學(xué)、冶金學(xué)等領(lǐng)域,是研究微觀結(jié)構(gòu)、元素分布以及樣品成分的關(guān)鍵工具。通過高精度的分析,電子探針顯微分析方法能夠提供極為詳盡的樣品元素信息,并為科學(xué)研究和工業(yè)應(yīng)用提供可靠的數(shù)據(jù)支持。本文將介紹電子探針顯微分析的基本原理、應(yīng)用領(lǐng)域及其優(yōu)勢(shì)。 電子探針顯微分析的基本原理 電子探針顯微分析方法基于電子束與樣品相互作用后產(chǎn)生的各種信號(hào),如特征X射線、二次電子和背散射電子等。通過測(cè)量這些信號(hào),能夠獲得樣品的元素組成和空間分布信息。具體來說,電子探針顯微分析通過聚焦電子束在樣品表面激發(fā)特征X射線,這些X射線的能量與元素的原子結(jié)構(gòu)相對(duì)應(yīng),因此可以通過對(duì)X射線進(jìn)行能量分析來確定樣品中各元素的種類和含量。 在實(shí)際操作中,電子束的能量通常設(shè)置在10-30kV之間,能夠深入樣品的表面層并激發(fā)X射線。這些X射線的強(qiáng)度與樣品中相應(yīng)元素的濃度成正比,通過對(duì)X射線譜圖的定量分析,研究人員可以精確地測(cè)定元素的分布和含量。 電子探針顯微分析的應(yīng)用領(lǐng)域 材料科學(xué) 電子探針顯微分析技術(shù)在材料科學(xué)中有著廣泛應(yīng)用。尤其是在金屬合金、陶瓷、復(fù)合材料等的成分分析中,EPMA能夠提供高空間分辨率和定量分析能力。通過對(duì)材料微觀結(jié)構(gòu)的研究,科學(xué)家們可以了解材料的性能、相變以及在不同條件下的行為,從而優(yōu)化材料的設(shè)計(jì)和性能。 地質(zhì)學(xué) 在地質(zhì)學(xué)研究中,電子探針顯微分析方法被廣泛應(yīng)用于礦物學(xué)和巖石學(xué)研究。通過分析礦物和巖石樣品的元素組成,EPMA能夠幫助地質(zhì)學(xué)家解讀地質(zhì)過程、巖漿活動(dòng)、礦產(chǎn)資源的成因以及沉積環(huán)境等信息,為資源勘探和環(huán)境保護(hù)提供有力支持。 生命科學(xué) 在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,電子探針顯微分析也有著重要的應(yīng)用。通過對(duì)細(xì)胞和組織樣本進(jìn)行元素分析,研究人員可以探索生物體內(nèi)微量元素的分布,幫助揭示生物體的代謝過程和疾病機(jī)制。例如,通過EPMA分析癌細(xì)胞與正常細(xì)胞中的元素差異,有助于癌癥早期診斷和策略的優(yōu)化。 電子探針顯微分析的優(yōu)勢(shì) 與傳統(tǒng)的分析方法相比,電子探針顯微分析在空間分辨率和分析精度方面具有明顯優(yōu)勢(shì)。EPMA具有極高的空間分辨率,能夠?qū)ξ⒚咨踔良{米尺度的樣品進(jìn)行高精度分析,適用于復(fù)雜的微觀結(jié)構(gòu)研究。EPMA具備較強(qiáng)的元素分析能力,能夠?qū)Χ喾N元素進(jìn)行定性和定量分析,尤其適合于分析復(fù)雜樣品中的微量元素。EPMA分析無需對(duì)樣品進(jìn)行復(fù)雜的化學(xué)預(yù)處理,能夠直接在固體樣品表面進(jìn)行分析,具有較高的分析效率。 總結(jié) 電子探針顯微分析方法是一項(xiàng)高精度的材料分析技術(shù),憑借其的空間分辨率和元素分析能力,在多個(gè)領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。從材料科學(xué)到生命科學(xué),EPMA技術(shù)為研究者提供了深入理解樣品成分和微觀結(jié)構(gòu)的強(qiáng)大工具。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,電子探針顯微分析在科研和工業(yè)中的應(yīng)用前景將更加廣闊,并為推動(dòng)科技創(chuàng)新和產(chǎn)業(yè)發(fā)展作出更大的貢獻(xiàn)。
