通過具有同源性序列的核酸單鏈在適當(dāng)條件下互補(bǔ)形成穩(wěn)定的DNARNA或DNADNA鏈的原理,利用高度特異性基因片段制備基因探針來識別細(xì)菌,以上就是基因探針技術(shù)基因探針技術(shù)。使得基因片段長度多態(tài)性所需要分析的條帶數(shù)減少即是基因探針的優(yōu)點(diǎn)。例如GEN-PROBE基因探針檢測系統(tǒng)對分離到的單個菌落,能夠使得微生物的確證試驗(yàn)在30分中內(nèi)完成。目標(biāo)菌以外的其他菌不能夠鑒定是基因探針的缺點(diǎn)。下面就讓小編帶你了解一下常見的微生物鑒定技術(shù)。

生物化學(xué)技術(shù)
PCR技術(shù)是利用體外酶促反應(yīng)合成特異性DNA片段,再通過擴(kuò)增產(chǎn)物來識別細(xì)菌。因?yàn)镻CR靈敏度高,在理論上能夠使得一個細(xì)菌的拷貝基因被檢測出來,所以在細(xì)菌的檢測過程中,僅需要短時間增菌甚至可以不增菌,就能夠通過PCR進(jìn)行篩選,使得大量的時間得到節(jié)省。然而PCR技術(shù)亦具有一些不足之處:其他微生物DNA、食物成分以及增菌培養(yǎng)基成分對Taq酶具有YZ作用,可能造成假陰性的檢驗(yàn)結(jié)果。操作的過程必須要有嚴(yán)格的要求,因?yàn)槲⒘康耐庠葱訢NA進(jìn)入PCR后就能夠?qū)е聶z驗(yàn)結(jié)果假陽性,擴(kuò)增的過程有一定的裝配誤差,也會影響檢測的結(jié)果。因此PCR技術(shù)操作者需要有極高的自身素質(zhì),基層單位無法做到。而且這項(xiàng)技術(shù)短時間內(nèi)也不會產(chǎn)生經(jīng)濟(jì)效益和社會效益,所以其在在基層的應(yīng)用受到了影響。
全自動微生物分析系統(tǒng)(AMS)
將傳統(tǒng)生化反應(yīng)與微生物檢測技術(shù)和現(xiàn)代計(jì)算機(jī)技術(shù)相結(jié)合,使用概率Zda近似值模型法對微生物進(jìn)行自動檢測的技術(shù)即是全自動微生物分析系統(tǒng)(AMS)。其能夠?qū)τ森h(huán)境、原料及產(chǎn)品中分離的微生物進(jìn)行鑒定。全自動微生物分析系統(tǒng)(AMS)報(bào)告結(jié)果只需要4~18 h。通過常規(guī)的方法鑒定細(xì)菌,僅可以得到是或不是某種菌,如果想得知到底是哪種菌還需進(jìn)行大量、煩瑣的生物化學(xué)試驗(yàn),但是全自動微生物分析系統(tǒng)(AMS)能夠?qū)κ鞘裁淳苯訄?bào)告。
免疫學(xué)技術(shù)
免疫學(xué)技術(shù)是通過抗原和抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)再輔以免疫放大技術(shù)來鑒別細(xì)菌。在進(jìn)行選擇性增菌后,樣品不需要分離就能夠利用免疫技術(shù)進(jìn)行篩選,以上就是免疫方法的優(yōu)點(diǎn)。因?yàn)槊庖叻ㄓ泻芨叩撵`敏度,所以經(jīng)過增菌后,樣品的檢出度能夠在很短的時間里達(dá)到,可以在很短的時間里完成抗原和抗體的結(jié)合反應(yīng)。免疫學(xué)技術(shù)對于操作者沒有很高的要求,是目前基層單位應(yīng)用Z廣泛,時間也Z長的一項(xiàng)快速檢測技術(shù)。免疫學(xué)技術(shù)有如下方法:
微型自動熒光酶標(biāo)分析法
利用酶聯(lián)熒光免疫分析技術(shù),通過抗原-抗體特異反應(yīng),分離出目標(biāo)菌,由特殊儀器根據(jù)熒光的強(qiáng)弱自動判斷樣品的陽性或陰性,這種方法就是微型自動熒光酶標(biāo)分析法(mini VIDAS)。VIDAS法對于凍肉中沙門菌的檢測具有很高的特異性與靈敏度,被用來檢測進(jìn)出口凍肉,能夠使檢驗(yàn)時間大大縮短,通關(guān)速度大大加快,對凍肉中李斯特氏菌的檢測也是這樣。
膠體金免疫層析法
金黃色葡萄球菌可以通過膠體金免疫層析法靈敏、快速地檢測出。使用膠體金免疫層析法檢測乙型肝炎表面抗原,能夠使得工作效率大大地提高。
免疫磁珠法
使用免疫磁珠法夠使得副溶血性弧菌更加有效地收集、濃縮,使得食品以及環(huán)境樣品中的病原性副溶血性弧菌的檢出率得到顯著地提高。
ATP生物發(fā)光法
ATP生物發(fā)光法是一種用來檢測食品生產(chǎn)加工設(shè)備潔凈度的快速檢測方法,這種方法發(fā)展迅速。使用ATP生物發(fā)光分析技術(shù)以及體細(xì)胞清除技術(shù)對細(xì)菌ATP和體細(xì)胞ATP進(jìn)行測量,細(xì)菌ATP的量與細(xì)菌數(shù)成正比,使用ATP生物發(fā)光分析技術(shù)檢測食品器具的現(xiàn)場衛(wèi)生或者肉類食品細(xì)菌污染狀況,都可以達(dá)到迅速適合的目的。
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