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2025-01-21 09:35:14工程細胞株開發(fā): “工程細胞株開發(fā)”是指通過基因編輯、細胞培養(yǎng)等技術手段，對細胞進行改造和優(yōu)化，以滿足特定研究或生產(chǎn)需求的過程。這一過程涉及細胞系的篩選、基因的導入與表達調控、細胞生長特性的優(yōu)化等多個環(huán)節(jié)。工程細胞株在生物制藥、細胞治療、基因治療等領域具有廣泛應用，能夠高效表達目標蛋白或產(chǎn)生特定細胞功能，為疾病治療、藥物研發(fā)等提供重要工具。其開發(fā)需嚴格遵循科學規(guī)范和倫理要求，確保安全性和有效性。

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【直播預告】工程細胞株開發(fā)的關鍵技術應用

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2022-04-26
工程細胞株開發(fā) 細胞株構建的自動化方案單克隆化及單克隆源性鑒定
Vi-CELL BLU細胞計數(shù)儀在工程細胞株開發(fā)中的特點和優(yōu)勢

 貝克曼庫爾特商貿(mào)（中國）有限公司 381
2023-05-25

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工程細胞株開發(fā)問答

2023-05-25 15:24:22Vi-CELL BLU細胞計數(shù)儀在工程細胞株開發(fā)中的特點和優(yōu)勢: 工程細胞株開發(fā)（Cell Line Development: CLD）的主要目的是通過高通量篩選手段獲得數(shù)個高產(chǎn)穩(wěn)定表達的細胞株，為后續(xù)的工藝開發(fā)及優(yōu)化提供基礎。能否構建適合于生產(chǎn)的高表達穩(wěn)定細胞株，將直接影響后期重組蛋白或單克隆蛋白等藥物的開發(fā)效率和生產(chǎn)成本。細胞培養(yǎng)是細胞株開發(fā)的基礎，無論是細胞轉染、高通量克隆篩選、培養(yǎng)基優(yōu)化、還是抗體表達，都需要在細胞培養(yǎng)的基礎上完成細胞生長狀態(tài)的檢測，其中包括活細胞密度（VCD）和活率（Viability）檢測。通過檢測結果將細胞密度和活率達不到要求的細胞排除掉。最終，從數(shù)以千計的克隆細胞中篩選到穩(wěn)定高產(chǎn)的單克隆細胞株。由于要篩選的克隆細胞量很大，對所培養(yǎng)的細胞生長狀態(tài)的檢測，通常需要使用高通量分析設備，有時甚至結合移液工作站來完成自動化檢測。譬如，使用96孔板檢測細胞密度和活率，同時根據(jù)需要可整合自動化移液工作站，從而大大提高篩選分析通量，并實現(xiàn)測試的標準化，減少人為操作誤差，最終使我們能在有限的平臺基礎上實現(xiàn)高產(chǎn)細胞株的篩選。貝克曼庫爾特生命科學的Vi-CELL BLU全自動細胞計數(shù)和活率分析儀就是這樣一款滿足高通量上樣、全自動檢測，并可與自動化移液工作站整合的分析儀器。它具有以下一些優(yōu)點滿足細胞株開發(fā)過程中對克隆細胞的VCD和Viability準確和快速地檢測。96孔板上樣檢測Vi-CELL BLU全自動細胞計數(shù)儀除了可以使用24位轉盤做不間斷檢測外，同時可以采用96孔板進行高通量樣品分析測試（如下圖所示），使用配套的封板膜可以減少檢測過程中樣品的揮發(fā)，防止待測樣品受到外部環(huán)境的污染，對于有生物安全的細胞樣品，也可降低對操作人員的危害風險。Vi-CELL BLU 96孔板檢測照片和移液工作站整合為了解決那些重復操作、通量高、易污染、需要大量人力操作的實驗步驟，如梯度稀釋、細胞培養(yǎng)、細胞換液、高通量篩選、克隆挑選等步驟，從而使得上游更通暢，并保證數(shù)據(jù)的完整性，可以使用貝克曼庫爾特Biomek系列自動化移液工作站來完成這些工作。那細胞計數(shù)和活率分析操作是否也可以整合進來，讓自動化工作站控制完成相關檢測呢？答案是可以的。Vi-CELL BLU細胞計數(shù)儀可通過OPC UA Server和自動化移液工作站實現(xiàn)有效地整合，進一步實現(xiàn)細胞計數(shù)和活率分析檢測的自動化目的，避免無謂的重復實驗操作。Biomek自動化移液工作站整合Vi-CELL BLU細胞計數(shù)儀的彩頁全自動和標準化分析使用96孔板的高通量細胞計數(shù)和活率分析時，可以在Cell Type檢測參數(shù)表中設置染色前的吹打混懸次數(shù)（Aspiration cycles）和染色混合次數(shù)（Mixing cycles），以此讓儀器自動對沉降的細胞吹打均勻。然后，在保證細胞樣品均一性的前提下，吸取等體積臺盼藍吹打完成細胞的均勻染色。最后，再通過Cell Type中的細胞識別參數(shù)，對拍攝得到的細胞進行有效地識別分析。檢測結束后儀器自動對管路清洗，接著儀器自動對下一個樣品進行標準化分析。Cell Type參數(shù)表單個樣品的百圖分析每個細胞樣品按默認Cell Type方法檢測可以得到100張細胞照片，相比于其他細胞計數(shù)儀的拍攝1張、3張或6張照片，同一樣品拍攝100張照片得到的細胞數(shù)更多，因而該細胞計數(shù)方法的系統(tǒng)偏差更小，測試結果的代表性更好。CHO細胞第59張照片（共100張）同一焦平面下的細胞直徑檢測細胞培養(yǎng)過程中平均直徑的監(jiān)測通常會被忽略，同時這也是一個不太容易被細胞計數(shù)儀檢測準確的參數(shù)，但這個直徑參數(shù)有時影響會很大。在細胞轉染病毒或質粒后，一般細胞平均直徑會發(fā)生變化。有客戶發(fā)現(xiàn)在Fed-Batch培養(yǎng)過程中細胞平均直徑有時會過大，從而可能因為不耐受培養(yǎng)過程中的剪切力，最終導致Peak-VCD相對其他細胞更低。Vi-CELL BLU全自動細胞計數(shù)儀通過使用聚焦質控品完成自動對焦（如下圖所示），之后細胞樣品檢測都在同一焦平面下完成。然后通過檢測L10粒徑質控標樣的平均粒徑結果是否在標稱值±10%范圍內，以此判斷自動對焦好壞。同時，可把L10粒徑質控品作為質量控制標樣，定期監(jiān)測儀器對焦狀態(tài)是否正常，以此保證所有的細胞樣品都是在同一焦平面下檢測，提高細胞平均直徑檢測的準確性。聚焦質控品和儀器自動對焦示意圖同一個CHO細胞三次測試結果（考察細胞密度、活率和直徑的重復性）若您希望更多地了解Vi-CELL BLU全自動細胞計數(shù)和活率分析儀，請撥打400-821-8935和我們聯(lián)系。*本產(chǎn)品僅供工業(yè)和科研使用，不用于臨床診斷