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2023-03-03 16:36:05熒光成像在血管神經(jīng)外科手術(shù)中的優(yōu)勢(shì)
熒光素和ICG熒光血管造影改變了血管神經(jīng)外科醫(yī)生的手術(shù)方式,它提供具有豐富信息的術(shù)中視圖。2021神經(jīng)可視化峰會(huì)是一個(gè)匯集quan球神經(jīng)外科醫(yī)生的特別活動(dòng),在此期間,A教授在一次家du網(wǎng)絡(luò)研討會(huì)上分享了他在熒光引導(dǎo)下的神經(jīng)外科手術(shù)經(jīng)驗(yàn),介紹了幾個(gè)臨床案例。學(xué)習(xí)要點(diǎn)了解熒光素鈉和ICG的歷史以及它們?cè)谘苌窠?jīng)外科的首次應(yīng)用探討熒光技術(shù)在神經(jīng)外科的優(yōu)勢(shì),及其如何為神經(jīng)外科醫(yī)生提供有價(jià)值的信息觀看熒光引導(dǎo)下的神經(jīng)外科手術(shù)視頻,包括動(dòng)靜脈畸形(AVM)、搭橋和動(dòng)脈瘤手術(shù)的臨床案例熒光成像在神經(jīng)外科的應(yīng)用:熒光素鈉和ICG的歷史及其首次應(yīng)用熒光素鈉自20世紀(jì)60年代末以來一直用于神經(jīng)外科,最初由醫(yī)生對(duì)其進(jìn)行了描述,醫(yī)生在開顱時(shí)進(jìn)行了硬膜外血管造影術(shù)。吲哚菁綠(ICG)在很久以后才被應(yīng)用于評(píng)估腦血流。它是由醫(yī)生在21世紀(jì)初引入的,并決定將這種廣泛應(yīng)用于眼科的技術(shù)轉(zhuǎn)移到神經(jīng)外科。ICGzui早用于神經(jīng)外科評(píng)估動(dòng)脈瘤,并逐步應(yīng)用于幾種神經(jīng)外科病癥:評(píng)估旁路通透性、AVM手術(shù)、評(píng)估海綿狀血管瘤手術(shù)和神經(jīng)腫瘤學(xué)中靜脈引流異常。目前,腦熒光血管造影使用ICG的情況更為普遍。熒光造影引導(dǎo)下的神經(jīng)外科:熒光素鈉與ICG的優(yōu)缺點(diǎn)熒光素鈉視頻血管造影有一些優(yōu)勢(shì),包括成本較低,精細(xì)細(xì)節(jié)的可視化,以及可以直接在顯微鏡下通過熒光過濾器進(jìn)行觀察。ICG需要單獨(dú)的紅外攝像機(jī),可以將信息顯示在不同的屏幕上。熒光素?zé)晒庖矠闊o牽開器手術(shù)提供了有用的價(jià)值,這與手術(shù)創(chuàng)傷的降低密切相關(guān)。熒光素鈉的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是作為一種相對(duì)惰性的染料,急性毒性研究顯示盡管會(huì)誘發(fā)一些嚴(yán)重的過敏反應(yīng),但它對(duì)人類沒有特殊危害。此外,成本也非常低。熒光素鈉的缺點(diǎn):它在血液中至少停留一小時(shí),需要長時(shí)間等待后才能重復(fù)使用。ICG的半衰期為3至4分鐘,因此可以在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行第二次或第三次注射。但在某些病人群體中,如對(duì)碘過敏的病人或甲狀腺功能亢進(jìn)的病人,它是禁用的。而且它價(jià)格昂貴。