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儀器網(wǎng)/ 應用方案/ 人白介素-12植物表達載體的構(gòu)建

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構(gòu)建人白介素12(hIL12)基因的植物表達載體. 方法： 采用PCR技術(shù)從質(zhì)粒pCA13hIL12中擴增hIL12基因，SmaI， SacI分別酶切hIL12基因和植物表達載體pBI121，回收，T4DNA連接酶連接得到重組質(zhì)粒pBI121hIL12，雙酶切和DNA測序鑒定后，通過三親雜交法將表達載體pBI121hIL12分別導入根癌農(nóng)桿菌EHA105和GV3101，用PCR法進行鑒定. 結(jié)果： 雙酶切及DNA序列測定證實hIL12已插入到表達載體pBI121中，PCR 擴增表明構(gòu)建的重組表達載體pBI121hIL12成功轉(zhuǎn)入根癌農(nóng)桿菌EHA105和GV3101中. 結(jié)論： 成功構(gòu)建了植物表達載體pBI121hIL12，為進一步利用轉(zhuǎn)基因植物生產(chǎn)hIL12奠定了實驗基礎.

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