2023-01-14 16:41:53如何提高細胞計數(shù)測試的準確性，及細胞計數(shù)儀在高產(chǎn)穩(wěn)定CHO細胞株開發(fā)中的應用回顧: 01如何提高細胞計數(shù)和活率分析的準確性？姚金龍貝克曼庫爾特高級應用專員講座簡介：在各種細胞計數(shù)和活率分析方法中，臺盼藍染色細胞計數(shù)無疑是細胞活率分析的金標準。目前，通過臺盼藍染色分析細胞活率的方法包括：傳統(tǒng)的光學顯微鏡+血球計數(shù)板法，也有市場上很普遍的插片式半自動細胞計數(shù)儀，以及無需手動混勻和染色的全自動細胞計數(shù)和活率分析儀。其中，后兩個分析儀器的出現(xiàn)，不僅很大程度地解放了人力，同時相比于顯微鏡+血球計數(shù)板法會更省時，更合規(guī)，所以被各大制藥企業(yè)所使用。而全自動細胞計數(shù)和活率分析儀更是在工藝開發(fā)和生產(chǎn)質控方面表現(xiàn)出特有的優(yōu)勢，即減少了人為的樣品吹打混勻和臺盼藍染色操作誤差，而且每種細胞標準化的測試條件，提高了儀器間數(shù)據(jù)的一致性而廣受歡迎。但是大家在使用這些儀器一段時間后，可能會遇到這樣一些問題，譬如：自動細胞計數(shù)儀的測試結果為何有時和血球計數(shù)板的結果對不上，我該相信哪一個？細胞計數(shù)儀測試標樣沒有問題，但一檢測細胞怎么就不行了呢？為何同樣都是CHO細胞，同事測試結果是符合預期的，我的為何就不行呢？以上問題其實歸結一下都是我們測試結果的準確性的問題，如何減小測試方法的人為誤差？如何提高我們使用的細胞計數(shù)和活率分析儀的測試結果的準確性？這些問題都將在此次講座中和大家一起來探討交流。02高產(chǎn)穩(wěn)定CHO細胞株構建策略劉玉梅上海復宏漢霖生物醫(yī)藥有限公司高級研究員講座簡介：探討影響穩(wěn)定細胞株構建要素，包括載體，宿主細胞等?；谄脚_優(yōu)化篩選方式，在stable pool基礎上結合高通量技術進行穩(wěn)定細胞株篩選，分享快速開發(fā)案例，實現(xiàn)快速、高效、穩(wěn)定細胞株篩選。

