關(guān)鍵詞:

新型冠狀病毒；核酸提取；逆轉(zhuǎn)錄PCR；內(nèi)標(biāo)

引言：

新型冠狀病毒（severeacuterespiratorysyndromecoronavirus2,SARS-CoV-2）引起的新型冠狀病毒肺炎（coronavirusdisease,COVID-19）繼續(xù)在全世界肆虐。WHO報道，截至2020年6月1日11：11am，全世界確診病例6040609例，死亡病例230104例。對SARS-CoV-2進(jìn)行核酸檢測，是WHO目前推薦的識別感染病例的方法。李克強總理主持召開中yang應(yīng)對新冠肺炎疫情工作領(lǐng)導(dǎo)小組會議提出：提高新冠病毒核酸檢測能力，加快快速便捷檢測試劑和設(shè)備研發(fā)生產(chǎn)，縮短檢測時間，推進(jìn)重dian人群“應(yīng)檢盡檢”、其他人群“愿檢盡檢”，推動各地互通互認(rèn)檢測結(jié)果，促進(jìn)精zhun防控、人員流動和全面復(fù)工復(fù)產(chǎn)。

深圳市寶安中醫(yī)院（集團）檢驗科PCR實驗室自2020年3月10日開始SARS-CoV-2的核酸檢測工作，截至2020年5月11日，共檢測19522份標(biāo)本。采用中山大學(xué)達(dá)安生物有限公司生產(chǎn)的“新型冠狀病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）”，試劑盒采用的內(nèi)標(biāo)（IC）為人類RNaseP基因（RP）。在實驗工作中，經(jīng)常出現(xiàn)內(nèi)標(biāo)擴增曲線不出現(xiàn)典型“S”型或者內(nèi)標(biāo)完全無擴增曲線的情況，導(dǎo)致重復(fù)檢測，拖延了報告發(fā)放時間，給臨床診療工作帶來不便。本實驗室在經(jīng)過一系列實驗之后，對達(dá)安公司試劑盒說明書中給出的實驗方法進(jìn)行了部分更改優(yōu)化，經(jīng)優(yōu)化實驗步驟后，內(nèi)標(biāo)的擴增曲線及起始循環(huán)Ct值均有明顯改善，現(xiàn)具體報道如下。