熒光造影在動(dòng)靜脈畸形(AVM)手術(shù)中的應(yīng)用在一名患有左額葉動(dòng)靜脈畸形的患者中,選擇了對(duì)側(cè)入路,以避免優(yōu)勢(shì)半球,并更好地控制進(jìn)料器。使用FL560術(shù)中熒光素?zé)晒饽K,可通過顯微鏡在手術(shù)野內(nèi)精確地顯示時(shí)間、給藥器、靜脈和AVM周圍的短血管,并具有清晰的對(duì)比度。但在使用ICG時(shí),用戶必須查看另一個(gè)屏幕,而且無法看到AVM的周圍環(huán)境。必須通過從顯示器轉(zhuǎn)移到手術(shù)野來進(jìn)行解釋。熒光素?zé)晒飧菀自谑中g(shù)野中直接識(shí)別供血血管,并將實(shí)質(zhì)圖像更好地可視化。圖1:用FL560熒光素?zé)晒饽K觀察AVM與用ICG觀察AVM。圖片由A教授提供。熒光造影在搭橋手術(shù)中的應(yīng)用在一例煙霧病患者中,施行了顳淺動(dòng)脈-大腦中動(dòng)脈搭橋術(shù)(STA-MCA)。熒光素鈉熒光對(duì)探索和檢查STA以及在手術(shù)野直接看到動(dòng)脈的功能非常有用。這是了解搭橋手術(shù)工作方式的一種非常有效的技術(shù)。它提供了良好的血管和組織灌注的可視化,盡管厚壁血管不太明顯。圖2:在搭橋手術(shù)中使用FL560熒光素?zé)晒饽K。圖片由A教授提供。熒光造影在動(dòng)脈瘤手術(shù)中的應(yīng)用在一名患有中動(dòng)脈小動(dòng)脈瘤的患者中,使用熒光素?zé)晒庵С謯A閉。造影劑有助于暴露動(dòng)脈瘤,并在手術(shù)野中直接觀察到穿支及其灌注情況。使用ICG可能會(huì)忽略這一點(diǎn),因?yàn)樗枰榭戳硪粋€(gè)屏幕,且呈現(xiàn)的是黑白圖像。在熒光素?zé)晒庀?,閉塞的動(dòng)脈瘤清晰可見。但由于動(dòng)脈瘤手術(shù)往往很快,而且厚壁血管也不太明顯,所以無法進(jìn)行重復(fù)使用。熒光素鈉可與ICG結(jié)合使用,兩者并不相互排斥。圖注:利用FL560熒光素?zé)晒饽K進(jìn)行動(dòng)脈瘤夾閉。圖片由A教授提供。綜上所述,熒光素視頻血管造影具有手術(shù)野三維可視化的優(yōu)勢(shì),可以實(shí)時(shí)進(jìn)行手術(shù)操作,尤其是對(duì)狹窄視野內(nèi)的小血管。此外,它的成本更低。熒光素血管造影的缺點(diǎn)是無法觀察到厚壁血管中的血流,而且染料在血液中停留的時(shí)間較長。ICG血管造影技術(shù)和熒光素血管造影技術(shù)為神經(jīng)外科醫(yī)生提供了重要優(yōu)勢(shì)。
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2023-07-25 10:40:14半導(dǎo)體和鈣鈦礦材料的高光譜(顯微)成像
目前在光伏業(yè)界,正在進(jìn)行一項(xiàng)重大努力,以提高光伏和發(fā)光應(yīng)用中所用半導(dǎo)體的效率并降低相關(guān)成本。這就需要探索和開發(fā)新的制造和合成方法,以獲得更均勻、缺陷更少的材料。無論是電致還是光致發(fā)光,都是實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)的重要工具。通過發(fā)光可以深入了解薄膜內(nèi)部發(fā)生的重組過程, 而無需通過對(duì)完整器件的多層電荷提取來解決復(fù)雜問題。HERA高光譜照相機(jī)是繪制半導(dǎo)體光譜成像的理想設(shè)備,因?yàn)樗軌蚩焖佟⒍康乩L制半導(dǎo)體發(fā)射光譜圖,且具有高空間分辨率和高光譜分辨率的特性。硅太陽能電池的電致發(fā)光光譜成像光伏設(shè)備中的缺陷會(huì)導(dǎo)致光伏產(chǎn)生的載流子發(fā)生重組,阻礙其提取并降低電池效率。電致發(fā)光光譜成像可以揭示這些有害缺陷的位置和性質(zhì)。"