2024-11-01 11:40:17凝膠色譜儀有什么用處？工程原理是什么？: 凝膠色譜儀是一種重要的實驗室設備，廣泛應用于生物化學和分子生物學研究。其主要作用在于分離和分析生物大分子，如蛋白質和核酸。通過凝膠色譜技術，科研人員能夠更好地了解樣品的組成及其特性，為后續(xù)研究和應用提供可靠的數(shù)據(jù)支持。本文將深入探討凝膠色譜儀的主要用途及其在不同領域的重要性。凝膠色譜儀在蛋白質分離中的應用尤為顯著。通過調節(jié)凝膠的孔徑，科研人員可以根據(jù)分子大小和形狀對蛋白質進行有效分離。這一過程不僅有助于純化目標蛋白，還能為進一步的功能分析和結構研究提供必要的樣品。凝膠色譜還常與其他技術結合使用，如質譜和電泳，以實現(xiàn)更高的分辨率和準確性。凝膠色譜儀在核酸分析中的作用同樣不可忽視。在基因克隆、擴增及測序等實驗中，凝膠色譜用于分離不同長度的DNA片段。這對于評估PCR擴增效果、檢測基因突變以及進行基因組測序都具有重要意義。通過對DNA片段的有效分離，研究人員能夠獲得清晰的條帶，從而推斷出樣品的具體信息。凝膠色譜儀在藥物研發(fā)和生產(chǎn)中也發(fā)揮著重要作用。在新藥開發(fā)過程中，藥物的純度和穩(wěn)定性至關重要。凝膠色譜技術能夠幫助研究人員在早期篩選中快速識別并分離出有效成分，提高研發(fā)效率。該技術也在生物制藥行業(yè)中得到廣泛應用，用于監(jiān)測產(chǎn)品的一致性和質量。再者，凝膠色譜儀在環(huán)境監(jiān)測和食品安全檢測中的應用逐漸受到重視。在環(huán)境科學領域，研究人員利用凝膠色譜分析水樣和土壤樣本中的污染物，幫助評估環(huán)境質量。在食品安全檢測方面，該技術可用于檢測食品中的添加劑和污染物，確保公眾健康與安全。隨著科技的進步，凝膠色譜儀的功能不斷擴展?，F(xiàn)代化的儀器配備了自動化和高通量技術，使得分離和分析過程更加高效和。這一進展不僅提高了實驗室的工作效率，也為大規(guī)模篩選和分析提供了新的可能性。凝膠色譜儀在科研、藥物研發(fā)、環(huán)境監(jiān)測及食品安全等領域的應用極為廣泛，其重要性不容小覷。隨著技術的不斷發(fā)展，凝膠色譜將繼續(xù)在各類生物及化學分析中發(fā)揮不可替代的作用，為科學研究與實際應用提供強有力的支持。

