培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動(dòng)物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質(zhì)。
培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基種類很多,根據(jù)配制原料的來源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基;根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基;根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等;根據(jù)使用范圍可分為細(xì)菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、真菌培養(yǎng)基等。
培養(yǎng)基配成后一般需測試并調(diào)節(jié)pH,還須進(jìn)行滅菌,通常有高溫滅菌和過濾滅菌。培養(yǎng)基由于富含營養(yǎng)物質(zhì),易被污染或變質(zhì)。配好后不宜久置,Z好現(xiàn)配現(xiàn)用。

培養(yǎng)基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后,易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì),因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),較長時(shí)間的貯存,必須放在3-6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長期保管,均改制成粉末。
培養(yǎng)基在使用前通過高壓或過濾滅菌。為了防止污染應(yīng)該注意以下事項(xiàng):
對工作細(xì)胞庫是否被污染進(jìn)行確認(rèn),對毒種工作種子批是否被污染進(jìn)行確認(rèn),對所用培養(yǎng)基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染進(jìn)行確認(rèn),都能夠通過細(xì)菌、真菌及支原體無菌試驗(yàn)來確認(rèn)并排除。同時(shí)需要驗(yàn)證無菌試驗(yàn)培養(yǎng)基的靈敏度。實(shí)際生產(chǎn)中,能夠?qū)I養(yǎng)瓊脂加入到取出的少量的配制好的培養(yǎng)液中,在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),48小時(shí)就能夠觀察有無污染。
其它:驗(yàn)證高壓滅菌設(shè)備、過濾CJ設(shè)備,從而使滅菌和CJ效果得以確保,高壓滅菌設(shè)備應(yīng)在投產(chǎn)前及其后的每6個(gè)月進(jìn)行驗(yàn)證,過濾CJ設(shè)備應(yīng)在每次CJ前、后進(jìn)行驗(yàn)證工作(至少應(yīng)在CJ后進(jìn)行一次)。
此外,應(yīng)嚴(yán)格分開有毒區(qū)與無毒區(qū),并空氣凈化系統(tǒng)及孵室各自獨(dú)立,有毒區(qū)對無毒區(qū)應(yīng)保持相對負(fù)壓,避免病毒對培養(yǎng)細(xì)胞(尤其是細(xì)胞庫)的污染。
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