反向"驅(qū)動(dòng)太陽能電池(即施加電流)會(huì)產(chǎn)生電致發(fā)光,因?yàn)檩d流子在電極上被注入并在有源層中重新結(jié)合。在理想的電池中,所有載流子都會(huì)發(fā)生帶間重組,這在硅中會(huì)產(chǎn)生1100 nm附近的光(效率非常低)。然而,晶體結(jié)構(gòu)中的缺陷會(huì)產(chǎn)生其他不利的重組途徑。雖然這些過程通常被稱為"非輻射"重組,但偶爾也會(huì)產(chǎn)生光子,其能量通常低于帶間發(fā)射。捕獲這些非常罕見的光子可以了解缺陷的能量和分布。在本實(shí)驗(yàn)中,我們使用了HERA SWIR (900-1700 nm),它非常適合測(cè)量硅發(fā)光衰減。測(cè)量裝置如圖1所示:HERA安裝在三腳架上,在太陽能電池上方,連接到一個(gè)10A的電源。640×512像素的傳感器安裝在樣品上方75厘米處,空間分辨率約為250微米。圖1. 實(shí)驗(yàn)裝置最重要的是,HERA光學(xué)系統(tǒng)沒有輸入狹縫,因此光通量非常高,是測(cè)量極微弱光發(fā)射的理想選擇。圖2.A和2.B顯示了兩個(gè)波長的電致發(fā)光(EL)圖像:1150 nm(帶間發(fā)射)和1600 nm(缺陷發(fā)射),這是4次掃描的平均值(總采集時(shí)間:5分鐘)。通過分析這些圖像,我們可以看到,盡管缺陷區(qū)域的亮度遠(yuǎn)低于主發(fā)射區(qū)域,但它們?nèi)员磺逦胤直娉鰜怼4送?,具有?qiáng)缺陷發(fā)射的區(qū)域的帶間發(fā)射相對(duì)較弱。我們可以注意到有幾個(gè)區(qū)域在兩個(gè)波長下都是很暗的;這可能是由于樣品在運(yùn)輸過程中損壞了電池造成的。圖2.C中以對(duì)數(shù)標(biāo)尺顯示了小方塊感興趣區(qū)域(圖2A和2B中所示)的光譜。圖 2.A 和 B:兩個(gè)選定波長(1150 nm 和 1600 nm)的電致發(fā)光(EL)圖像。C:A和B中三個(gè)不同區(qū)域?qū)?yīng)的電致發(fā)光光譜(圖像中的彩色方框)。金屬鹵化物鈣鈦礦薄膜的光致發(fā)光顯微研究通過旋涂等技術(shù)含量低、成本效益高的方法,可以制造出非常高效的太陽能電池和LED。這些方法面臨的一個(gè)挑戰(zhàn)是在微觀長度的尺度上保持均勻的成分。光致發(fā)光顯微鏡是表征這種不均勻性的一個(gè)特別強(qiáng)大的工具。HERA高光譜相機(jī)可以連接到任何顯微鏡(正置或倒置)的c-mount相機(jī)端口,并直接開始采集高光譜數(shù)據(jù),無需任何校準(zhǔn)程序。圖3. 與尼康LV100直立顯微鏡連接的HERA VIS-NIR。在本實(shí)驗(yàn)中,我們使用HERA VIS-NIR(400-1000 nm)耦合到尼康LV100直立顯微鏡(圖3)來表征兩種鹵化物前驅(qū)體合金的帶隙分布。將兩種鹵化物前驅(qū)體合金化的優(yōu)點(diǎn)是能夠調(diào)整材料的帶隙;然而,這兩種成分經(jīng)常會(huì)發(fā)生逆混合,從而導(dǎo)致性能損失。本實(shí)驗(yàn)的目的是檢測(cè)這種逆混合現(xiàn)象:事實(shí)上,混合比的局部變化會(huì)改變局部帶隙,從而導(dǎo)致發(fā)射不同能量的光子。在這種配置中,激發(fā)光來自汞燈,通過帶通濾光片在350 nm處進(jìn)行濾光,并通過發(fā)射路徑上的二向色鏡將其從相機(jī)中濾除。HERA的高通量使其能夠在大約1分鐘的測(cè)量時(shí)間內(nèi)收集完整的數(shù)據(jù)立方體(130萬個(gè)光譜)。圖4.樣品的光譜綜合強(qiáng)度圖(A:全尺寸;B:放大)。圖4.A和4.B分別顯示了所有波長(400-1000 nm)總集成信號(hào)的全尺寸和放大圖像,揭示了長度尺度在1 μm左右的明亮特征。