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2025-01-10 17:02:33單細胞等離激元免疫夾心法: “單細胞等離激元免疫夾心法”是一種前沿的生物檢測技術(shù)，它結(jié)合了等離激元效應與免疫夾心法的原理，實現(xiàn)了對單細胞水平上的生物分子高靈敏、高特異性的檢測。該技術(shù)通過等離激元納米結(jié)構(gòu)增強光學信號，使得目標分子在單細胞層面上的微小變化得以放大并準確識別。免疫夾心法則確保了目標分子的特異性捕獲與檢測，提高了實驗的準確性和可靠性。該方法在生物醫(yī)學研究、疾病診斷與治療監(jiān)測等領(lǐng)域具有廣闊的應用前景。

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單細胞等離激元免疫夾心法資訊

Nat. Protoc. 南京大學劉震教授團隊實現(xiàn)單個活細胞內(nèi)低拷貝數(shù)蛋白質(zhì)的分析 | 前沿用戶報道

HORIBA XploRA INV多功能拉曼成像光譜儀集成研究級倒置顯微鏡，專為生命科學研究而設計。

HORIBA（中國） 613
2022-07-16
單細胞等離激元免疫夾心法免疫識別等離激元拉曼檢測技術(shù)

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單細胞等離激元免疫夾心法問答

2023-03-07 22:09:15高通量單細胞力譜測定！多功能單細胞顯微操作技術(shù)助力單細胞力學研究: 單程細胞具有復雜生物學性質(zhì)，它們通過細胞外基質(zhì)ECM形成緊密的細胞與基質(zhì)細胞與細胞連接，諸如上皮細胞通過這種特殊的鏈接方式構(gòu)成了屏障層保護人體免受外界損傷。因此細胞之間以及細胞基底的粘附力測定對于研究細胞粘附蛋白的機制有著重要意義。使用力學工具測量細胞間以及細胞與基質(zhì)之間的粘附力始終不是一件容易的事情。首先，由于細胞與基質(zhì)的作用力僅為nN級別，因此需要力學精度較高的設備才能夠測量，而且在這其中較為適合的工具為原子力顯微鏡（AFM）。原子力顯微鏡能夠提供納米級別的操作精度并可測量從pN~nN范圍的力譜。但是受制于AFM探針本身的限制，需要借助修飾手段才能夠讓細胞與探針固定到一起，這個過程十分繁瑣，并且由于需要大量手工操作很難實現(xiàn)高通量的測量。而不同的細胞由于細胞異質(zhì)性使得要想確定粘附力需要較多樣本才能獲得相對準確的值，無法實現(xiàn)高通量測量直接限制了原子力探針在細胞粘附力上的應用。而多功能單細胞顯微操作FluidFM技術(shù)的出現(xiàn)改變了這一現(xiàn)狀，它使用特殊的中空探針能夠輕松地通過負壓抓取細胞，取得和AFM近似精度的數(shù)據(jù)，無需在探針上進行任何修飾，不會改變細胞表面的任何通路，從而能夠得到接近細胞原生的數(shù)據(jù)。在實驗結(jié)束后能夠通過正壓快速丟棄用過的細胞，具備很高的自動化，能夠快速測量細胞粘附力。使用FluidFM對細胞操作的基本流程 FluidFM在粘附力測量上具備顯著優(yōu)勢。如圖所示，F(xiàn)luidFM能夠通過負壓將細胞吸附到原子力探針的末端，通過高精度位移臺的控制將細胞從基底上分離，并且同時記錄FD曲線。通過FD曲線能夠獲得最大粘附力Fmax和粘附能量Emax。通過高度自動化的控制系統(tǒng)能夠在短時間內(nèi)測量大量細胞粘附力，評估細胞群體分布以及細胞間差異，并且可有效避免傳統(tǒng)粘附力測量因準備時間過長而錯過最佳測量時間導致的細胞粘附力改變，得到更為精準的結(jié)果。近期，Agoston等人使用多功能單細胞顯微操作系統(tǒng)FluidFM實現(xiàn)了高通量細胞粘附力測量，對同種細胞不同區(qū)以及不同細胞之間的粘附力進行測量和比較。作者首先對Vero和Hela細胞在不同狀態(tài)下的粘附力進行了測量和比較，總共測量了214個細胞。通過比較明膠涂層上處于單個細胞、孤島狀細胞、致密連接細胞以及單層細胞上游離細胞之間的粘附力，能夠明顯觀測到Vero細胞處于致密連接的細胞粘附力最大，大概在750 nN左右，隨著細胞單細胞層的稀疏，細胞粘附力有所下降，而處于細胞層頂部的細胞粘附力最低僅為50 nN左右。這一點充分說明上皮細胞能夠在細胞之間形成緊密的連接，而處于細胞層外的細胞則幾乎沒有粘附力。而對于HeLa這樣的腫瘤細胞測量的結(jié)果卻顯示出了截然不同的結(jié)果，處于不同狀態(tài)的細胞有著近似的粘附力，基本都在200 nN左右，這與處于單個游離上皮細胞的粘附力十分接近，表明HeLa細胞在不同環(huán)境下仍然具有較高遷徙能力。使用FluidFM對不同區(qū)域細胞的FD曲線測定結(jié)果和對比通過對這兩種細胞的最大粘附力、最大粘附能量、最大拉伸距離和細胞接觸面積進行統(tǒng)計分析可以發(fā)現(xiàn)，HeLa腫瘤細胞在粘附力和粘附能量上均有所降低，但是當HeLa細胞形成了單層后，兩者區(qū)別不大。對比Hela和Vero在不同生長狀態(tài)下的最大粘附力、最大粘附能量、粘附拉伸距離和粘附面積。再進一步對Vero與HeLa細胞最大粘附力與距離和接觸面積進行對比，依然可以得到與單獨比較粘附力相同的結(jié)果，并且最大能量與細胞接觸面積的比值中也存在著類似的結(jié)果。