透射電鏡，全稱透射電子顯微鏡，可以看到在光學(xué)顯微鏡下無法看清的小于0.2um的細(xì)微結(jié)構(gòu)，這些結(jié)構(gòu)稱為亞顯微結(jié)構(gòu)或超微結(jié)構(gòu)。透射電鏡成像方式與光學(xué)生物顯微鏡相似，只是以電子透鏡代替玻璃透鏡。

透射電鏡的使用方法

　　抽真空：接通透射電鏡總電源，打開冷卻水，接通抽真空開關(guān)，真空系統(tǒng)就自動的抽真空。一般經(jīng)15～20min后，真空度即可達到10^-4~10^-5Torr，持高真空指示燈亮后，透射電鏡即可開始使用。

　　加電子槍高壓：接通透射電鏡鏡筒內(nèi)的電源，給電子槍和透鏡供電，由低至高速級給電子槍加高壓，直至所需值。

　　更換樣品：通常在透射電鏡電子槍加高壓而關(guān)斷燈絲電源的條件下置換樣品。取出樣品時，首先打開過渡室和樣品空間的空氣鎖緊閥門，向外拉樣品桿，然后將過渡室放氣，Z終拉出樣品桿，從樣品座中取出樣品。換上所需觀察的樣品，必須將樣品鋼網(wǎng)牢固地突持在樣品桿的樣品座中，然后將樣品桿插入過渡室，抽過渡室低真空并使其達到真空度要求，打開過渡室和樣品空間的空氣鎖緊閥，將樣品桿推進樣品室。

　　加燈絲電流并使電子束對中：順時針方向轉(zhuǎn)動透射電鏡燈絲電流鈕，慢慢加大燈絲電流，注意電子束流表的指示和熒光屏亮度，當(dāng)燈絲電流加大到一定值時，束流表的指示和熒光屏亮度不再增大，即達到燈絲電流飽和值。

　　圖象觀察：當(dāng)束流調(diào)到所需值后，Z終推進樣品桿，用樣品平移傳動裝置把樣品座調(diào)到觀察位置，即可進行圖象觀察。首先在透射電鏡低倍下觀察，選擇感興趣的視場，并將其移到熒屏ZX，然后調(diào)節(jié)透射電鏡中間鏡電流確定放大倍數(shù)，調(diào)節(jié)透射電鏡物鏡電流使熒光屏上的圖象聚焦至Z清晰。

　　照相記錄：當(dāng)熒光屏上的圖象聚，焦至Z清晰時，便可進行照相記錄。調(diào)節(jié)圖象亮度和相應(yīng)的暖個時間。當(dāng)二者配匹得當(dāng)(曝光表上綠燈亮?xí)r)，拉開曝光快門，將熒光屏翻起，讓攜帶樣品信息的電子束照射到膠片上使其感光，正常曝光時間以4～8s為宜。

　　停機：順序地關(guān)斷透射電鏡燈絲電源、關(guān)斷高壓、鏡筒內(nèi)的電源、關(guān)斷抽真空開關(guān)、約30min后關(guān)斷總電源和冷卻水。

透射電鏡的特點

　　1、由于樣品制備技術(shù)的限制，對大多數(shù)生物樣品來說，透射電鏡分辨率Zgao為2nm。

　　2、透射電鏡圖像的分辨能力不僅取決于透射電鏡本身的分辨率，而且取決于樣品結(jié)構(gòu)的反差。

　　3、透射電鏡所用的光源是電子波，波長在非可見光范圍內(nèi)無顏色反應(yīng)，所形成的圖像是黑白圖像，要求圖像必須具有一定的反差。

　　4、生物體組織和細(xì)胞成分主要有C/H/O/N等輕元素組成，它們的原子序數(shù)較低，電子散射能力弱，相互之間的差別又很小，透射電鏡下的圖像反差一般較低。

　　5、由于電子束的穿透能力較弱，樣品必須制成超薄切片。

　　6、透射電鏡觀察面小，載網(wǎng)直接能夠為3mm，超薄切片范圍為0.3-0.8mm。

　　7、電子束的強烈照射，易損傷樣品，發(fā)生變形、升華等，甚至被擊穿破裂，可能使觀察結(jié)構(gòu)產(chǎn)生假象。

　　8、觀察時透射電鏡鏡筒必須保持真空，為了保證樣品在真空下不損傷，對樣品要求應(yīng)無水分。因此，不能觀察活體的生物樣本。

　　9、生物制樣復(fù)雜，在步驟繁多的制樣過程中，樣品容易產(chǎn)生收縮、膨脹、破碎以及內(nèi)含物丟失丟失等結(jié)構(gòu)改變。

透射電鏡的注意事項

　　1、透射電鏡常開機，多使用，這樣就能隨時掌握透射電鏡工作情況，隨時注意觀察圖、光、聲、真空、氣壓、電源的變化情況，及時調(diào)節(jié)，作好記錄，時間長了肯定會積累很多經(jīng)驗。

　　2、注意空氣濕度、電壓要穩(wěn)定、氣體要清潔干燥、防止小樣品掉入，尤其是細(xì)顆粒，粉末、防止碰撞。

　　3、監(jiān)視透射電鏡電子槍內(nèi)的氟里昂是否降低，監(jiān)視機透射電鏡械泵里的油是否降低到水平線以下，空氣壓縮機時常放放氣，循環(huán)水裝置內(nèi)的水要定期更換，保持室內(nèi)濕度在40~70%，溫度在15~25度。透射電鏡的修理來說就要有較高的技術(shù)水平，一要有興趣，二要有悟性，主要是實際動手能力，和高超的綜合知識的靈活運用，同時還要靠經(jīng)驗的積累，Z好是學(xué)電子學(xué)的人，又有實際能力來管理透射電鏡。

　　4、旋轉(zhuǎn)泵用的真空油有條件Z好一年換一次油。油臟的快慢主要和實驗室潔凈程度、濕度有關(guān)。透射電鏡不用Z好也開著，每天抽抽真空，隔一兩天電路通通電，透射電鏡Z好每周開兩天，尤其是夏天。