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臨床ELISA測(cè)定中可能會(huì)出現(xiàn)的問(wèn)題

本文由 研域(上海)化學(xué)試劑有限公司 整理匯編

2018-09-19 10:00 496閱讀次數(shù)

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盡管ELISA測(cè)定的操作步驟非常簡(jiǎn)單,但有可能會(huì)影響測(cè)定結(jié)果的因素卻較多,分布在測(cè)定操作的各步之中,尤以加樣、溫育和洗板為甚。為幫助大家分析查找測(cè)定中出現(xiàn)問(wèn)題的可能原因,特對(duì)常見(jiàn)問(wèn)題及原因歸納總結(jié)于下表。臨床ELISA測(cè)定中可能會(huì)出現(xiàn)的問(wèn)題及可能的原因問(wèn)題可能的原因(非試劑盒本身的原因)1.弱陽(yáng)性質(zhì)控樣本檢測(cè)不出溫育的時(shí)間或溫度不夠;顯色反應(yīng)時(shí)間太短;所用配制緩沖液的蒸餾水有問(wèn)題2.測(cè)定的重復(fù)性差(相同樣本兩次測(cè)定結(jié)果不一致)這是典型的由測(cè)定操作引起的問(wèn)題,包括(1)加樣本及試劑量不準(zhǔn);孔間不一致;(2)加樣過(guò)快,孔間發(fā)生污染;(3)加錯(cuò)樣本;(4)加樣本及試劑時(shí),加在孔壁上部非包被區(qū);(5)不同批號(hào)試劑盒中組分混用;(6)溫育時(shí)間、洗板、顯色時(shí)間不一致;(7)孔內(nèi)污染雜物;(8)酶標(biāo)儀濾光片不正確;(9)血清標(biāo)本未完全凝固即加入,反應(yīng)孔內(nèi)出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血細(xì)胞,易出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)等。3.白板(陽(yáng)性對(duì)照不顯色)(1)漏加酶結(jié)合物;(2)洗板液配制中出現(xiàn)問(wèn)題,如量筒不干凈,含酶YZ物(如疊氮鈉)等。(3)漏加顯色劑A或B;(4)終止劑當(dāng)顯色劑使用。4.全部板孔均有顯色(1)洗板不干凈;(2)顯色液變質(zhì);(3)加底物的吸光受酶污染;(4)洗板液受酶等污染。我公司代理美國(guó)知名品牌RDelisa試劑盒,同時(shí)在標(biāo)準(zhǔn)品、抗體、血清、生物試劑等方面進(jìn)行深入研發(fā),國(guó)慶新產(chǎn)品已經(jīng)上市,歡迎電詢我公司經(jīng)理。

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