mRNA藥物是通過將編碼抗原蛋白的mRNA接種到人體，利用人體細胞內的遺傳物質進行表達合成抗原蛋白，通過抗原蛋白誘導和激活機體的免疫系統(tǒng)產生免疫反應，從而達到預防和治療疾病的目的。由于其具有較低的感染和突變風險，能夠同時誘導產生體液免疫和細胞免疫，免疫效能好，研發(fā)和生產周期短，容易實現(xiàn)量產等特點，目前被廣泛用于傳染性疾病、腫瘤及罕見病藥物的研發(fā)。

在mRNA的結構表征上，丹納赫生命科學擁有使用SCIEX高分辨質譜及毛細管電泳進行檢測的方案。由于mRNA全長較長、分子量較大，所以在進行加帽率及Poly A 尾檢測時，需要通過酶切的方式獲得5’端的加帽短鏈及3’端的Poly A尾短鏈，然后分別進行毛細管電泳及質譜的檢測。

mRNA加帽檢測前處理

PA 800 Plus毛細管電泳制藥分析系統(tǒng)

對mRNA樣本進行加帽率檢測

PA 800 Plus分離pd(A) 40-60 Test Mix

高分辨質譜對mRNA樣本進行加帽率檢測

mRNA在制備、加工、配方和長期儲存過程中可能會發(fā)生降解，因此通過對mRNA的純度及完整性分析，對于產品質量保證和優(yōu)化制造工藝至關重要。使用PA 800 Plus匹配LIF檢測器可有效的依據(jù)mRNA片段大小來進行高分辨率的分離和高靈敏度的檢測，該方法適用的mRNA范圍較廣，可進行0.2 kb-10.0 kb范圍內的分析。

PA 800 Plus對mRNA長度完整性進行檢測

采用冷凍透射電鏡進行載藥脂質體的檢測可以直觀地觀察脂質體的分布形態(tài)、顆粒大小和顆粒完整度，并且冷凍處理載藥脂質體是在生理狀態(tài)下對載藥脂質體進行冷凍保存，不會對脂質體造成破壞，所獲得的結果更加真實、清晰、準確。徠卡顯微系統(tǒng)擁有全套的冷凍制樣設備，包括對電鏡載網(wǎng)的噴鍍連續(xù)碳膜和輝光放電處理的EM ACE600，以及能夠實現(xiàn)對樣品安全冷凍的投入冷凍儀EM GP2，可以便捷地完成高質量的載藥脂質體的冷凍前處理。

另外，還可以采用分析型超速離心機對載藥脂質體的顆粒大小分布進行檢測，并計算游離與膠囊化藥物的比例，為脂質體或是脂質納米顆粒與mRNA藥物的混合比例提供指導。采用分析型超速離心機進行載藥脂質體檢測的優(yōu)點是：使載藥脂質體保持天然狀態(tài)，沒有破壞性，并且檢測完后可回收。

貝克曼庫爾特分析型超速離心機（AUC）

對載藥脂質體進行檢測

粒度分布是指在一定的粒徑檢測范圍內，對脂質體顆粒的大小進行分析，得到粒徑分布圖和相應的粒徑分析結果（包括中位粒徑D50，平均粒徑Mean Diameter），以此控制生產的脂質體顆粒大小，以及用于生產質控，保證批次間的一致性。因為粒度分布可影響納米載體體內分布從而影響被動靶向，所以是檢測載藥脂質體的重要指標。貝克曼庫爾特的LS 13320 XR 激光粒度分析儀采用先進的偏振光強度差散射（PIDS）技術與激光衍射相結合，可對納米級別的載藥脂質體粒度分布進行精確檢測。

LS 13320 XR 激光粒度分析儀對脂質體進行粒度分布檢測

體液中的細胞外囊泡（EV）是由多種細胞分泌的攜帶有核酸、蛋白質和脂質等物質的一種納米囊泡，在體內可發(fā)揮細胞通訊和物質傳遞的作用。因其具有良好的生物相容性、高生物滲透性和低免疫原性、低毒性等優(yōu)點，被越來越多地用于mRNA藥物的遞送系統(tǒng)的研究。

流式細胞儀可以對EVs和其他生物顆粒（包括病毒和細菌）進行定量和多參數(shù)表征。但實際上，Z靈敏的傳統(tǒng)流式細胞儀已被認為無法檢測到直徑小于300納米的EVs。由于微泡大小的范圍實際上延伸至150 nm，而外泌體的直徑在30–150 nm之間，因此這導致了一個共同的認知，即流式細胞儀只能檢測到EVs的冰山一角。

貝克曼庫爾特的CytoFLEX系列流式細胞儀是一種基于半導體集成電路化的流式細胞儀，將硅雪崩光電二極管（APD）與波分復用（WDM）結合，優(yōu)化的流通池設計和二極管激光器配對使信號強度遠大于傳統(tǒng)流式細胞儀，而噪聲遠遠小于傳統(tǒng)流式細胞儀。另外，CytoFLEX上的紫色SSC（VSSC，405 nm）充分提高了小顆粒檢測的靈敏度。

CytoFLEX進行外泌體檢測的結果

（圖D中顯示兩群Annexin-V陽性細胞群標記囊泡/外泌體微顆粒。Annexin-V dim在圖中用綠色顯示，該群微顆粒表達CD41，不表達或低表達CD63，且細胞較?。籄nnexin-V high在圖中用紅色顯示，該群微顆粒CD41+CD63+，且細胞相對較大。）

CytoFLEX流式細胞儀