當(dāng)我們比較亮區(qū)和暗區(qū)的光譜時(shí)(圖5.B中的黑色和紅色曲線),我們發(fā)現(xiàn)暗區(qū)實(shí)際上也有發(fā)射, 不僅強(qiáng)度較低,而且波長中心比亮區(qū)短。事實(shí)上,光譜具有雙峰形狀,很可能與逆混合前驅(qū)體的發(fā)射相對(duì)應(yīng)。圖5.A的發(fā)射圖清楚地顯示了帶隙的這種變化。我們現(xiàn)在可以理解為什么低帶隙區(qū)域看起來更亮了--載流子可能從高帶隙區(qū)域弛豫到那里,并且在發(fā)生輻射重組之前無法返回。圖5.A:顯示平均發(fā)射波長的強(qiáng)度圖。B:亮區(qū)和暗區(qū)的發(fā)射光譜(正?;?。東隆科技作為NIREOS國內(nèi)總代理公司,在技術(shù)、服務(wù)、價(jià)格上都具有優(yōu)勢(shì)。如果您有任何產(chǎn)品相關(guān)的問題,歡迎隨時(shí)來電垂詢,我們將為您提供專業(yè)的技術(shù)支持與產(chǎn)品服務(wù)。
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2022-09-26 14:33:37熒光顯微系統(tǒng)的新高度——Luminosa單光子計(jì)數(shù)共聚焦顯微
過去的幾十年中,德國PicoQuant的研發(fā)人員一直致力于制造最具定量性和重復(fù)性的時(shí)間分辨熒光顯微鏡系統(tǒng)。現(xiàn)在他們終于邁出了這一步,完成了一套更易于使用、且不影響靈敏度的系統(tǒng)。該系統(tǒng)打破常規(guī),無需培訓(xùn)物理學(xué)支持人員便可輕松使用。全新的Luminosa可以讓每個(gè)分子生物物理學(xué)或結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究人員輕松地將單分子和時(shí)間分辨熒光顯微鏡的方法添加到他們的“工具箱”中。Luminosa系統(tǒng)的主要功能包括一鍵式自動(dòng)對(duì)準(zhǔn)程序和基于上下文的直觀工作流程。例如,系統(tǒng)可以自動(dòng)識(shí)別單個(gè)分子,或者它可以自動(dòng)確定單個(gè)分子FRET (smFRET) 的校正因子。對(duì)于經(jīng)驗(yàn)豐富的專家,它仍具有先進(jìn)的靈活性。所有光機(jī)組件均可訪問,數(shù)據(jù)以開放格式存儲(chǔ),工作流程和圖形用戶界面均可定制。用戶可以完全訪問實(shí)驗(yàn)參數(shù),例如可調(diào)節(jié)的觀察量。全新的Luminosa本身就是一套時(shí)間分辨熒光顯微的多功能“工具箱”。它用于單分子水平的動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究。這些方法包括熒光壽命成像 (FLIM)、用于快速過程的rapidFLIMHiRes、FLIM-FRET、單分子FRET(突發(fā)和時(shí)間跟蹤分析)、熒光相關(guān)光譜 (FCS)、各向異性成像和微分干涉對(duì)比 (DIC) 成像。隨著時(shí)間分辨熒光顯微技術(shù)的用戶群體不斷擴(kuò)大,對(duì)高重復(fù)性、高準(zhǔn)確性和寶貴實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)規(guī)則的需求變得尤為明顯。Luminosa已經(jīng)包含了科學(xué)家集體努力制定的經(jīng)驗(yàn)指南,例如來自于單分子FRET群體在基準(zhǔn)研究中的經(jīng)驗(yàn)指南。Luminosa 是一款將超高數(shù)據(jù)質(zhì)量與超簡日常操作相結(jié)合的單光子計(jì)數(shù)共聚焦顯微鏡。