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瓊脂糖凝膠電泳操作注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2025-10-23 02:18:18 類型:電泳儀的常見故障|注意事項(xiàng) 閱讀量:7629
導(dǎo)讀:瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質(zhì)的一種電泳方法。對(duì)于分子量較大的樣品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳分離。

瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質(zhì)的一種電泳方法。對(duì)于分子量較大的樣品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳分離。


一、配膠的注意事項(xiàng)

1.要對(duì)電子秤的精度保持時(shí)刻注意,保證電子秤干凈,按照濃度的不同對(duì)瓊脂糖進(jìn)行稱取。

2.需要適當(dāng)?shù)膶?duì)TAE進(jìn)行添加,避免配出來的膠太薄,使得濃度過低或者膠孔過淺。

3.倒膠的時(shí)候必須要洗干凈膠托,并且將膠擦拭干凈。倒膠的時(shí)候要等到一定的溫度再搖勻盡量不要讓氣泡產(chǎn)生。如果膠液的溫度太高,要將其頂在膠托上,避免膠托變形。


二、點(diǎn)樣電泳的注意事項(xiàng)

1.要使96孔塑料板干凈,要點(diǎn)均勻loading,將點(diǎn)的量控制再1-2微升,并且將對(duì)應(yīng)的標(biāo)記做好。


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2.加樣的時(shí)候要上緊槍頭,吸樣準(zhǔn)確均勻,排液的時(shí)候,不要在吸頭留有殘留。

3.在點(diǎn)樣完成后需要將膠墊及時(shí)的蓋上,值得注意的是不要將蓋子蓋反。

4.Z好再點(diǎn)電泳之前先對(duì)待用膠進(jìn)行檢查來確定其是否合格。點(diǎn)電泳時(shí),要對(duì)準(zhǔn)膠孔,盡量將所有的樣都點(diǎn)完。

5.在點(diǎn)樣完成后,不要將點(diǎn)marker忘記并且將膠位擺正。不要插倒正負(fù)極,要蓋緊電泳槽的蓋子。


三、EB染色的注意事項(xiàng)

1.需要準(zhǔn)確的切膠,要穩(wěn)定的取膠,要慎重的泡膠,防止EB濺起。

2.需要及時(shí)丟棄碰到EB的手套。

3.要適時(shí)的更換EB液,要清洗盤子。

4.不要將抹布交叉使用,要對(duì)抹布嚴(yán)格的區(qū)分。


四、凝膠圖像分析儀的使用的注意事項(xiàng)

1.為了不對(duì)膠圖的清晰度產(chǎn)生影響,在使用之前需要注意清潔。

2.照膠的時(shí)候使用紫外燈的時(shí)間應(yīng)當(dāng)盡量的減少。

3.拍照的時(shí)候,應(yīng)當(dāng)先將攝像頭關(guān)掉再將紫外燈關(guān)掉,不能顛倒順序,應(yīng)該根據(jù)照膠的流程嚴(yán)格的執(zhí)行。

4.要及時(shí)丟棄照好的膠。



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