培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有水、氮源、無機鹽(包括微量元素)、碳源、生長因子(維生素、氨基酸、堿基、KJ素、色素、激素和血清等)等。下面就讓小編帶你了解一下培養(yǎng)基的配置原則。
配置原則
1、選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)
一般來說,培養(yǎng)基含有碳源、氮源、無機鹽、生長因子、水及能源是所有微生物生長繁殖的必備條件。,然而因為微生物具有極其復雜的營養(yǎng)類型,不同的微生物對于營養(yǎng)物質(zhì)有不同的需求,所以培養(yǎng)基要按照不同微生物的營養(yǎng)需求進行針對性地配制。自養(yǎng)型微生物所需要的糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸、維生素等復雜的有機物可以通過簡單的無機物合成。所以培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全可以(或應該)由簡單的無機物組成。微生物有細菌、放線菌、酵母菌、霉菌、原生動物、藻類及病毒等主要的類型,培養(yǎng)它們所需的培養(yǎng)基也都不一致。

2、營養(yǎng)物質(zhì)濃度及配比合適
如果希望微生物生長良好,那么培養(yǎng)基中需要合適濃度的營養(yǎng)物質(zhì)。若營養(yǎng)物質(zhì)濃度過高,則可能會YZ微生物的生長,若營養(yǎng)物質(zhì)濃度過低,則使微生物正常生長所需得不到滿足。此外微生物的生長繁殖和(或)代謝產(chǎn)物的形成和積累也會受到培養(yǎng)基中各營養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比的直接影響。當中,影響比較大的是碳氮比(C/N)。碳氮比指培養(yǎng)基中碳元素與氮元素的物質(zhì)的量比值,有時也指培養(yǎng)基中還原糖與粗蛋白之比。
3、控制pH條件
為了不同類型微生物的生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的條件得到滿足,需要將培養(yǎng)基的pH控制在一定的范圍內(nèi)。不同的微生物,其有著各不相同的生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的Z適pH條件。在微生物生長繁殖和代謝過程中,培養(yǎng)基pH會因為營養(yǎng)物質(zhì)被分解利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累從而發(fā)生變化,如果不控制培養(yǎng)基的pH條件,微生物生長速度和代謝產(chǎn)物產(chǎn)量會因此下降。所以為了使培養(yǎng)基pH維持相對的恒定,一般將pH緩沖劑加入到培養(yǎng)基中,一氫和二氫磷酸鹽(如KH2PO4 和K2HPO4)組成的混合物是常用的緩沖劑。在培養(yǎng)基中還有一些如氨基酸、肽、蛋白質(zhì)一樣的天然的緩沖系統(tǒng)存在著。也能夠起到緩沖的作用。
4、控制氧化還原電位(redox potential)
不同類型微生物生長對氧化還原電位(F)有不同的要求,在F值為+0.1V以上時,好氧性微生物通常都能正常的生長,當F值為+0.3一+0.4V時,Z適合好氧性微生物的生長。僅有當F值低于+0.1V時,厭氧性微生物才能生長。當F值為+0.1V以上時,兼性厭氧微生物進行好氧呼吸,當F值為+0.1V以下時進行發(fā)酵。某些微生物代謝產(chǎn)物會影響F值,氧分壓和pH和F值相關。當pH相對穩(wěn)定時,在培養(yǎng)基中加入抗壞血酸、硫化氫、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫蘇糖醇等還原性物質(zhì)可降低F值,可通過增加通氣量(如振蕩培養(yǎng)、攪拌)提高培養(yǎng)基的氧分壓,或加入氧化劑,從而增加F值。
5、原料來源的選擇
在配制培養(yǎng)基時,培養(yǎng)基成分應盡量利用廉價且易于獲得的原料,尤其在發(fā)酵工業(yè)中,需要使用大量的培養(yǎng)基,如果使用的原料成本較低,那么會有更高的經(jīng)濟價值。
6、滅菌處理
為了防止雜菌污染,必須對所用器材及工作場所進行消毒與滅菌從而獲得微生物純培養(yǎng)。對培養(yǎng)基來說,滅菌需要更加嚴格的進行。在配制培養(yǎng)基過程中,滅菌處理會受到泡沫的存在的不利影響,由于泡沫中的空氣形成隔熱層,使得難以殺死泡沫中的微生物。所以有時需要在培養(yǎng)基中加入消泡沫劑以減少泡沫的產(chǎn)生,或適當提高滅菌溫度。
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