瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質(zhì)的一種電泳方法。對(duì)于分子量較大的樣品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳分離。

一、配膠

根據(jù)所要分離的DNA分子的大小，對(duì)瓊脂糖粉末進(jìn)行適量的稱取，再錐形瓶中放入稱好的瓊脂糖粉末，再將適量的1×TAE電泳緩沖液。

然后在微波爐內(nèi)放入溶液加熱搖勻到完全溶化呈現(xiàn)透明狀，適當(dāng)冷卻后再將其往膠托內(nèi)倒入。

在膠完全冷凝后將其放入電泳槽，膠面必須完全浸沒(méi)于電泳槽的緩沖液里。

二、點(diǎn)樣

由于樣品之間的差異，點(diǎn)樣體系也不相同，點(diǎn)樣體系包括如下兩種：

1.樣品能夠直接進(jìn)行點(diǎn)樣。

2.樣品+6Xloading buffer

Z后要記住點(diǎn)marker，并且將膠的位置擺正。

三、電泳

點(diǎn)樣完成后，將電源連接上，將電源的參數(shù)設(shè)置好，開(kāi)始電泳。當(dāng)溴酚藍(lán)（藍(lán)色）移動(dòng)到一定的長(zhǎng)度，電泳就能夠停止。

電壓的要求為：每1厘米膠小于需要不超過(guò)20伏特的電壓樣品出孔時(shí)，使用1厘米膠3伏特的低壓15分鐘，然后將電壓調(diào)回到標(biāo)準(zhǔn)電壓，能夠跑出比較好的條帶。

四、EB染色

溴化乙淀為一種扁平分子，它能夠往核酸雙鏈的配對(duì)堿基之間嵌入，當(dāng)紫外線對(duì)EB-DNA復(fù)合物照射的時(shí)候，其有不一樣的效應(yīng)出現(xiàn)。

值得注意的是：要對(duì)污染區(qū)和非污染區(qū)嚴(yán)格地區(qū)分，不要往非污染區(qū)放入從污染區(qū)拿到的物品，應(yīng)當(dāng)要及時(shí)丟棄碰到過(guò)EB的手套。

五、成像拍照

圖像的攝錄，處理和打印通過(guò)圖像分析系統(tǒng)一體化。為了使條帶不丟失，使攝錄凝膠圖像在低照度下的靈敏度有所保證，需要采用高分辨率的CCD。

六、膠圖分析