它可以輕松集成到任何研究人員的“工具箱”中,成為開始探索使用時(shí)間分辨熒光方法科學(xué)家以及想要突破極限專家的省時(shí)、可靠的“伙伴”。它是一個(gè)真正的顯微鏡系統(tǒng),每個(gè)人都可以依賴。產(chǎn)品特點(diǎn):◆ 全軟件控制共聚焦系統(tǒng),基于倒置顯微鏡◆ 激光波長從375到1064 nm可選◆ VarPSF:觀察量高精度調(diào)節(jié),用于FCS和單分子FRET實(shí)驗(yàn)◆ 電動(dòng)平移臺(tái),可在傳動(dòng)和FLIM模式下進(jìn)行“圖像拼接”◆ 掃描選項(xiàng):FLIMbee振鏡掃描和壓電物鏡掃描◆ 最多可集成SPAD, PMT或Hybrid-PMT組成相互獨(dú)立的6通道探測(cè)單元◆
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2022-06-23 14:13:21ibidi科普知識(shí)系列|血管生成實(shí)驗(yàn)小常識(shí)
  1、哪種細(xì)胞密度最適合我的實(shí)驗(yàn)?    通常,我們建議每孔使用5,000-10,000個(gè)HUVEC。 但是,確定最佳細(xì)胞數(shù)對(duì)于使用μ-Slide血管生成從管形成測(cè)定中獲得最佳結(jié)果是至關(guān)重要。 細(xì)胞密度取決于細(xì)胞類型和細(xì)胞大小。 因此,在開始實(shí)際實(shí)驗(yàn)之前,我們建議在非抑制條件下播種幾個(gè)細(xì)胞數(shù)并對(duì)管形成進(jìn)行成像。 然后,對(duì)于最佳測(cè)定條件,使用在您的實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生最多管數(shù)的細(xì)胞密度。請(qǐng)記住,細(xì)胞通常不會(huì)在凝膠基質(zhì)上增殖。請(qǐng)參閱:血管生成實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)裝置優(yōu)化和數(shù)據(jù)分析 |ibidi μ-Slide    2、應(yīng)該在哪個(gè)時(shí)間段內(nèi)觀察細(xì)胞?    管形成的持續(xù)時(shí)間取決于細(xì)胞類型和所使用的細(xì)胞外基質(zhì),應(yīng)單獨(dú)確定。 通常,HUVEC在 2-4小時(shí)后已經(jīng)形成管。24小時(shí)后細(xì)胞開始發(fā)生凋亡,這導(dǎo)致從基質(zhì)中脫離和管破裂。請(qǐng)參閱:血管生成實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)裝置優(yōu)化和數(shù)據(jù)分析 |ibidi μ-Slide    3、是否需要活細(xì)胞成像裝置來每小時(shí)拍攝管形成測(cè)定的照片?    非必須,通過顯微鏡對(duì) μ-Slide 血管生成上的同一位置進(jìn)行一致和精確的成像。 可以使用顯示 x/y 坐標(biāo)的顯微鏡載物臺(tái)或自動(dòng)載物臺(tái)來完成成像。 使用自動(dòng)化平臺(tái),可以將孔的所有位置(特別是每個(gè)孔的中心)保存到位置列表中,您可以在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)訪問相應(yīng)的位置?!   〉?,使用完整的活細(xì)胞成像設(shè)置在顯微鏡上建立生理?xiàng)l件要方便得多。使用ibidi Stage Top 孵育系統(tǒng)等活細(xì)胞孵育裝置有助于在成像過程中提供穩(wěn)定溫度和濕度條件,從而在體外可以直接進(jìn)行視頻拍攝?!   ?、是否可以使用 μ-Slide 血管生成在凝膠基質(zhì)內(nèi)培養(yǎng)細(xì)胞?    可以,μ-Slide 血管生成非常適合在精確定義的3D基質(zhì)中培養(yǎng)細(xì)胞。由于大界面的凝膠和頂部細(xì)胞培養(yǎng)基,凝膠中的條件可以通過更換上部儲(chǔ)液器中的介質(zhì)來調(diào)整?!   ?、應(yīng)該在管形成實(shí)驗(yàn)中使用含酚紅的凝膠還是不含酚紅的凝膠?    對(duì)于使用μ-Slide血管生成的管形成測(cè)定中的相差顯微鏡,酚紅不會(huì)干擾圖片,并且由于其顏色,處理更容易。然而,當(dāng)使用熒光顯微鏡時(shí),酚紅可能會(huì)干擾探頭的波長。在這種情況下,應(yīng)該使用無酚紅凝膠。    6、是否需要將μ-Slide Angiogenesis血管生成載玻片放入培養(yǎng)箱的濕室中進(jìn)行凝膠聚合?  我們建議將μ-Slide血管生成載玻片放入加濕腔中進(jìn)行凝膠聚合。 雖然反應(yīng)室對(duì)于聚合本身不是必需的,但它可以最大限度地減少蒸發(fā)的影響。 在高流量孵化器中,防止蒸發(fā)的足夠百分比的濕度可能不會(huì)始終保持一致。 μ-Slide血管生成中的少量凝膠會(huì)很快變干,這會(huì)導(dǎo)致彎液面的形成?!   ?、胎牛血清 (FBS) / 胎牛血清 (FCS) 濃度是否會(huì)影響管形成實(shí)驗(yàn)中的管形成和降解速率?    一般是的。 這取決于所使用的細(xì)胞類型或細(xì)胞系。 當(dāng)提供濃度高達(dá) 10% FCS 的細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí),我們?cè)?μ-Slide 血管生成中觀察到典型的原代細(xì)胞 (HUVEC) 管形成和 Matrigel? 上的幾種內(nèi)皮細(xì)胞系。 但是,我們建議分別優(yōu)化每個(gè)細(xì)胞系的 FBS/FCS 濃度。    8、您是否推薦使用減少生長因子的 Matrigel? 進(jìn)行管形成分析?  對(duì)于使用μ-Slide血管生成的管形成測(cè)定,我們使用了減少生長因子的 Matrigel? 和未減少的 Matrigel?。請(qǐng)參閱:腫瘤學(xué)必備 | 血管生成實(shí)驗(yàn)介紹    9、我們希望使用減少了生長因子的 Matrigel? 和無血清培養(yǎng)基以及 50 ng/ml VEGF。 這足以刺激管的形成嗎?    可以,這種組合足以刺激ibidi血管生成實(shí)驗(yàn)室器皿中的管形成,而培養(yǎng)基中沒有任何額外的生長因子。    10、除了 Matrigel? 之外,您在試管形成實(shí)驗(yàn)中是否有使用其他凝膠的經(jīng)驗(yàn)?    原則上,任何凝膠都可用于μ-Slide血管生成管形成實(shí)驗(yàn)。 細(xì)胞可以附著在表面上是很重要的。 膠原蛋白、纖連蛋白和層粘連蛋白為細(xì)胞粘附提供了重要的結(jié)合基序?!   ?1、什么是管形成實(shí)驗(yàn)合適的陽性和陰性對(duì)照?    建議使用陽性和陰性對(duì)照來減少管形成實(shí)驗(yàn)中的變量。陽性對(duì)照是預(yù)期細(xì)胞在其中形成血管的樣本(取決于實(shí)驗(yàn)設(shè)置),從而向研究人員表明該實(shí)驗(yàn)已正確進(jìn)行。陰性對(duì)照是與所有其他樣品以相同方式處理的樣品,但預(yù)計(jì)不會(huì)顯示任何實(shí)驗(yàn)結(jié)果(例如,很少或沒有管形成)?!   bidi血管生成實(shí)驗(yàn)室器皿中管形成實(shí)驗(yàn)的最佳陽性和陰性對(duì)照很大程度上取決于所使用的細(xì)胞、凝膠基質(zhì)和一般實(shí)驗(yàn)設(shè)置。