由此可見腫瘤細胞通過降低自身粘附力從而獲得了更好的遷移能力。對不同狀態(tài)Vero和A549之間的粘附力/粘附距離、粘附力/粘附面積、粘附能量/粘附面積總結(jié) 細胞粘附力測定在細胞生命科學研究中起著至關(guān)重要的作用，然而傳統(tǒng)手段中有著各種各樣的局限性，主要原因是缺乏一種有效抓取細胞并進行力學測定的手段?，F(xiàn)如今FluidFM技術(shù)在細胞粘附力測定中的應用，使得研究者們有了一種能夠有效、低損的方式抓取細胞，配合原子力顯微鏡精確測量的特性，真正意義上做到精準、無損、快速的測量單細胞粘附力，幫助研究者尋找細胞粘附力與細胞生命發(fā)展、腫瘤細胞轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系。【參考文獻】[1] A. Sancho, M. B. Taskin, L. Wistlich, P. Stahlhut, K. Wittmann, A. Rossi & J. Groll. Cell Adhesion Assessment Reveals a Higher Force per Contact Area on Fibrous Structures Compared to Flat Surfaces. ACS Biomater. Sci. Eng. 2022, 8, 2, 649–658.[2] P.W. Doll, K. Doll, A. Winkel, R. Thelen, R. Ahrens, M. Stiesch & A.E. Guber. Influence of the Available Surface Area and Cell Elasticity on Bacterial Adhesion Forces on Highly Ordered Silicon Nanopillars. ACS Omega. 2022, 7, 21, 17620–17631.[3] Sankaran, S. Jaatinen, L. Brinkmann, J. Zambelli, T. V?r?s, J. Jonkheijm, P. Cell adhesion on dynamic supramolecular surfaces probed by fluid force microscopy-based single-cell force spectroscopy. ACS Nano 2017, 11, 3867–3874.[4] Sancho, A. Vandersmissen, I. Craps, S. Luttun, A. Groll, J. A new strategy to measure intercellular adhesion forces in mature cell-cell contacts. Sci. Rep. 2017, 7, 46152.[5] Ines, Lüchtefeld. Alice, Bartolozzi. Julián M. M. Oana, Dobre. Michele, Basso. Tomaso, Zambelli. Massimo, Vassalli. Elasticity spectra as a tool to investigate actin cortex mechanics. J Nanobiotechnol. 2020, 18, 147.[6] Dehullu, J. Valotteau, C. Herman-Bausier, P. Garcia-Sherman, M. Mittelviefhaus, M. Vorholt, J. A. Lipke, P. N. Dufrene, Y. F. Fluidic force microscopy demonstrates that homophilic adhesion by Candida albicans Als proteins is mediated by amyloid bonds between cells. Nano Lett. 2019, 19, 3846–3853.[7] Mittelviefhaus, M. Müller, D. B. Zambelli, T. Vorholt, J. A. A modular atomic force microscopy approach reveals a large range of hydrophobic adhesion forces among bacterial members of the leaf microbiota. ISME J. 2019, 13, 1878–1882.[8] F. Weigl, C. Blum, A. Sancho & J. Groll. Correlative Analysis of Intra- versus Extracellular Cell Detachment Events vis the Alignment of Optical Imaging and Detachment Force Quantification. Adv. Mater. Technol. 2022, 2200195.【相關(guān)產(chǎn)品】　　多功能單細胞顯微操作系統(tǒng)- FluidFM OMNIUM:http://m.sdczts.cn/zt2203/product_386418.html

