1.實驗?zāi)康? 據(jù)標(biāo)準(zhǔn)GB/T 14931.1-94測定畜禽肉中土霉素四環(huán)素金霉素殘留量Zdi檢出濃度為：0.15，0.20，0.65mg/kg 2.試驗原理 樣品經(jīng)提取，微孔濾膜過濾后直接進(jìn)樣，用反相色譜分離，紫外檢測器檢測，與標(biāo)準(zhǔn)比較定量，出峰順序為土霉素四環(huán)素金霉素標(biāo)準(zhǔn)加法定量 3.試劑 3.1乙腈(分析純) 3.20.01 mol/L磷酸二氫鈉溶液：稱取1.56 g(±0.01g)磷酸二氫鈉(NaH2PH4.2H2O)溶于蒸餾水中，定容到100 mL，經(jīng)過濾器過濾（選用微孔濾膜為0.45 m），備用 3.3土霉素(OTC)標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取土霉素0.0100g(±0.0001g)，用0.1mol/L鹽酸溶液每毫升含土霉素1mg 3.4四環(huán)素(TC)標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取四環(huán)素0.0100g(±0.001g)，用0.01 mol/L鹽酸溶液溶解并定容10.00 mL，此溶液每毫升含四環(huán)素1mg 3.5金霉素(CTC)標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取金霉素0.0100g(±0.0001g)，溶于蒸餾水并定容成10.00mL，此溶液每毫升含金霉素1mg以上標(biāo)準(zhǔn)品均按1000單位/mg折算3.3～3.5溶液應(yīng)于4以下保存，可使用1周 3.6混合標(biāo)準(zhǔn)溶液：取3.33.4標(biāo)準(zhǔn)溶液各1.00 mL，取3.5標(biāo)準(zhǔn)溶液2.00 mL，置于10mL容量瓶中，加蒸餾水至刻度此溶液每毫升含土霉素四環(huán)素各0.1mg，金霉素0.2mg，臨時現(xiàn)配 3.75％高氯酸溶液 4.儀器 4.1 GX液相色譜儀(HPLC)：具紫外檢測器 4.2 振蕩器：天津市恒奧科技發(fā)展有限公司 4.3 過濾器：天津市恒奧科技發(fā)展有限公司 4.4 超聲波：天津市恒奧科技發(fā)展有限公司 5.色譜條件 5.1柱：ODS-C18 (5 m)6.2mm×15 cm 5.2檢測波長：355 nm 5.3靈敏度：0.002 AUFS 5.4柱溫：室溫 5.5流速：1.0mL/min 5.6進(jìn)樣量：10 L 5.7流動相：乙腈/0.01 mol/L磷酸二氫鈉溶液(用30％(V/V)硝酸溶液調(diào)節(jié)pH2.5)，35：65(V/V)，使用前用超聲波脫氣10 min 6.操作方法 6.1樣品測定：稱取5.00 g(±0.01 g)切碎的肉樣(＜5 mm)，置于50 mL錐形燒瓶中，加入5％高氯酸25.0mL，于振蕩器上振蕩提取10 min，移入到離心管中，以2000 r/min離心3min，取上清液經(jīng)0.45m濾膜過濾，取溶液10L進(jìn)樣，記錄峰高，從工作曲線上查得含量 6.2工作曲線：分別稱取7份切碎的肉樣，每份5.00 g(±0.01 g)，分別加入混合標(biāo)準(zhǔn)溶液02550100150200250 L(含土霉素四環(huán)素各為02.55.010.015.020.025.0 g， 含金霉素05.010.020.030.040.050.0 g)， 按6.1方法操作，以峰高為縱坐標(biāo)，以抗生素含量為橫坐標(biāo)，繪制工作曲線 恒奧HU 6150D數(shù)控超聲波清洗器