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人SAALDL復(fù)合物(SAALDL)檢測試劑盒
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2024-09-28 01:07 226閱讀次數(shù)
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人SAALDL復(fù)合物(SAALDL)檢測試劑盒
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人SAALDL復(fù)合物(SAALDL)檢測試劑盒
- 人SAALDL復(fù)合物(SAALDL)檢測試劑盒[詳細]
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2024-09-28 01:07
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人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)檢測試劑盒
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人凝血酶-抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com人凝血酶-抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人TAT單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的TAT與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人TAT,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,TAT濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中TAT濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):0.8ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清作1:100稀釋(取10ul,加標本稀釋液990ul,稀釋100倍)。2.標準品液配制:使用前加入0.2ml蒸餾水混勻,配成4000pg/ml的溶液。設(shè)標準管8管,每管加入標本稀釋液200ul。在**管中加入4000pg/ml的標準品溶液200ul混勻后用加樣器吸出200ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出200ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)TAT含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的TAT檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人TAT。不與人其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人 (SFMC)說明書,人可溶性纖維蛋白單體復(fù)合物Elisa試劑盒
- 人(SFMC)說明書,人可溶性纖維蛋白單體復(fù)合物Elisa試劑盒本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人可溶性纖維蛋白單體復(fù)合物(SFMC)水平。用純化的人可溶性纖維蛋白單體復(fù)合物(SFMC)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入可溶性纖維蛋白單體復(fù)合物(SFMC),再與HRP標記的可溶性纖維蛋白單體復(fù)合物(SFMC)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的可溶性纖維蛋白單體復(fù)合物(SFMC)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人可溶性纖維蛋白單體復(fù)合物(SFMC)含量。人(SFMC)說明書,人可溶性纖維蛋白單體復(fù)合物Elisa試劑盒本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中可溶性纖維蛋白單體復(fù)合物(SFMC)的含量。試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品:90μg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存人(SFMC)說明書,人可溶性纖維蛋白單體復(fù)合物Elisa試劑盒小鼠氧化低密度脂蛋白檢測原理(OxLDL)夾心ELISA檢測試劑盒小鼠糖原磷酸化酶同工酶BB檢測原理(GP-BB)夾心ELISA檢測試劑盒尿素瓊脂,250g培養(yǎng)基尿素瓊脂價格Ratanti-Monocyteantibody,AMAELISAKit96T/48T,禽膽鹽,BR培養(yǎng)基禽膽鹽價格HumanArginase,ArgELISAKit96T/48T,PoFAineHyaluronicacid,HAELISAKit96T/48T,PoFAineVascularEndothelial-CadherinComplex,VE-cadELISAKit96T/48T,人前列腺素D合成酶檢測原理(PGDS)ELISA試劑盒步驟亮綠乳糖培養(yǎng)液(BGB),250g培養(yǎng)基亮綠乳糖培養(yǎng)液(BGB)價格小鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM檢測原理(PIAb-IgG/IgM)夾心ELISA檢測試劑盒MouseOsteoprotegerin,OPGELISAKIT96T/48T,HumaninteFAellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISAKit96T/48T,PoFAineFollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit96T豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物檢測原理(AGEs)夾心ELISA檢測試劑盒RatVascularEndothelialcellGrowthFactorB,VEGF-BELISAkit96T/48T,HumanPolySeriumAntigen,PHSAELISAKit96T/48T,HumanOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAkit96T/48T,RatCollagenTypeⅣ,ColⅣELISAKIT96T/48T,Humanthrombomodulin,TMELISAKit96T/48T,人(SFMC)說明書,人可溶性纖維蛋白單體復(fù)合物Elisa試劑盒[詳細]
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2018-10-23 10:30
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狗可溶性纖維蛋白單體復(fù)合物(SFMC)試劑盒檢測
- 狗可溶性纖維蛋白單體復(fù)合物(SFMC)試劑盒檢測[詳細]
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2015-04-23 00:00
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豬凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA檢測試劑盒
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2015-07-31 00:00
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人纖溶酶-抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com人纖溶酶-抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人PAP單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的PAP與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人PAP,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,PAP濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中PAP濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):2000ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清測定前用標本稀釋液至少作1:20稀釋(取10ul,加標本稀釋液190ul,稀釋20倍)。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成2000ng/ml的溶液。設(shè)標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入2000ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標準品200、100、50、25、12.5、6.25、3.12、0ng/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)PAP含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的PAP檢測濃度小于1.5ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人PAP。不與人其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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豬末端補體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA檢測試劑盒
- 豬末端補體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA檢測試劑盒[詳細]
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2015-07-24 00:00
課件
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小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物 (PAP) ELISA 檢測試劑盒
- 試驗原理:PAP試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知PAP濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將PAP和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中PAP的濃度呈比例關(guān)系。小鼠(Mouse)纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA檢測試劑盒試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品:800ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標準品稀釋緩沖液1瓶(4.0ml)1瓶(2.0ml)即用型生物素標記的抗PAP抗體1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA檢測試劑盒安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1.試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA檢測試劑盒試劑的準備1.標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:800ng/ml(6號標準品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。400ng/ml(5號標準品)100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液200ng/ml(4號標準品)100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液100ng/ml(3號標準品)100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液50ng/ml(2號標準品)100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液25ng/ml(1號標準品)100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0ng/ml(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標準品濃度(ng/ml)A800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的PAP標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的PAP含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800ng/ml4、敏感度:1.0ng/ml[詳細]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物I(NADH-輔酶Q還原酶)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物和特異性YZ劑,通過反應(yīng)系統(tǒng)測定樣品中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用比色法測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種純化線粒體樣品(動物、人體、酵母)以及細胞或組織裂解懸液樣品的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)-輔酶Q還原酶的特異性活性檢測。其用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物I,通常稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸輔酶Q還原酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidecoenzymeQreductase;NADH-CoQreductase),又稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidedehydrogenase;NADHdehydrogenase),是線粒體電子傳遞鏈中Zda的結(jié)構(gòu)成分:含有30至40多個多肽結(jié)構(gòu)。其特征性的酶活性是魚藤酮敏感的NADH-輔酶Q還原酶(NADH:QReductase)。復(fù)合物I催化線粒體內(nèi)電子由供體NADH傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體(泛醌;ubiquinone)的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng),為整個呼吸鏈反應(yīng)系統(tǒng)的**步?;谳o酶Q底物,在魚藤酮存在與否的情況下,通過NADH-輔酶Q還原酶的催化,轉(zhuǎn)化成還原型泛醌(CoQH2),同時還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD),在分光光度儀下產(chǎn)生吸收峰值的變化(340nm波長),由此定量測定NADH-輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物抗體說明書試劑盒檢測說明
- 異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物抗體說明書試劑盒檢測說明試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T8U/L-240U/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清樣本中異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hnRNP/RA33)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hnRNP/RA33)水平。用純化的人hnRNP/RA33抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入hnRNP/RA33,再與HRP標記的hnRNP/RA33抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的hnRNP/RA33呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hnRNP/RA33)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(480U/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。240U/L5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液120U/L4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液60U/L3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液30U/L2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液15U/L1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-09-19 10:00
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2023-08-07 17:21
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