2022-12-07 12:03:22加速色譜分析方法開發(fā)與驗證: 近年來USP和ICH都針對分析方法開發(fā)與驗證進行了修訂。USP新收錄通則分析方法生命周期已于2022年5月1日生效，分別從分析方法開發(fā)、分析方法性能確認及分析方法使用三個階段分別闡述如何在分析方法整個生命周期內對方法進行管理。而ICH Q14分析方法開發(fā)和Q2(R2) 分析方法驗證的修訂也進入到了第三階段，按照計劃其將在2023年5月前完成階段的定稿。這些信息都表明了分析方法開發(fā)和驗證的管理將會變得更嚴謹、更科學。因為色譜儀器包括色譜-質譜聯(lián)用技術在藥物開發(fā)過程中的廣泛使用，色譜分析方法的開發(fā)與驗證也成為了方法開發(fā)與驗證，乃至分析方法生命周期管理中的重要內容。針對色譜方法開發(fā)與驗證的整體流程，可以將其大致分為：方法篩選、方法優(yōu)化、耐用性測試和完整的方法驗證這四個階段。而這四個階段都離不開儀器準備、隊列運行、數(shù)據(jù)查看與處理以及報告這幾個環(huán)節(jié)。賽默飛的旗艦版色譜數(shù)據(jù)系統(tǒng)Chromeleon 軟件功能豐富而注重實踐，能夠幫助實驗室的色譜分析實現(xiàn)精簡、高效的工作流，以實現(xiàn)更快的樣品到結果的轉換。自定義變量的靈活應用在Chromeleon CDS 中創(chuàng)建隊列時可以通過手工填寫的傳統(tǒng)方式，也可基于事先建好的隊列模板。值得一提的是Chromeleon 強大的樣品列表功能。除了運行樣品的基本信息（樣品名稱、儀器方法、運行的其他必須參數(shù)）之外，還可以通過自定義變量的形式，添加額外的注釋信息，例如色譜柱類型、緩沖液名稱等用于清晰識別每一針進樣的信息。使用者還可以進一步創(chuàng)建一些自定義變量并將其與儀器方法中的參數(shù)進行鏈接，更加簡單地實現(xiàn)實驗設計（DoE）的環(huán)節(jié)。一旦基本方法固定，便可通過改變色譜柱選擇閥或溶劑選擇閥等參數(shù)實現(xiàn)不同要素的組合以尋找具備可行性的色譜條件，也體現(xiàn)了ICH和USP所倡導的“多變量分析方法開發(fā)”這一方針。相比傳統(tǒng)的樣品隊列創(chuàng)建方式，減少了所需創(chuàng)建的儀器方法的數(shù)量，并以清晰直觀的模式展示了所使用的變量以及變量值，結合縮略圖功能提供了更直觀的信息。在數(shù)據(jù)處理階段，可以再次利用Chromeleon 樣品列表中的自定義結果變量功能，可以方便地實現(xiàn)運行樣品的同時進行結果計算，例如系統(tǒng)適用性參數(shù)的計算，峰面積、含量以及測試是否通過等信息的顯示，幫助使用者快速查看所需信息以便靈活調整實驗的方向。完全可定制的Chromeleon報告模板也支持自定義變量、公式和計算，使用者可以使用內置的模板，也可以根據(jù)需要進行調整，得到包括多個工作表、結果表和圖形的報告，無需導出到其他軟件，也無需手動計算，從而消除轉錄錯誤。所有報告和計算都可以在合規(guī)的環(huán)境中完成，并在源數(shù)據(jù)發(fā)生變化時自動更新。可以選擇在運行結束時自動打印、導出也可以發(fā)送電子郵件通知給相關人員。更便捷的eWorkflowChromeleon 也提供一個創(chuàng)建序列、運行并得到結果的簡單而直接的方法，這就是eWorkflow。它最大限度地減少了操作步驟并涵蓋了色譜或 MS 工作流程的所有方面，定義了可以在哪些儀器上運行分析以及應該使用哪些方法和文件，包括儀器方法、處理方法、報告和外部文件，例如 SOP。與前面提到的自定義變量等有效結合，只需單擊幾下即可創(chuàng)建復雜的序列并立即運行，并在運行后得到所需的報告。這些都可以減少錯誤、更快地產(chǎn)生可靠的結果，并且顯著減少了培訓的需求，有效加速了方法開發(fā)的流程。分析方法驗證工具包ICH指南定義了方法驗證應該執(zhí)行包括專屬性、準確度、精密度、檢測和定量限度、線性、范圍和耐用性的測試。除了樣品運行的環(huán)節(jié)之外，計算、整理和報告驗證結果也可能需要很長的時間，而且大多數(shù)測試都涉及將結果與指標進行比較，相對比較繁瑣。在eWorkflow的基礎上，Chromeleon 又提供了一個方法驗證的高效工具，ICH方法驗證擴展包。擴展包內有一系列的模板，每個模板都包含處理方法、報告模板和自定義變量以覆蓋所需的變量和參數(shù)。所有這些都在 eWorkflow 程序中捆綁在一起，以確保正確執(zhí)行ICH所要求的相關測試，減少人為錯誤并加速流程：eWorkflow 可以引導創(chuàng)建隊列，自動執(zhí)行所有計算，并通過報告直接顯示通過或失敗的結論。以上介紹的幾個工具僅為Chromeleon 強大功能的冰山一角。結合Chromeleon 實用的多廠商儀器控制能力，出色的系統(tǒng)適用性和智能運行控制功能，便捷的數(shù)據(jù)積分、處理功能，直觀的圖形化顯示，全面的合規(guī)能力，Chromeleon不但可以提升方法開發(fā)、驗證的效率，也一定能夠幫助色譜工作者執(zhí)行分析方法生命周期的管理。

2023-03-28 13:42:29線上直播 | 鋰離子電池開發(fā)挑戰(zhàn)及應對策略: 阿美特克集團攜手旗下8大品牌，7位鋰電行業(yè)專家，在陽春3月為大家?guī)礓囯x子電池專場線上直播，針對鋰電行業(yè)痛點，提出解決方案。主題：《鋰離子電池開發(fā)挑戰(zhàn)及應對策略》第一場：3月22日 - 鋰離子電池關鍵材料成份、物理及電化學性能測試(14:00-16:00)第二場：3月29日- 鋰離子電池電芯包裝阻隔性檢測/電池包連接件/電池裝配的質量控制(14:00-15:30)　直播福利：隨機抽取 20 名幸運觀眾，送《鋰電池基礎科學》或者《鈉離子電池科學與技術》識別二維碼，免費報名