培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有水、氮源、無機(jī)鹽(包括微量元素)、碳源、生長(zhǎng)因子(維生素、氨基酸、堿基、KJ素、色素、激素和血清等)等。下面就讓小編帶你了解一下培養(yǎng)基的配制。
培養(yǎng)基的配制
1.配料
配方換算→將少量水(蒸餾水,自然水)加入到容器中→根據(jù)配方對(duì)各種藥品進(jìn)行稱?。ㄒ来渭尤耄鷮⑺杷考幼悖ㄒ凰幰簧?,取藥后立即蓋上瓶蓋)。
2.溶解
淀粉溶解:加入少量冷水調(diào)成糊狀
加熱溶解:加熱溶解尤其是加有瓊脂的培養(yǎng)基,瓊脂的熔解溫度95-97℃ ,一定要煮沸,并且為了防止燒焦,需要邊加熱邊攪拌。

3.調(diào)PH
使用鹽酸或NaOH稀釋液調(diào)節(jié)培養(yǎng)基PH達(dá)到所要求的值。
4.過濾
使用濾紙或棉花進(jìn)行過濾。(有時(shí)可以省去)
5.分裝
通常往三角瓶或試管中放入培養(yǎng)基再滅菌使用。
(1)三角瓶
如果靜置培養(yǎng),那么在250ml的三角瓶置入100ml培養(yǎng)基,在50ml的三角瓶置入的培養(yǎng)基至多不能高于150ml。否則,當(dāng)滅菌時(shí),棉塞可能因培養(yǎng)基沸騰受到污染。如果搖瓶培養(yǎng),,在250ml的三角瓶放入15-20ml培養(yǎng)基,并且確保良好的通氣。
(2)試管分裝
固體斜面培養(yǎng)基通常裝試管的1/5高度,約為3-4ml;液體培養(yǎng)基通常裝試管的1/4高度,約為4-5ml。
6.包扎
分裝好后,先用棉塞塞上,再使用牛皮紙包裹好棉塞,避免滅菌時(shí)水份進(jìn)入弄濕棉塞。
7.滅菌
按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。若滅菌的時(shí)候使用過高的溫度,那么會(huì)破壞營(yíng)養(yǎng)成分,培養(yǎng)基的顏色會(huì)由于培養(yǎng)基中的糖、氨基酸變深。
8.擺斜面
滅菌后需要趁熱斜著擺放斜面的試管,使其凝固成為一個(gè)斜面,約占試管長(zhǎng)度的1/2。
9.貯存
在30℃下將培養(yǎng)基放置一天,如果沒有污染,就能夠使用。通常用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。
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