透射電鏡,全稱透射電子顯微鏡。是利用高能電子束充當(dāng)照明光源而進(jìn)行放大成像的大型顯微分析設(shè)備,透射電鏡是一種具有高分辨率、高放大倍數(shù)的電子光學(xué)儀器,被廣泛應(yīng)用于材料科學(xué)等研究領(lǐng)域。
透射電鏡,是把經(jīng)加速和聚集的電子束投射到非常薄的樣品上,電子與樣品中的原子碰撞而改變方向,從而產(chǎn)生立體角散射。散射角的大小與樣品的密度、厚度相關(guān),因此可以形成明暗不同的影像,影像將在放大、聚焦后在成像器件(如熒光屏、膠片、以及感光耦合組件)上顯示出來。
由于電子的德布羅意波長(zhǎng)非常短,透射電子顯微鏡的分辨率比光學(xué)顯微鏡高的很多,可以達(dá)0.1~0.2nm,放大倍數(shù)為幾萬~百萬倍。因此,使用透射電子顯微鏡可以用于觀察樣品的精細(xì)結(jié)構(gòu),甚至可以用于觀察僅僅一列原子的結(jié)構(gòu),比光學(xué)顯微鏡所能夠觀察到的Z小的結(jié)構(gòu)小數(shù)萬倍。

在放大倍數(shù)較低的時(shí)候,透射電鏡成像的對(duì)比度主要是由于材料不同的厚度和成分造成對(duì)電子的吸收不同而造成的。而當(dāng)放大率倍數(shù)較高的時(shí)候,復(fù)雜的波動(dòng)作用會(huì)造成成像的亮度的不同,因此需要專業(yè)知識(shí)來對(duì)所得到的像進(jìn)行分析。通過使用透射電鏡不同的模式,可以通過物質(zhì)的化學(xué)特性、晶體方向、電子結(jié)構(gòu)、樣品造成的電子相移以及通常的對(duì)電子吸收對(duì)樣品成像。
對(duì)于材料科學(xué)的研究而言,透射電鏡已經(jīng)成為了一種不可或缺的研究工具,以至于在今天,已經(jīng)很難想象如果沒有透射電鏡的幫助,該如何深入開展材料科學(xué)的研究工作。
透射電鏡的主要功能有:
1、利用質(zhì)厚襯度(又稱吸收襯度)像,對(duì)樣品進(jìn)行一般形貌觀察;
2、利用電子衍射、微區(qū)電子衍射、會(huì)聚束電子衍射物等技術(shù)對(duì)樣品進(jìn)行物相分析,從而確定材料的物相、晶系,甚至空間群;
3、利用高分辨電子顯微術(shù)可以直接“看”到晶體中原子或原子團(tuán)在特定方向上的結(jié)構(gòu)投影這一特點(diǎn),確定晶體結(jié)構(gòu),大于100nm物體用低壓、低分辨電鏡即可觀察。介于100nm-10nm之間的物體用高壓、低分辨電鏡勉強(qiáng)可見。小于10nm的物體必須選用高壓、高分辨電鏡才能夠進(jìn)行觀察。
4、利用衍襯像和高分辨電子顯微像技術(shù),觀察晶體中存在的結(jié)構(gòu)缺陷,確定缺陷的種類、估算缺陷密度;界面觀察選用低壓、低分辨電鏡。位錯(cuò)觀察可用高壓、低分辨電鏡,選用高壓、高分辨為佳。層錯(cuò)觀察選用高壓、高分辨電鏡。典位錯(cuò)觀察方法是金相腐蝕法,指通過腐蝕使位錯(cuò)露頭形成“蝕坑”,使其可見,是間接觀察,效果較差。高壓、低分辨透射電鏡可以直接觀察位錯(cuò),效果好。高壓、高分辨透射電鏡可以直接觀察位錯(cuò),效果更好。
5、利用透射電鏡所附加的能量色散X射線譜儀或電子能量損失譜儀對(duì)樣品的微區(qū)化學(xué)成分進(jìn)行分析;
6、利用帶有掃描附件和能量色散X射線譜儀的透射電鏡,或者利用帶有圖像過濾器的透射電鏡,對(duì)樣品中的元素分布進(jìn)行分析,確定樣品中是否有成分偏析。
1、由于樣品制備技術(shù)的限制,對(duì)大多數(shù)生物樣品來說,一般只能達(dá)到2nm的分辨率。
2、透射電鏡圖像的分辨能力不僅取決于電鏡本身的分辨率,而且取決于樣品結(jié)構(gòu)的反差。
3、透射電鏡所用的光源是電子波,波長(zhǎng)在非可見光范圍內(nèi)無顏色反應(yīng),所形成的圖像是黑白圖像,要求圖像必須具有一定的反差。

4、生物體組織和細(xì)胞成分主要有C\H\O\N等輕元素組成,它們的原子序數(shù)較低,電子散射能力弱,相互之間的差別又很小,電鏡下的圖像反差一般較低。
5、由于電子束的穿透能力較弱,樣品必須制成超薄切片。
6、觀察面小,載網(wǎng)直接能夠?yàn)?mm,超薄切片范圍為0.3-0.8mm。
7、電子束的強(qiáng)烈照射,易損傷樣品,發(fā)生變形、升華等,甚至被擊穿破裂,可能使觀察結(jié)構(gòu)產(chǎn)生假象。
8、觀察時(shí)透射電鏡鏡筒必須保持真空,為了保證樣品在真空下不損傷,對(duì)樣品要求應(yīng)無水分。因此,不能觀察活體的生物樣本。
9、生物制樣復(fù)雜,在步驟繁多的制樣過程中,樣品容易產(chǎn)生收縮、膨脹、破碎以及內(nèi)含物丟失丟失等結(jié)構(gòu)改變。
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