因此,我們建議您查閱文獻(xiàn),了解您感興趣的主題中成功使用的對(duì)照(陽性和陰性對(duì)照)。    在下文中,您可以找到管形成測(cè)定中陽性和陰性對(duì)照的可能方法:    如果需要分析特定化合物誘導(dǎo)血管生成的效力,則可以使用用已知血管生成誘導(dǎo)劑(例如 VEGF 或 FGF2)處理的樣品作為陽性對(duì)照。濃度很大程度上取決于細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)設(shè)置?!   ∪绻褂迷?xì)胞,預(yù)篩選的內(nèi)皮細(xì)胞系(例如,HUVEC)在用特定生長因子處理后表現(xiàn)出明確的反應(yīng),可以作為陽性對(duì)照。    對(duì)于某些細(xì)胞類型,形成管的能力還取決于所使用的凝膠基質(zhì)。作為陽性對(duì)照,內(nèi)皮細(xì)胞應(yīng)在含有饑餓培養(yǎng)基(不含生長因子或血清的培養(yǎng)基)的生長因子減少的 Matrigel?上顯示管形成。如果需要測(cè)試促血管生成物質(zhì),則使用饑餓培養(yǎng)基尤其重要,因?yàn)榇蠖鄶?shù)細(xì)胞培養(yǎng)基都添加了生長因子。為了分析物質(zhì)的真實(shí)效果,基質(zhì)和培養(yǎng)基都必須不含任何生長因子。作為陰性對(duì)照,細(xì)胞可以播種在不同的基質(zhì)(例如膠原蛋白 I)上,預(yù)計(jì)不會(huì)形成管狀?!   〔挥绊懠?xì)胞活力的管形成抑制劑(例如,蘇拉明或蘿卜硫素)可用作陰性對(duì)照。如果實(shí)驗(yàn)的目的是測(cè)試抗血管生成物質(zhì),則使用這種類型的抑制劑尤其重要?!   ∪绻萌魏稳芙獾奈镔|(zhì)(例如,在 DMSO 或乙醇中)處理細(xì)胞,則僅使用溶劑作為陰性對(duì)照。    12、是否有用于分析管形成實(shí)驗(yàn)的推薦染色方案?  一般來說,相差顯微鏡足以自動(dòng)分析 μ-Slide血管生成中的標(biāo)準(zhǔn)管形成實(shí)驗(yàn)。 但是,如果您想研究某種標(biāo)記,您可以應(yīng)用您的標(biāo)準(zhǔn)方案(例如,用于免疫熒光染色),但要小心,以免損壞凝膠基質(zhì)或細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)?!   ∈褂胏alcein的染色方案示例可參閱:腫瘤學(xué)必備 | 血管生成實(shí)驗(yàn)介紹    13、在開始實(shí)驗(yàn)之前,我是否必須將 ibidi 血管生成實(shí)驗(yàn)室器皿平衡到 37°C?    不,不需要平衡 μ-Slide 血管生成。 在室溫下儲(chǔ)存,可以立即用凝膠基質(zhì)填充。 由于μ-Slide 的開孔形式,加熱時(shí)從凝膠中逸出的氣體可以與大氣自由交換?!   ?4、完成實(shí)驗(yàn)后,μ-Slide Angiogenesis和μ-Plate Angiogenesis 96 Well可以重復(fù)使用嗎?    不可以,μ-Slide血管生成載玻片和μ-Plate血管生成96孔板是一次性耗材,僅供一次性使用。    15、μ-Slide 血管生成是否有96孔版的?  有。 μ-Plate血管生成96孔板具有與μ-Slide血管生成相同的“孔中孔”設(shè)計(jì)和凝膠體積 (10 μl)。 μ-Plate血管生成96孔可用作高通量管形成實(shí)驗(yàn)的篩選板,具有完全的ANSI/SLAS (SBS) 和robotics兼容性。
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