2023-04-10 14:46:44安心離

2023-02-24 11:28:18高通量、自動化單細胞力譜測定！多功能單細胞顯微操作全新技術(shù)助力單細胞力學研究: 研究現(xiàn)狀單程細胞具有復雜生物學性質(zhì)，它們通過細胞外基質(zhì)ECM形成緊密的細胞與基質(zhì)細胞與細胞連接，諸如上皮細胞通過這種特殊的鏈接方式構(gòu)成了屏障層保護人體免受外界損傷。因此細胞之間以及細胞基底的粘附力測定對于研究細胞粘附蛋白的機制有著重要意義。使用力學工具測量細胞間以及細胞與基質(zhì)之間的粘附力始終不是一件容易的事情。首先，由于細胞與基質(zhì)的作用力僅為nN級別，因此需要力學精度較高的設備才能夠測量，而且在這其中較為適合的工具為原子力顯微鏡（AFM）。原子力顯微鏡能夠提供納米級別的操作精度并可測量從pN~nN范圍的力譜。但是受制于AFM探針本身的限制，需要借助修飾手段才能夠讓細胞與探針固定到一起，這個過程十分繁瑣，并且由于需要大量手工操作很難實現(xiàn)高通量的測量。而不同的細胞由于細胞異質(zhì)性使得要想確定粘附力需要較多樣本才能獲得相對準確的值，無法實現(xiàn)高通量測量直接限制了原子力探針在細胞粘附力上的應用。多功能單細胞顯微操作FluidFM技術(shù)多功能單細胞顯微操作FluidFM技術(shù)的出現(xiàn)改變了這一現(xiàn)狀，它使用特殊的中空探針能夠輕松地通過負壓抓取細胞，取得和AFM近似精度的數(shù)據(jù)，無需在探針上進行任何修飾，不會改變細胞表面的任何通路，從而能夠得到接近細胞原生的數(shù)據(jù)。在實驗結(jié)束后能夠通過正壓快速丟棄用過的細胞，具備很高的自動化，能夠快速測量細胞粘附力。使用FluidFM對細胞操作的基本流程FluidFM在粘附力測量上具備顯著優(yōu)勢。如圖所示，F(xiàn)luidFM能夠通過負壓將細胞吸附到原子力探針的末端，通過高精度位移臺的控制將細胞從基底上分離，并且同時記錄FD曲線。通過FD曲線能夠獲得最大粘附力Fmax和粘附能量Emax。通過高度自動化的控制系統(tǒng)能夠在短時間內(nèi)測量大量細胞粘附力，評估細胞群體分布以及細胞間差異，并且可有效避免傳統(tǒng)粘附力測量因準備時間過長而錯過最佳測量時間導致的細胞粘附力改變，得到更為精準的結(jié)果。

