天然培養(yǎng)基是指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基,如血漿、血清、淋巴液、雞胚浸出液等。組織培養(yǎng)技術(shù)建立早期,體外培養(yǎng)細(xì)胞都是利用天然培養(yǎng)基。但是由于天然培養(yǎng)基制作過程復(fù)雜、批間差異大,因此逐漸為合成培養(yǎng)基所替代。廣泛使用的天然培養(yǎng)基是血清,另外各種組織提取液、促進(jìn)細(xì)胞貼壁的膠原類物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也是必不可少。
血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
取材對象以及取材過是決定血清質(zhì)量高低的兩方面因素。用于取材的動物不僅必須健康無病而且還必須在在指定的出生天數(shù)之內(nèi)應(yīng)嚴(yán)格根據(jù)操作規(guī)程執(zhí)行取材的過程,要嚴(yán)格地鑒定制備出的血清的質(zhì)量。WHO公布的《用動物細(xì)胞體外培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品規(guī)程》中的要求:
1.牛血清的來源必須是文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。并且應(yīng)該有適當(dāng)?shù)谋O(jiān)測系統(tǒng)。
2.牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群,以上是一些國家的附加要求。
3.對所用牛血清中不含對所生產(chǎn)疫苗病毒的YZ物進(jìn)行證明。

4.需要通過過濾膜對血清進(jìn)行過濾CJ,確保無菌。
5.沒有受到細(xì)菌、霉菌、支原體和病毒的污染,一些國家甚至要求沒有無細(xì)菌噬菌體污染。
6.需要對細(xì)胞的繁殖具有良好的支持。
血清培養(yǎng)基主要問題
1.可能有幾百種血清的成分,尚不能夠準(zhǔn)確地知曉它們的成份、含量及其作用機(jī)制,特別是不能夠充分認(rèn)識其中一些多肽類生長因子、激素和脂類等,這給研究工作增添了很多的困難。
2.血清通常都是批量生產(chǎn)的,各個批量之間的差別也是非常的大,并且血清Z多只有一年的保存期限。所以要保證每批血清的相似性極為困難,從而限制了實驗的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性。
3.對于大多數(shù)的細(xì)胞,在體內(nèi)狀態(tài),它們接觸的生理學(xué)液體不是血清,血清只在損傷愈合以及血液凝固過程中才會接觸,某些細(xì)胞的生長(成纖維細(xì)胞)會由于血清而促進(jìn)生長,同時另一類細(xì)胞生長(表皮細(xì)胞)也會由于血清而YZ生長。
4.細(xì)胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì)會包含在血清中,例如多胺氧化酶,有細(xì)胞毒性作用的聚精胺會通過多胺氧化酶和來自高度繁殖細(xì)胞的多胺反應(yīng)(如精胺、亞精胺)形成。細(xì)胞生長會受到補(bǔ)體、抗體、細(xì)菌毒素等的影響。這些因素甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。
5.不同的動物個體,不同的血清產(chǎn)地和血清批號,都會引起每批質(zhì)量的差異,它們的成分不能夠保持一致性。
6.細(xì)胞可能會受到取材中帶入的支原體、病毒的潛在影響,可能造成實驗結(jié)果不可靠性或?qū)嶒炇 ?/span>
7.在大規(guī)模的生產(chǎn)中,血清是構(gòu)成動物細(xì)胞培養(yǎng)對生產(chǎn)成本的主要部分之一,其有昂貴的價格,來源也越來越困難。
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