2021-03-03 11:49:05大咖云集·學術(shù)薈萃丨電子、光子和等離激元2021國際在線研討會: 線上會議時間：2021年3月10日—12日會議摘要掃描近場光學顯微鏡（SNOM）和電子-能量損失光譜（EELS）是用于研究固體物質(zhì)與分子各種時空特征激發(fā)的強大技術(shù)，等離基元是其中一個非常重要的研究方向。盡管這兩種技術(shù)分別使用電子和光子作為探針粒子來獲取類似的信息，但這兩項技術(shù)在作用機理的本質(zhì)上可能是截然不同的。在本次國際研討會中，我們將邀請來自國際多所著名高校的學者，分享Nature、Science等期刊ZX科研進展，就SNOM和EELS兩項探測方法進行學術(shù)交流，并討論其可能的共同點與交叉領(lǐng)域。注冊報名您可通過掃描下方二維碼或點擊此處報名注冊參與《電子、光子和等離激元2021國際在線研討會》。會議特邀報告Dimitri Basov (Columbia University, USA) March 11 at 15:00Live from New York: Polaritons in van der Waals Materials Rainer Hillenbrand (nanoGUNE Donostia-San Sebastian, Spain) March 11 at 15:40Nanophotonics with phonon polaritons in 2D materials Fritz Keilmann (LMU Munich, Germany) March 10 at 16:40Infrared near-field nanospectroscopy of living cells Frank Koppens (ICFO Barcelona, Spain) March 10 at 16:15Infrared and THz near-field imaging of twisted 2D materials and polaritonic nanocavities Alex McLeod (Columbia University, USA) March 12 at 16:15Revealing nano-plasmonics in 2D materials and correlated oxides at variable temperatures Thomas Taubner (RWTH Aachen, Germany) March 11 at 17:40Phonon-enhanced infrared near-field spectroscopy enables probing of the buried 2DEG at the LAO/STO interface Yixi Zhou (University of Geneva, Switzerland) March 11 at 18:05Cryo-SNOM studies of polaritons at oxide interfaces 會議程序EPP-2021 Program (March 10-12, 2021), updated 25.02.2021March 10 (Wednesday)ChairmanTime (CET)Speaker Title14:50OpeningBrett Barwick15:00Giovanni VanacoreTutorial and overview: Whe n electr ons meet light: a new route for dyn amic visualizati on of plasm ons and cohere nt con trol of matter waves15:40Mathieu KociakNanooptics with fast electron beams16:05BreakJoshua Caldwell16:15Frank KoppensInfrared and THz near-field imaging of twisted 2D materials and polaritonic nanocavities16:40Fritz KeilmannInfrared near-field nanospectroscopy of living cells17:05Misha FoglerScanning Photocurrent Nanoscopy of Van der Waals Heterostructures17:30BreakAlexandre Zimmers17:40Dirk van der MarelPlasmons in strongly correlated matter18:05Peter AbbamonteCoherent and incoherent collective excitations at the Fermi liquid--strange metal crossover in Sr2RuO418:30Discussions19:15PostersMarch 11 (Thursday)ChairmanTimeSpeakerTitleErik van Heumen15:00Dimitri BasovTutorial and overview: Live from New York: Polarit ons in van der Waals Materials15:40Rainer HillenbrandNanophotonics with phonon polaritons in 2D materials16:05BreakAlbert Polman16:15Matteo MitranoDynamical control of effective interactions in quantum materials16:40Regina CiancioUnveiling the role of oxygen vacancies in structural and functional properties of complex oxides thin films by atomic site HAADF-STEM and EELS17:05Francesco MauriMeasuring phonon dispersion suspended 2D nanostructures in the electron microscope17:30BreakChristian Bernhard17:40Thomas TaubnerPhonon-enhanced infrared near-field spectroscopy enables probing of the buried 2DEG at the LAO/STO interface18:05Yixi ZhouCryo-SNOM studies of polaritons at oxide interfaces18:30Discussions19:15PostersMarch 12 (Friday)ChairmanTimeSpeakerTitleMichele Ortolani15:00Javier Garcia de AbajoTutorial and overview: Optical Excitations with Free Electrons: Challenges and Opportunities15:40Claus RopersProbing and tailoring electron-light interactions in ultrafast transmission electron microscopy16:05BreakMengkun Liu16:15Alex McLeodRevealing nano-plasmonics in 2D materials and correlated oxides at variable temperatures16:40Marco PoliniSNOM and plasmon-magnon interactions in 2D magnetic materials17:05Tetiana SlipchenkoNear-field plasmonic phenomena in doped and charge-neutral graphene17:30BreakJose Lorenzana17:40Ido KaminerFree-electron quantum optics18:05Angel RubioNovel phenomena in two dimensional heterostructure from strongly interacting light-matter hybrids18:30Discussions19:15Posters20:00Closing